摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
材料与方法 | 第9-20页 |
1 细胞株 | 第9页 |
2 实验仪器 | 第9-10页 |
3 化学试剂 | 第10-11页 |
3.1 细胞培养相关试剂 | 第10页 |
3.2 实时荧光定量PCR相关试剂 | 第10页 |
3.3 Western blot相关试剂 | 第10页 |
3.4 基因过表达和沉默相关试剂 | 第10页 |
3.5 免疫荧光相关试剂 | 第10-11页 |
3.6 免疫组织化学相关试剂 | 第11页 |
4 主要实验试剂配制方法 | 第11-12页 |
4.1 细胞培养相关试剂配制方法 | 第11页 |
4.2 Western blot相关试剂配制方法 | 第11-12页 |
5 细胞培养相关方法 | 第12-13页 |
5.1 细胞培养 | 第12页 |
5.2 细胞复苏 | 第12页 |
5.3 细胞传代 | 第12页 |
5.4 细胞冻存 | 第12-13页 |
5.5 细胞计数及铺板 | 第13页 |
6 实时荧光定量PCR法测定细胞中基因的相对表达量 | 第13-14页 |
7 免疫印迹实验 (Western blot) 检测细胞中蛋白的表达量 | 第14-16页 |
7.1 蛋白的提取和定量 | 第14页 |
7.2 免疫印迹实验 | 第14-16页 |
8 过表达SMMC7721细胞的HBx基因 | 第16页 |
9 沉默PLC/PRF/5 细胞的HBx基因 | 第16-17页 |
10 免疫荧光检测两种细胞中HBx和PD-L1的表达和定位情况 | 第17页 |
11 Transwell实验测定肝癌细胞的迁移和侵袭 | 第17-18页 |
12 免疫组织化学方法检测肝癌组织中PD-L1的表达 | 第18-19页 |
13 统计学处理 | 第19-20页 |
结果 | 第20-26页 |
1 SMMC7721和PLC/PRF/5 细胞中HBx和PD-L1的定位、表达及相关性 | 第20-21页 |
1.1 SMMC7721和PLC/PRF/5 细胞中HBx和PD-L1的定位 | 第20页 |
1.2 在基因和蛋白水平检测SMMC7721和PLC/PRF/5 细胞中HBx和PD-L1的表达及其相关性 | 第20-21页 |
2 SMMC7721和PLC/PRF/5 细胞中HBx上调PD-L1的表达 | 第21-22页 |
3 HBx通过NF-κB和JAK/STAT信号通路上调PD-L1的表达 | 第22-23页 |
4 HBx增强了肝癌细胞的迁移和侵袭能力 | 第23页 |
5 肝癌组织标本中PD-L1的表达情况和临床价值 | 第23-26页 |
讨论 | 第26-28页 |
结论 | 第28-29页 |
参考文献 | 第29-32页 |
综述 | 第32-47页 |
综述参考文献 | 第41-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
缩略词表(附录) | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |