摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
论文缩略词中英文对照 | 第6-9页 |
1 前言 | 第9-20页 |
1.1 细胞自噬的分类 | 第9-10页 |
1.2 自噬相关蛋白 | 第10页 |
1.3 昆虫免疫 | 第10-13页 |
1.3.1 昆虫的细胞免疫 | 第11页 |
1.3.2 昆虫的体液免疫 | 第11-13页 |
1.4 自噬与免疫的关系 | 第13-17页 |
1.4.1 宿主自噬识别病毒的信号通路 | 第14-15页 |
1.4.2 自噬对病毒的抑制效应 | 第15页 |
1.4.3 自噬抑制病毒的复制 | 第15-16页 |
1.4.4 自噬清除病毒蛋白 | 第16页 |
1.4.5 病毒逃逸自噬的机制 | 第16-17页 |
1.5 昆虫杆状病毒 | 第17-19页 |
1.5.1 AcMNPV病毒与细胞自噬 | 第18-19页 |
1.6 本文研究的目的、意义和内容 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-35页 |
2.1 实验材料 | 第20-25页 |
2.1.1 昆虫细胞、质粒、菌株、病毒 | 第20-21页 |
2.1.2 主要消耗品的处理方法 | 第21页 |
2.1.3 主要设备和仪器 | 第21-22页 |
2.1.4 主要药品和试剂 | 第22页 |
2.1.5 主要耗材 | 第22-23页 |
2.1.6 常用溶液的配制 | 第23-24页 |
2.1.7 抗体 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-34页 |
2.2.1 重组病毒GFP-AcMNPV的纯化与制备 | 第25页 |
2.2.2 重组病毒DsRed-AcMNPV的DNA提取和PCR鉴定 | 第25-27页 |
2.2.3 重组病毒DsRed-AcMNPV的制备与增殖 | 第27页 |
2.2.4 Lyso-Tracker Red染色镜检 | 第27-28页 |
2.2.5 AcMNPV诱导Sf9细胞的过表达检测 | 第28-30页 |
2.2.6 Western blotting实验 | 第30-32页 |
2.2.7 TEM生物样品制备流程 | 第32-33页 |
2.2.8 细胞毒性检测 | 第33页 |
2.2.9 氯喹抑制自噬实验 | 第33页 |
2.2.10 病毒紫外灭活病毒实验 | 第33-34页 |
2.2.11 病毒滴度实验 | 第34页 |
2.3 实验重复和统计方法 | 第34-35页 |
2.4 western blotting灰度扫描分析 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-48页 |
3.1 制备纯化的重组病毒和对Sf9细胞的感染活性检测 | 第35-36页 |
3.2 AcMNPV感染Sf9细胞引发自噬的Lyso-Tracker Red检测 | 第36-39页 |
3.3 AcMNPV感染细胞中的自噬体膜泡和ATG8-PE荧光斑点表达 | 第39-41页 |
3.4 AcMNPV感染Sf9细胞引发自噬响应的ATG8-PE表达 | 第41-42页 |
3.5 紫外灭活AcMNPV感染Sf9细胞引发自噬响应的ATG8-PE表达 | 第42-44页 |
3.6 AcMNPV感染Sf9宿主引发的自噬响应对病毒增殖的影响 | 第44-48页 |
3.6.1 氯喹对Sf9细胞的毒理实验检测 | 第45页 |
3.6.2 氯喹抑制病毒-Sf9细胞自噬响应实验中ATG8-PE表达上调 | 第45-46页 |
3.6.3 氯喹抑制病毒-Sf9细胞自噬响应实验中病毒增殖不受影响 | 第46-48页 |
4 讨论与全文总结 | 第48-51页 |
4.1 讨论 | 第48-50页 |
4.2 全文总结 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-61页 |