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pIKX-EGFP-C1载体的构建及其对克隆胚X相关基因的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
文献综述第11-34页
 第一章 哺乳动物 X 染色体失活研究进展第11-34页
   ·哺乳动物 X 染色体失活概述第11-14页
     ·X 染色体失活的起源第11-12页
     ·X 染色体失活周期第12-14页
     ·X 染色体失活中心第14页
   ·X 染色体印记失活的研究进展第14-22页
     ·减数分裂性染色体失活第15-17页
     ·哺乳动物 X 染色体印记失活第17-22页
   ·X 染色体活化第22-25页
   ·X 染色体随机失活第25-29页
     ·计数和选择第25-27页
     ·X 染色体配对第27-28页
     ·Tsix 怎么调节 Xist第28-29页
   ·X 染色体失活的建立和维持第29-31页
     ·X 染色体失活的建立第29页
     ·X 染色体失活领域(compartment)的建立第29-30页
     ·X 染色体失活的逃避第30-31页
     ·X 染色体失活状态的维持第31页
   ·X 染色体失活和克隆第31-32页
   ·结语与展望第32-34页
实验部分第34-60页
 第二章 Xist 可诱导干扰载体的构建及序列分析第34-44页
   ·材料与方法第34-41页
     ·菌株和质粒第34页
     ·所用细胞第34页
     ·主要试剂第34-35页
     ·主要仪器第35页
     ·最佳干扰片段的确定第35-39页
     ·siRNA 再次确定最佳干扰片段第39-40页
     ·可诱导干扰载体的构建第40-41页
   ·结果第41-42页
     ·酶切结果第41页
     ·质粒构建结果第41-42页
     ·最佳干扰片段的筛选结果第42页
     ·siRNA 干扰 Xist 结果第42页
   ·讨论第42-43页
   ·小结第43-44页
 第三章 Xist 可诱导干扰载体的转染和细胞筛选第44-54页
   ·材料与方法第44-49页
     ·细胞第44页
     ·载体第44页
     ·主要试剂第44页
     ·主要仪器第44-45页
     ·胎儿性别鉴定第45页
     ·成纤维细胞的原代培养、传代培养、冻存及复苏第45页
     ·单克隆细胞的制备第45-47页
     ·单克隆细胞 PCR 鉴定第47-48页
     ·单克隆细胞 southern blot 检测第48-49页
   ·结果第49-52页
     ·性别鉴定结果第49-50页
     ·细胞转染结果第50页
     ·单克隆筛选结果第50-51页
     ·attB 电泳鉴定第51-52页
     ·核心干扰元件电泳鉴定第52页
     ·southern blot 鉴定第52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
 第四章 转基因克隆胚的制备及 X 染色体相关基因的检测第54-60页
   ·材料和方法第54-56页
     ·试剂与仪器第54页
     ·供体细胞的准备第54页
     ·卵母细胞成熟第54页
     ·卵母细胞去核第54-55页
     ·重构胚的构建与体外培养第55页
     ·诱导第55页
     ·定量检测第55页
     ·数据处理第55-56页
   ·结果第56-58页
     ·体细胞核移植克隆胚第56-57页
     ·Xist 的定量检测第57页
     ·X 染色体相关基因的定量检测第57-58页
   ·讨论第58-59页
   ·小结第59-60页
结论第60-61页
本研究的创新点与进一步研究的课题第61-62页
参考文献第62-72页
附录第72-74页
致谢第74-75页
个人简介第75页

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