摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
主要缩写词表 | 第8-12页 |
第一章 绪论 | 第12-26页 |
1.1 铜锌超氧化物歧化酶(SOD1) | 第12-15页 |
1.1.1 SOD的分类 | 第12-13页 |
1.1.2 SOD1的功能 | 第13-15页 |
1.2 SOD1的胞内释放 | 第15-17页 |
1.3 非病毒基因载体 | 第17-19页 |
1.3.1 基因治疗 | 第17-18页 |
1.3.2 非病毒基因载体 | 第18-19页 |
1.4 蛋白质和多肽类非病毒基因载体 | 第19-22页 |
1.4.1 多肽类基因载体 | 第20-22页 |
1.5 核酸作为蛋白质类药物的载体 | 第22-23页 |
1.6 本课题的设计 | 第23-26页 |
1.6.1 课题组工作基础 | 第23页 |
1.6.2 本课题的设计思想 | 第23-25页 |
1.6.3 本课题的工作 | 第25-26页 |
第二章 SOD1-DNA聚集体的形成及解聚 | 第26-43页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 仪器与试剂 | 第26-28页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第26页 |
2.2.2 溶液配制 | 第26-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-32页 |
2.3.1 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第28页 |
2.3.2 半变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28-29页 |
2.3.3 RALS法研究DNA促进SOD1聚集 | 第29页 |
2.3.4 圆二色谱法研究SOD1二级结构变化 | 第29-30页 |
2.3.5 高通量SOD活性检测试剂盒(WST法)测定SOD1活性 | 第30-32页 |
2.4 结果与讨论 | 第32-42页 |
2.4.1 酸性条件中SOD1对DNA的亲和性 | 第32页 |
2.4.2 聚集随时间的变化 | 第32-33页 |
2.4.3 其它反应条件的影响 | 第33-34页 |
2.4.4 酸性条件中SOD1与DNA聚集体的解聚 | 第34-35页 |
2.4.5 聚集及解聚对SOD1构象和活性的影响 | 第35-38页 |
2.4.6 聚集及解聚对DNA结构的影响 | 第38-39页 |
2.4.7 聚集时间对SOD1-DNA稳定性的影响 | 第39页 |
2.4.8 时间对DNA结构的影响 | 第39-40页 |
2.4.9 时间对SOD1活性的影响 | 第40-42页 |
2.5 本章小结 | 第42-43页 |
第三章 SOD1-DNA-CPP聚集体的形成及解聚 | 第43-54页 |
3.1 引言 | 第43页 |
3.2 仪器与试剂 | 第43页 |
3.3 实验方法 | 第43-45页 |
3.3.1 Tricine-SDS-PAGE | 第43-44页 |
3.3.2 Tricine-SDS-PAGE溶液配置 | 第44-45页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第45-53页 |
3.4.1 酸性条件中CPP与DNA的凝聚 | 第45-46页 |
3.4.2 SOD1-DNA-CPP聚集体的形成 | 第46-48页 |
3.4.3 SOD1-DNA-CPP聚集体的解聚 | 第48页 |
3.4.4 SOD1-DNA-CPP聚集对SOD1结构及活性的影响 | 第48-50页 |
3.4.5 加入顺序对聚集体形成的影响 | 第50-51页 |
3.4.6 聚集时间对SOD1-DNA-CPP稳定性的影响 | 第51-53页 |
3.5 本章小结 | 第53-54页 |
第四章 近生理环境下SOD1-DNA-CPP聚集体系的构建 | 第54-62页 |
4.1 前言 | 第54页 |
4.2 仪器与试剂 | 第54页 |
4.3 实验方法 | 第54-55页 |
4.3.1 倒置荧光显微镜法研究聚集体形貌 | 第54-55页 |
4.3.2 TEM电镜观测聚集体形貌 | 第55页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第55-61页 |
4.4.1 CPP与SOD1的相互作用 | 第55-56页 |
4.4.2 CPP与DNA的相互作用 | 第56-57页 |
4.4.3 SOD1-DNA-CPP聚集体的形成 | 第57页 |
4.4.4 荧光显微镜观测 | 第57-59页 |
4.4.5 TEM观测 | 第59页 |
4.4.6 聚集体对SOD1活性及二级结构的影响 | 第59-61页 |
4.5 本章小结 | 第61-62页 |
结论与展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |