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水稻叶片早衰突变体的糖代谢基因表达与抗氧化生理调控

致谢第6-7页
目录第7-11页
摘要第11-14页
Abstract第14-16页
第一章 文献综述第17-34页
    1.1 叶片衰老的特征第17-18页
        1.1.1 起始阶段—叶片衰老诱导第17页
        1.1.2 衰退阶段—物质降解第17-18页
        1.1.3 终末阶段—细胞死亡第18页
    1.2 叶片衰老诱导机制第18-20页
        1.2.1 营养胁迫假说第18-19页
        1.2.2 光碳失衡假说第19页
        1.2.3 自由基理论第19页
        1.2.4 激素调控学说第19-20页
        1.2.5 糖诱导学说第20页
    1.3 叶片衰老过程的生理生化研究进展第20-25页
        1.3.1 叶绿素降解第20-21页
        1.3.2 光合功能衰退第21-22页
        1.3.3 碳水化合物变化第22-23页
        1.3.4 蛋白质水解第23页
        1.3.5 抗氧化系统及细胞膜结构损伤第23-25页
    1.4 叶片衰老相关基因研究第25-28页
    1.5 植物衰老研究实验系统第28-32页
        1.5.1 常规植株材料第28页
        1.5.2 离体器官研究第28-29页
        1.5.3 转基因植物第29-30页
        1.5.4 构建突变体材料第30-32页
    1.6 本项目研究的意义、目标、内容第32-34页
第二章 叶片早衰对产量形成的影响及其光合生理特性变化第34-49页
    2.1 引言第34-35页
    2.2 材料与方法第35-37页
        2.2.1 试验材料种植第35页
        2.2.2 叶绿素含量测定第35-36页
        2.2.3 光合速率和叶绿素荧光参数测定第36页
        2.2.4 水稻叶片RNA提取、纯化和cDNA第一链的合成第36-37页
        2.2.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达第37页
    2.3 结果与分析第37-45页
        2.3.1 早衰突变体水稻的衰老表型与产量性状第37-42页
        2.3.2 早衰突变体Y225旗叶中叶绿素含量在灌浆过程的变化第42页
        2.3.3 早衰突变体esl旗叶的光合速率和叶绿素荧光参数在灌浆期的叶片衰老过程中的动态变化第42-44页
        2.3.4 早衰突变体esl与其野生型水稻叶片中捕光叶绿素a/b结合蛋白基因(Cab)和PSⅡ反应中心结构蛋白基因在衰老过程中表达差异第44-45页
    2.4 讨论第45-48页
    2.5 小结第48-49页
第三章 糖对叶片衰老的调控以及衰老叶片中淀粉的积累与动员第49-78页
    3.1 引言第49-50页
    3.2 材料与方法第50-53页
        3.2.1 试验材料第50-51页
        3.2.2 水稻叶片离体糖培养第51页
        3.2.3 叶片糖含量测定第51页
        3.2.4 叶片叶绿素含量测定第51页
        3.2.5 水稻叶片RNA提取、纯化和cDNA第一链的合成第51-52页
        3.2.6 碳水化合物代谢相关基因引物设计第52页
        3.2.7 实时荧光定量RT-PCR第52页
        3.2.8 半定量RT-PCR第52-53页
    3.3 结果与分析第53-72页
        3.3.1 糖水平对叶片衰老的影响第53-66页
        3.3.2 水稻叶片衰老与蔗糖合成相关基因表达间的关系第66-69页
        3.3.3 叶片早衰对淀粉代谢的影响第69-72页
    3.4 讨论第72-76页
        3.4.1 糖水平对叶片衰老的影响第72-74页
        3.4.2 叶片衰老与蔗糖合成的关系第74-75页
        3.4.3 叶片衰老与淀粉代谢的关系第75-76页
    3.5 小结第76-78页
第四章 AsA-GSH循环调控H_2O_2及其对esl突变体叶片衰老的影响第78-98页
    4.1 引言第78-80页
    4.2 材料与方法第80-82页
        4.2.1 试验材料第80页
        4.2.2 水稻叶片的H_2O_2离体培养第80页
        4.2.3 叶绿素、可溶性蛋白、MDA和H_2O_2含量测定第80页
        4.2.4 AsA和GSH含量测定第80-81页
        4.2.5 APX和GR活性测定第81页
        4.2.6 RNA提取、纯化和cDNA的合成第81页
        4.2.7 实时荧光定量RT-PCR分析第81-82页
    4.3 结果与分析第82-91页
        4.3.1 esl突变体及其野生型水稻叶片在灌浆过程的衰老变化第82-83页
        4.3.2 叶片AsA-GSH循环代谢关键酶活性及其抗氧化物质在衰老过程中的差异变化第83-84页
        4.3.3 AsA-GSH循环中代谢酶基因家族在叶片衰老过程的转录差异和动态表达模式第84-89页
        4.3.4 H_2O_2调节叶片衰老与OsAPX同工基因表达间的联系第89-91页
    4.4 讨论第91-97页
    4.5 小结第97-98页
第五章 不同基因型水稻叶片中CAT同工基因响应内源H_2O_2的表达差异及其对叶片衰老的调控第98-109页
    5.1 引言第98-100页
    5.2 材料与方法第100-101页
        5.2.1 试验材料种植第100页
        5.2.2 离体培养试验第100页
        5.2.3 叶绿素含量、相对电导率和MDA浓度测定第100页
        5.2.4 RNA提取、纯化和cDNA的合成第100页
        5.2.5 实时荧光定量RT-PCR分析第100页
        5.2.6 半定量RT-PCR第100-101页
    5.3 结果与分析第101-106页
        5.3.1 H_2O_2调控叶片衰老进程第101页
        5.3.2 CAT同工基因在衰老叶片中的差异表达及其与H_2O_2的关系第101-104页
        5.3.3 外源ABA调节H_2O_2的产生和叶片衰老,及其与CAT同工基因表达的联系第104-106页
    5.4 讨论第106-108页
    5.5 小结第108-109页
第六章 叶片衰老过程中基于质膜NADPH氧化酶(PM-NOX)的O_2~-产生特性第109-120页
    6.1 引言第109-110页
    6.2 材料与方法第110-111页
        6.2.1 试验材料第110页
        6.2.2 离体培养试验第110页
        6.2.3 O_2~-产生速率测定和O_2~-组织化学染色第110页
        6.2.4 ABA含量测定第110页
        6.2.5 RNA提取、纯化和cDNA的合成第110页
        6.2.6 实时荧光定量RT-PCR分析第110-111页
    6.3 结果与分析第111-118页
        6.3.1 esl突变体叶片在衰老过程中ABA诱导O_2~-的产生第111-112页
        6.3.2 NOX同工基因响应ABA诱导的表达模式第112-115页
        6.3.3 esl突变体叶片中NOX在衰老过程的表达差异第115-118页
    6.4 讨论第118-119页
    6.5 小结第119-120页
第七章 全文结论与展望第120-122页
    7.1 结论第120-121页
    7.2 展望第121-122页
参考文献第122-140页
攻读博士学位期间所发表论文第140页

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