| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第7-12页 |
| 一、文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 植物缺铁反应研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 缺铁适应性反应在形态学和生理学上的表现 | 第13-14页 |
| 1.1.2 缺铁适应性反应的分子调控机制 | 第14-15页 |
| 1.2 植物缺铁信号物质与调控机制 | 第15-16页 |
| 1.3 乙烯在缺铁胁迫中的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 乙烯生物合成与信号转导 | 第16-17页 |
| 1.3.2 乙烯通路中重要基因在铁吸收转运中的功能 | 第17-18页 |
| 1.4 ERF转录因子在逆境胁迫中的作用 | 第18-20页 |
| 1.4.1 ERFs的结构和功能 | 第18页 |
| 1.4.2 ERFs在生物逆境胁迫中的作用 | 第18-19页 |
| 1.4.3 ERFs在非生物逆境胁迫中的作用 | 第19-20页 |
| 1.5 苹果缺铁响应研究进展 | 第20-21页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 二、材料与方法 | 第22-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第22页 |
| 2.1.3 酶、试剂盒及化学药品 | 第22页 |
| 2.1.4 常用试剂及培养基配置 | 第22-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 植物材料培养 | 第24页 |
| 2.2.2 叶绿素测定方法 | 第24-25页 |
| 2.2.3 铁、镁含量检测 | 第25页 |
| 2.2.4 根际pH定量及定位检测 | 第25页 |
| 2.2.5 根部H~+流速检测 | 第25-26页 |
| 2.2.6 根际质外体pH荧光检测 | 第26页 |
| 2.2.7 根际三价铁还原酶活性定量及定位检测 | 第26页 |
| 2.2.8 电镜分析叶绿体超微结构和根毛形态 | 第26页 |
| 2.2.9 苹果乙烯测定 | 第26-27页 |
| 2.2.10 植物总RNA的提取、纯化与cDNA合成 | 第27-28页 |
| 2.2.11 荧光定量PCR | 第28页 |
| 2.2.12 目的基因的克隆 | 第28-30页 |
| 2.2.13 重组质粒DNA提取 | 第30-31页 |
| 2.2.14 基因序列分析和同源性比对 | 第31页 |
| 2.2.15 植物DNA提取 | 第31页 |
| 2.2.16 基因启动子克隆 | 第31-32页 |
| 2.2.17 载体构建 | 第32页 |
| 2.2.18 酵母杂交实验 | 第32-33页 |
| 2.2.19 烟草注射实验 | 第33-34页 |
| 2.2.20 病毒诱导的基因沉默(VIGS) | 第34-36页 |
| 三、结果与分析 | 第36-74页 |
| 3.1 乙烯在苹果砧木缺铁适应性响应中的作用 | 第36-43页 |
| 3.1.1 缺铁诱导苹果砧木产生乙烯 | 第36-37页 |
| 3.1.2 外源乙烯处理对苹果砧木缺铁表型的影响 | 第37-38页 |
| 3.1.3 乙烯对苹果砧木H~+释放量的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.4 乙烯对苹果砧木三价铁还原酶活性的影响 | 第39-40页 |
| 3.1.5 乙烯对苹果砧木活性铁含量、铁吸收基因表达的影响 | 第40-41页 |
| 3.1.6 乙烯响应因子ERFs在苹果砧木中表达差异 | 第41-43页 |
| 3.1.7 转录因子与铁吸收功能基因表达模式 | 第43页 |
| 3.2 MxERF4和MxERF72共同参与苹果砧木缺铁响应 | 第43-56页 |
| 3.2.1 MxERF4和MxERF72影响MxIRT1或MxHA2启动子活性 | 第43-45页 |
| 3.2.2 MxERF4/MxERF72与MxFIT和MxIRO2蛋白互作 | 第45-49页 |
| 3.2.2.1 MxERF4与MxFIT蛋白互作 | 第45-47页 |
| 3.2.2.2 MxERF72与MxERF4/MxFIT蛋白互作 | 第47-48页 |
| 3.2.2.3 MxERF4和MxERF72与MxIRO2蛋白互作 | 第48-49页 |
| 3.2.3 沉默ERF4和ERF72促进苹果砧木铁吸收 | 第49-54页 |
| 3.2.4 MxERF4具有转录抑制活性 | 第54-56页 |
| 3.3 过表达小金海棠MxERF4和MxERF72降低叶片叶绿素含量 | 第56-59页 |
| 3.3.1 叶绿体结构变化及叶绿素合成降解相关基因的表达 | 第56-57页 |
| 3.3.2 过表达MxERF4和MxERF72降低烟草叶片叶绿素含量 | 第57-59页 |
| 3.4 拟南芥突变体证实ERF4和ERF72负调控缺铁响应 | 第59-74页 |
| 3.4.1 乙烯响应因子AtERF4负调控缺铁响应 | 第59-68页 |
| 3.4.2 乙烯响应因子AtERF72负调控缺铁响应 | 第68-74页 |
| 四、讨论 | 第74-79页 |
| 4.1 乙烯在苹果砧木缺铁应答响应中作用 | 第74-75页 |
| 4.2 转录因子ERF家族响应逆境胁迫的研究 | 第75页 |
| 4.3 ERF4/ERF72负调控苹果缺铁响应 | 第75-76页 |
| 4.4 ERF4/ERF72表达差异导致不同敏感性苹果材料对缺铁响应的不同 | 第76-79页 |
| 4.4.1 小金海棠和山定子的铁吸收效率存在差异 | 第76-77页 |
| 4.4.2 ERF4/ERF72可调控植株叶片叶绿素降解 | 第77-79页 |
| 五、结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附录 | 第93-97页 |
| 个人简历 | 第97页 |
