摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一部分 前言 | 第9-12页 |
1.1 研究背景 | 第9-11页 |
1.1.1 肺癌及其治疗 | 第9-10页 |
1.1.2 细胞凋亡 | 第10-11页 |
1.2 研究目的及意义 | 第11页 |
1.3 研究技术路线 | 第11-12页 |
第二部分 实验用试剂与仪器 | 第12-27页 |
2.1 实验材料 | 第12页 |
2.1.1 实验用细胞系 | 第12页 |
2.1.2 实验用药物 | 第12页 |
2.2 主要用到的药品 | 第12-13页 |
2.3 主要实验用仪器 | 第13-14页 |
2.4 主要实验用试剂的配置 | 第14-27页 |
2.4.1 实验用药物 | 第14页 |
2.4.2 基础准备实验中试剂的配置 | 第14-17页 |
2.4.3 MTT及台盼蓝拒染实验所用试剂的配置 | 第17页 |
2.4.4 A549细胞显微形态学观察中用到的试剂配置 | 第17-18页 |
2.4.5 细胞凋亡机制探讨中所用的试剂配置 | 第18-27页 |
第三部分 实验方法 | 第27-34页 |
3.1 基础实验 | 第27页 |
3.1.1 A549细胞的复苏 | 第27页 |
3.1.2 A549细胞的传代 | 第27页 |
3.1.3 A549细胞的冻存 | 第27页 |
3.2 岗田酸、姜黄素及其联合对A549细胞增殖的影响 | 第27-29页 |
3.2.1 MTT实验检测岗田酸对A549细胞的抑制率 | 第27-28页 |
3.2.2 MTT实验检测姜黄素对A549细胞的抑制率 | 第28页 |
3.2.3 MTT检测两药联合对A549细胞的抑制率 | 第28页 |
3.2.4 台盼蓝拒染法测定活细胞数目 | 第28-29页 |
3.3 岗田酸、姜黄素及其联合作用下A549细胞显微形态的变化 | 第29-30页 |
3.3.1 倒置相差显微镜观察药物处理后A549细胞的形态变化 | 第29页 |
3.3.2 Giemsa染色法观察药物作用下A549细胞的形态变化 | 第29页 |
3.3.3 Hoechst33258染色观察药物作用下的A549细胞的核形态变化 | 第29-30页 |
3.3.4 扫描电镜观察药物作用下细胞表面结构的变化 | 第30页 |
3.3.5 透射电镜观察药物作用下细胞超微结构的改变 | 第30页 |
3.4 岗田酸、姜黄素及联合作用下细胞凋亡机制 | 第30-34页 |
3.4.1 活性氧试剂盒检测A549细胞内活性氧的水平 | 第30-31页 |
3.4.2 Rhodamine 123 检测线粒体膜电位的变化 | 第31页 |
3.4.3 Jc-1 试剂盒检测线粒体去极化 | 第31页 |
3.4.4 细胞总蛋白的提取 | 第31页 |
3.4.5 Western Blot检测线粒体通路中相关蛋白含量 | 第31-32页 |
3.4.6 琼脂糖凝胶电泳观察药物作用下A549细胞的DNA变化 | 第32-34页 |
第四部分 实验结果 | 第34-49页 |
4.1 岗田酸、姜黄素及联合对A549细胞增殖的影响 | 第34-38页 |
4.1.1 MTT实验检测岗田酸对A549细胞增殖抑制率 | 第34页 |
4.1.2 MTT实验检测姜黄素对A549细胞增殖抑制率 | 第34-35页 |
4.1.3 MTT实验检测岗田酸联合姜黄素对A549细胞的增殖抑制率 | 第35-38页 |
4.1.4 台盼蓝拒染检测药物作用下A549活细胞数目的变化 | 第38页 |
4.2 岗田酸与姜黄素及联合作用下A549细胞显微形态的变化 | 第38-44页 |
4.2.1 倒置相差显微镜观察药物作用下A549细胞形态变化 | 第38-40页 |
4.2.2 Giemsa染色观察药物作用下A549细胞的形态变化 | 第40页 |
4.2.3 Hoechst33258染色观察药物处理下的A549细胞的核形态变化 | 第40-41页 |
4.2.4 扫描电镜观察药物作用下细胞表面结构的变化 | 第41-42页 |
4.2.5 透射电镜观察药物作用下细胞全貌的变化 | 第42-43页 |
4.2.6 透射电镜观察药物作用下细胞膜结构变化 | 第43-44页 |
4.3 岗田酸、姜黄素及联合作用下细胞凋亡机制的探讨 | 第44-49页 |
4.3.1 活性氧试剂盒检测A549细胞内活性氧水平 | 第44页 |
4.3.2 Rhodamine 123 检测线粒体膜电位的变化 | 第44-45页 |
4.3.3 Jc-1 试剂盒检测A549细胞内线粒体去极化 | 第45-46页 |
4.3.4 蛋白标准曲线 | 第46-47页 |
4.3.5 Westertn Blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白含量 | 第47页 |
4.3.6 琼脂糖凝胶电泳观察药物作用下A549细胞的DNA变化 | 第47-49页 |
第五部分 讨论与分析 | 第49-53页 |
5.1 岗田酸、姜黄素及其联合对A549细胞增殖的影响 | 第49页 |
5.2 岗田酸、姜黄素及其联合作用下A549细胞显微形态的变化 | 第49-50页 |
5.3 岗田酸、姜黄素及联合作用下细胞凋亡机制的探讨 | 第50-53页 |
第六部分 结论与展望 | 第53-54页 |
6.1 结论 | 第53页 |
6.2 展望 | 第53-54页 |
英文简写说明 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |