摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
文献综述 | 第11-34页 |
第一章 哺乳动物 X 染色体失活研究进展 | 第11-34页 |
·哺乳动物 X 染色体失活概述 | 第11-14页 |
·X 染色体失活的起源 | 第11-12页 |
·X 染色体失活周期 | 第12-14页 |
·X 染色体失活中心 | 第14页 |
·X 染色体印记失活的研究进展 | 第14-22页 |
·减数分裂性染色体失活 | 第15-17页 |
·哺乳动物 X 染色体印记失活 | 第17-22页 |
·X 染色体活化 | 第22-25页 |
·X 染色体随机失活 | 第25-29页 |
·计数和选择 | 第25-27页 |
·X 染色体配对 | 第27-28页 |
·Tsix 怎么调节 Xist | 第28-29页 |
·X 染色体失活的建立和维持 | 第29-31页 |
·X 染色体失活的建立 | 第29页 |
·X 染色体失活领域(compartment)的建立 | 第29-30页 |
·X 染色体失活的逃避 | 第30-31页 |
·X 染色体失活状态的维持 | 第31页 |
·X 染色体失活和克隆 | 第31-32页 |
·结语与展望 | 第32-34页 |
实验部分 | 第34-60页 |
第二章 Xist 可诱导干扰载体的构建及序列分析 | 第34-44页 |
·材料与方法 | 第34-41页 |
·菌株和质粒 | 第34页 |
·所用细胞 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·主要仪器 | 第35页 |
·最佳干扰片段的确定 | 第35-39页 |
·siRNA 再次确定最佳干扰片段 | 第39-40页 |
·可诱导干扰载体的构建 | 第40-41页 |
·结果 | 第41-42页 |
·酶切结果 | 第41页 |
·质粒构建结果 | 第41-42页 |
·最佳干扰片段的筛选结果 | 第42页 |
·siRNA 干扰 Xist 结果 | 第42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第三章 Xist 可诱导干扰载体的转染和细胞筛选 | 第44-54页 |
·材料与方法 | 第44-49页 |
·细胞 | 第44页 |
·载体 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44-45页 |
·胎儿性别鉴定 | 第45页 |
·成纤维细胞的原代培养、传代培养、冻存及复苏 | 第45页 |
·单克隆细胞的制备 | 第45-47页 |
·单克隆细胞 PCR 鉴定 | 第47-48页 |
·单克隆细胞 southern blot 检测 | 第48-49页 |
·结果 | 第49-52页 |
·性别鉴定结果 | 第49-50页 |
·细胞转染结果 | 第50页 |
·单克隆筛选结果 | 第50-51页 |
·attB 电泳鉴定 | 第51-52页 |
·核心干扰元件电泳鉴定 | 第52页 |
·southern blot 鉴定 | 第52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
第四章 转基因克隆胚的制备及 X 染色体相关基因的检测 | 第54-60页 |
·材料和方法 | 第54-56页 |
·试剂与仪器 | 第54页 |
·供体细胞的准备 | 第54页 |
·卵母细胞成熟 | 第54页 |
·卵母细胞去核 | 第54-55页 |
·重构胚的构建与体外培养 | 第55页 |
·诱导 | 第55页 |
·定量检测 | 第55页 |
·数据处理 | 第55-56页 |
·结果 | 第56-58页 |
·体细胞核移植克隆胚 | 第56-57页 |
·Xist 的定量检测 | 第57页 |
·X 染色体相关基因的定量检测 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
附录 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简介 | 第75页 |