| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一部分：文献综述 | 第12-26页 |
| 第一章 哺乳动物卵母细胞不均等分裂机制简介 | 第12-24页 |
| ·哺乳动物卵母细胞不均等分裂的生物学相关性 | 第12-13页 |
| ·哺乳动物卵母细胞减数分裂过程中的细胞学事件 | 第13-19页 |
| ·卵母细胞胞质中细胞器的重新分配 | 第13-17页 |
| ·微管的组装 | 第17-18页 |
| ·纺锤体向卵母细胞边缘迁移附着 | 第18页 |
| ·皮质重组和极体形成 | 第18-19页 |
| ·哺乳动物卵母细胞不均等分裂的分子基础 | 第19-23页 |
| ·纺锤体定位机制 | 第19-21页 |
| ·纺锤体组装检查点 | 第21-22页 |
| ·皮质重组 | 第22-23页 |
| ·PAR 蛋白 | 第23页 |
| ·排卵前后卵的老化伴随着不均等分裂的失败 | 第23-24页 |
| 第二章 ARF1 的研究进展 | 第24-26页 |
| ·ARF1 的结构 | 第24页 |
| ·ARF1 的重要突变体 | 第24页 |
| ·ARF1 的功能 | 第24-26页 |
| 第二部分：试验研究 | 第26-46页 |
| 第三章 ARF1 mRNA 表达的检测及 ARF1 基因的克隆和真核表达载体构建 | 第26-37页 |
| ·材料与方法 | 第26-29页 |
| ·仪器设备 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·试验材料 | 第27页 |
| ·牛卵母细胞体外成熟培养各时期 ARF1 mRNA 表达的检测 | 第27页 |
| ·ARF1 基因全长克隆及序列鉴定 | 第27-28页 |
| ·突变体 ARF1~(T31N)和 ARF1~(Q71L)的克隆及序列鉴定 | 第28-29页 |
| ·ARF1~(T31N)、ARF1~(Q71L)真核表达载体构建 | 第29页 |
| ·ARF1~(T31N)、ARF1~(Q71L)转染 Hela 细胞 | 第29页 |
| ·RT-PCR 鉴定 pVenus-ARF1~(T31N)、pVenus-ARF1~(Q71L)在 Hela 细胞表达情况 | 第29页 |
| ·体外转录 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-35页 |
| ·RT-PCR 检测牛卵母细胞各时期 ARF1 mRNA 表达 | 第29-30页 |
| ·牛 ARF1 基因的 RT-PCR 扩增及序列分析 | 第30-31页 |
| ·突变体 ARF1~(T31N)和 ARF1~(Q71L)的 PCR 扩增及序列分析 | 第31-32页 |
| ·pVenus-ARF1~(T31N)、pVenus-ARF1~(Q71L)真核表达载体鉴定 | 第32页 |
| ·荧光显微镜下观察重组质粒 pVenus-ARF1~(T31N)和 pVenus-ARF1~(Q71L)在 Hela细胞中的表达、定位 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR 鉴定重组质粒 pVenus-ARF1~(T31N)和 pVenus-ARF1~(Q71L)的表达 | 第33-34页 |
| ·体外转录产物分析 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第四章 ARF1 在牛卵母细胞第一次减数分裂过程中作用的研究 | 第37-46页 |
| ·材料与方法 | 第37-39页 |
| ·仪器设备 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·牛卵母细胞的收集及体外成熟培养 | 第38页 |
| ·ARF1~(Q71L)的 cRNA 显微注射 | 第38-39页 |
| ·ARF1~(T31N)的 cRNA 显微注射 | 第39页 |
| ·干扰片段 MO 的显微注射 | 第39页 |
| ·BFA 处理牛卵母细胞 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·ARF1~(Q71L)的表达定位 | 第39-40页 |
| ·ARF1~(T31N)的表达引起纺锤体组装异常和 MⅠ的阻滞 | 第40-42页 |
| ·ARF1 MO 干扰 ARF1 的表达引起纺锤体组装异常和 MⅠ的阻滞 | 第42-43页 |
| ·BFA 破坏纺锤体组装，引起 MⅠ阻滞 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46页 |
| 本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
