| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-11页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第11页 |
| 1.2 高效稳定的离体再生体系影响因素的研究 | 第11-14页 |
| 1.2.1 基因型 | 第11-12页 |
| 1.2.2 外植体类型 | 第12页 |
| 1.2.3 基本培养基类型 | 第12-13页 |
| 1.2.4 植物生长调节物质 | 第13页 |
| 1.2.5 前期暗处理 | 第13页 |
| 1.2.6 碳源 | 第13页 |
| 1.2.7 AgNO_3 | 第13-14页 |
| 1.2.8 凝胶剂 | 第14页 |
| 1.2.9 抗生素 | 第14页 |
| 1.3 转基因技术在植物体中的应用 | 第14-17页 |
| 1.3.1 外源目的基因 | 第15页 |
| 1.3.2 受体材料 | 第15-16页 |
| 1.3.3 菌株类型 | 第16页 |
| 1.3.4 菌液浓度和侵染时间 | 第16页 |
| 1.3.5 培养方法 | 第16-17页 |
| 1.4 果树转基因植物的检测 | 第17-18页 |
| 1.4.1 报告基因检测 | 第17-18页 |
| 1.4.2 DNA 分子鉴定 | 第18页 |
| 1.4.3 RNA 分子鉴定 | 第18页 |
| 1.4.4 蛋白质分子鉴定 | 第18页 |
| 1.5 rol 基因在植物遗传转化中的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.5.1 rol 基因的特点 | 第18-19页 |
| 1.5.2 rolB 基因的结构 | 第19页 |
| 1.5.3 rolB 基因的蛋白质功能和表达特异性 | 第19页 |
| 1.5.4 rol 基因的转化对植物生长发育的影响 | 第19-20页 |
| 1.5.5 转 rol 基因对植株其他性状的影响 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-29页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂与药品 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 杜梨子叶和下胚轴再生体系的建立 | 第22-24页 |
| 2.2.2 杜梨对卡那霉素的敏感性试验 | 第24页 |
| 2.2.3 杜梨遗传转化体系的建立 | 第24-26页 |
| 2.2.4 转基因抗性芽的检测 | 第26-28页 |
| 2.3 结果调查统计指标 | 第28-29页 |
| 2.3.1 外植体再生率的统计方法 | 第28页 |
| 2.3.2 转化效率的评价指标 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.1 杜梨离体再生体系的建立 | 第29-33页 |
| 3.1.1 不同外植体的再生过程 | 第29页 |
| 3.1.2 不同外植体再生能力的比较 | 第29-30页 |
| 3.1.3 激素种类和浓度对子叶再生的影响 | 第30-31页 |
| 3.1.4 基本培养基对子叶再生的影响 | 第31页 |
| 3.1.5 暗培养时间对子叶再生的影响 | 第31-32页 |
| 3.1.6 不同蔗糖浓度对子叶再生的影响 | 第32页 |
| 3.1.7 不定芽的增殖试验 | 第32-33页 |
| 3.1.8 不定芽的生根试验 | 第33页 |
| 3.2 杜梨对卡那霉素的敏感性测试 | 第33-34页 |
| 3.2.1 卡那霉素对杜梨子叶再生不定芽的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.2 杜梨继代苗对卡那霉素的敏感性测试 | 第34页 |
| 3.3 杜梨遗传转化体系的建立 | 第34-37页 |
| 3.3.1 转化材料的选择 | 第34-35页 |
| 3.3.2 农杆菌侵染浓度的确定 | 第35页 |
| 3.3.3 农杆菌侵染时间的确定 | 第35-36页 |
| 3.3.4 共培养时间对杜梨子叶转化效率的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.5 预培养时间对杜梨子叶转化效率的影响 | 第37页 |
| 3.4 杜梨转 rolB 基因抗性芽检测 | 第37-39页 |
| 3.4.1 Km 抗性检测 | 第37-38页 |
| 3.4.2 PCR 检测 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 杜梨子叶和下胚轴离体再生不定芽的影响因素 | 第39-40页 |
| 4.1.1 外植体类型 | 第39页 |
| 4.1.2 细胞分裂素 | 第39页 |
| 4.1.3 基本培养基 | 第39-40页 |
| 4.2 影响杜梨遗传转化的因素 | 第40-42页 |
| 4.2.1 抗生素选择压 | 第40页 |
| 4.2.2 侵染时间和菌液浓度 | 第40页 |
| 4.2.3 预培养时间 | 第40-41页 |
| 4.2.4 共培养时间 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-52页 |
| 在校期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |