| 英文缩略词表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-34页 |
| 第一章 ICOSL分子的研究进展 | 第12-22页 |
| 1.1 ICOSL分子及其受体ICOS分子结构 | 第12-14页 |
| 1.2 ICOSL的分布及其表达 | 第14页 |
| 1.3 ICOSL的作用机制及生物学功能 | 第14-16页 |
| 1.4 ICOSL在相关疾病方面的研究 | 第16-18页 |
| 1.4.1 ICOSL与肿瘤 | 第16页 |
| 1.4.2 ICOSL与自身免疫性疾病 | 第16-17页 |
| 1.4.3 ICOSL与器官移植排异反应 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 第二章 单链抗体的研究进展 | 第22-29页 |
| 2.1 单链抗体的结构与构建 | 第22-23页 |
| 2.2 单链抗体的表达 | 第23-24页 |
| 2.3 单链抗体的应用 | 第24-26页 |
| 2.3.1 单链抗体在肿瘤诊断与治疗方面的应用 | 第24-25页 |
| 2.3.2 单链抗体在自身免疫疾病的应用 | 第25页 |
| 2.3.3 单链抗体在抗器官移植排异反应的应用 | 第25-26页 |
| 2.4 单链抗体的应用前景与展望 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-29页 |
| 第三章 抗体人源化研究进展 | 第29-34页 |
| 3.1 抗体人源化的策略 | 第29-31页 |
| 3.1.1 嵌合型抗体 | 第29-30页 |
| 3.1.2 CDR移植抗体 | 第30页 |
| 3.1.3 噬菌体抗体库技术构建的人源化抗体 | 第30-31页 |
| 3.2 抗体人源化的应用与前景 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-34页 |
| 第二部分 实验研究 | 第34-69页 |
| 第四章 Anti-ICOSL-scFv-C_H3基因的克隆 | 第35-48页 |
| 摘要 | 第35-36页 |
| Abstract | 第36-37页 |
| 1 材料与方法 | 第37-42页 |
| 1.1 主要试剂与材料 | 第37-38页 |
| 1.2 实验方法 | 第38-42页 |
| 1.2.1 C_H3基因的克隆 | 第38-40页 |
| 1.2.1.1 人外周血单个核细胞(PBMC)的分离 | 第38页 |
| 1.2.1.2 PBMC总RNA的提取 | 第38页 |
| 1.2.1.3 PBMC的cDNA的合成 | 第38-39页 |
| 1.2.1.4 感受态细胞的制备 | 第39页 |
| 1.2.1.5 C_H3基因的扩增以及鉴定 | 第39-40页 |
| 1.2.2 Anti-ICOSL-scFv基因片段的扩增 | 第40-41页 |
| 1.2.3 Anti-ICOSL-scFv基因片段与C_H3基因的连接 | 第41-42页 |
| 2 结果 | 第42-45页 |
| 2.1 C_H3基因的克隆 | 第42-43页 |
| 2.2 Anti-ICOSL-scFv基因的扩增 | 第43-44页 |
| 2.3 Anti-ICOSL-scFv与C_H3基因的连接 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-48页 |
| 第五章 Anti-ICOSL-svFv-C_H3蛋白的表达、纯化以及活性检测 | 第48-61页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| Abstract | 第49-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 1.1 主要试剂与材料 | 第50页 |
| 1.2 实验方法 | 第50-55页 |
| 1.2.1 重组表达载体的构建 | 第50-52页 |
| 1.2.1.1 质粒的提取 | 第50页 |
| 1.2.1.2 酶切反应 | 第50-51页 |
| 1.2.1.3 目的片段的磷酸化和载体的去磷酸化 | 第51页 |
| 1.2.1.4 目的片段与载体的连接反应 | 第51-52页 |
| 1.2.2 重组载体的转化 | 第52页 |
| 1.2.3 菌落PCR鉴定 | 第52-53页 |
| 1.2.4 重组anti-ICOSL-scFv-C_H3的蛋白诱导表达 | 第53页 |
| 1.2.5 重组表达产物的纯化 | 第53-54页 |
| 1.2.6 免疫印迹(Western blot)分析 | 第54页 |
| 1.2.7 ELISA鉴定人源化单链抗体的亲和力 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-58页 |
| 2.0 重组表达载体的构建 | 第55页 |
| 2.1 重组anti-ICOSL-scFv-C_H3的蛋白表达与纯化 | 第55-56页 |
| 2.2 免疫印迹(Western blot)分析 | 第56-57页 |
| 2.3 ELISA鉴定人源化单链抗体的亲和力 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-61页 |
| 第六章 Anti-ICOSL-scFv-C_H3的生物学功能检测 | 第61-69页 |
| 摘要 | 第61-62页 |
| Abstract | 第62-63页 |
| 1 材料与方法 | 第63-64页 |
| 1.1 主要试剂与材料 | 第63页 |
| 1.2 实验方法 | 第63-64页 |
| 1.2.1 实验分组 | 第63页 |
| 1.2.2 供体小鼠皮肤的分离 | 第63-64页 |
| 1.2.3 受体小鼠的皮肤移植 | 第64页 |
| 2 结果 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第三部分 全文结论 | 第69-71页 |
| 全文结论 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
