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人参皂苷调控植物干细胞活性和端粒长度的研究

中文摘要第9-15页
Abstract第15-21页
主要缩写符号说明第22-24页
第1章 文献综述第24-43页
    1.1 人参的研究进展第24-31页
        1.1.1 人参概况第24-25页
        1.1.2 人参皂苷类成分的研究进展第25页
        1.1.3 人参皂苷的组织分布规律研究第25-26页
        1.1.4 人参皂苷的生物合成及生物转化研究第26-27页
        1.1.5 人参的主要药理作用研究第27-31页
            1.1.5.1 对中枢神经系统作用第27-28页
            1.1.5.2 对心血管系统作用第28-29页
            1.1.5.3 抗肿瘤第29页
            1.1.5.4 对干细胞命运决定的调控作用第29-31页
        1.1.6 人参市场价值现状第31页
    1.2 植物干细胞研究现状第31-35页
        1.2.1 植物干细胞的特性第31-32页
        1.2.2 根尖干细胞中心的形态学特征第32页
        1.2.3 根尖干细胞微环境的分子调控机制第32-34页
        1.2.4 根尖干细胞和QC的维持及分裂机制第34-35页
        1.2.5 植物和动物相似的干细胞行为第35页
    1.3 端粒研究现状第35-40页
        1.3.1 端粒的结构和功能第35-36页
        1.3.2 端粒长度的调控机制第36-37页
        1.3.3 影响端粒长度的因素第37-38页
            1.3.3.1 生殖对端粒长度的影响第37-38页
            1.3.3.2 压力对端粒长度的影响第38页
            1.3.3.3 环境对端粒长度的影响第38页
        1.3.4 植物端粒研究进展第38-40页
    1.4 次生代谢产物的生理功能研究进展第40-41页
    1.5 研究意义与思路第41-43页
        1.5.1 研究目的与意义第41-42页
        1.5.2 研究思路与技术路线第42-43页
第2章 材料和方法第43-53页
    2.1 实验材料第43-45页
        2.1.1 植物材料第43页
        2.1.2 菌株与质粒第43页
        2.1.3 主要实验试剂第43-44页
        2.1.4 实验常用试剂配制方法第44-45页
    2.2 实验方法第45-53页
        2.2.1 植物材料的培养与处理第45-46页
            2.2.1.1 拟南芥种子的消毒及培养方法第45-46页
            2.2.1.2 人参悬浮细胞的培养方法第46页
        2.2.2 核酸实验技术与方法第46-50页
            2.2.2.1 拟南芥基因组DNA的提取方法第46-47页
            2.2.2.2 人参材料的DNA提取方法第47页
            2.2.2.3 Trizol法提取RNA第47-48页
            2.2.2.4 RNA反转录为cDNA第48页
            2.2.2.5 DNA片段切胶回收操作方法第48-49页
            2.2.2.6 质粒DNA提取操作方法第49页
            2.2.2.7 连接反应第49页
            2.2.2.8 质粒转化与鉴定方法第49-50页
            2.2.2.9 农杆菌转化方法第50页
            2.2.2.10 拟南芥转化方法第50页
        2.2.3 蛋白实验技术与方法第50-52页
            2.2.3.1 蛋白表达及纯化第50-51页
            2.2.3.2 蛋白电泳检测第51-52页
        2.2.4 其他实验技术与方法第52-53页
            2.2.4.1 GUS染色法第52页
            2.2.4.2 Ecoli感受态细胞的制备方法第52-53页
第3章 人参皂苷类成分随人参生长年限的积累分布规律研究第53-64页
    3.1 前言第53页
    3.2 实验材料第53-55页
    3.3 实验方法第55-56页
        3.3.1 人参分析样品的制备第55页
        3.3.2 样品色谱和质谱分析条件第55-56页
        3.3.3 数据分析第56页
    3.4 实验结果第56-62页
        3.4.1 液相和质谱条件优化第56页
        3.4.2 定量分析方法学验证第56-57页
        3.4.3 人参皂苷成分鉴定及含量分析第57-62页
    3.5 实验小结与讨论第62-64页
第4章 对拟南芥根长和根尖干细胞影响的人参皂苷成分的筛选研究第64-78页
    4.1 前言第64页
    4.2 实验材料与方法第64-67页
        4.2.1 实验材料与仪器第64-65页
        4.2.2 人参总皂昔溶液的制备第65页
        4.2.3 人参皂苷类成分溶液的配制第65页
        4.2.4 人参总皂苷对拟南芥初生根长的影响第65-66页
        4.2.5 不同人参皂苷对拟南芥初生根长及分生区范围的影响第66页
        4.2.6 不同人参皂苷对拟南芥初生根长及分生区细胞分裂活性的影响第66页
        4.2.7 GS1对拟南芥根尖于细胞及静止中心细胞命运的影响第66-67页
        4.2.8 GS1对拟南芥根尖于细胞和静止中心相关基因表达的影响第67页
    4.3 实验结果与分析第67-76页
        4.3.1 人参总皂苷抑制拟南芥初生根长和分生区范围第67-68页
        4.3.2 不同人参皂苷成分抑制拟南芥初生根长和分生区范围第68-70页
        4.3.3 人参不同皂苷成分抑制拟南芥初生根分生区细胞活性第70-71页
        4.3.4 GS1对拟南芥根尖干细胞中心的影响第71-73页
        4.3.5 GS1对拟南芥根尖干细胞相关基因表达的影响第73-76页
    4.4 实验小结与讨论第76-78页
第5章 GS1影响拟南芥根长的遗传筛选及基因图位克隆第78-95页
    5.1 前言第78页
    5.2 实验材料与方法第78-82页
        5.2.1 实验材料与仪器第78-79页
        5.2.2 GS1对拟南芥突变体的遗传筛选第79页
        5.2.3 拟南芥突变体中突变基因的图位克隆第79-81页
        5.2.4 突变基因的互补验证第81-82页
        5.2.5 突变基因的功能分析及验证第82页
    5.3 实验结果与分析第82-93页
        5.3.1 对GS1不敏感的突变体筛选第82-83页
        5.3.2 突变体中突变基因的粗定位第83-87页
        5.3.3 突变基因的精细定位第87页
        5.3.4 突变基因的克隆及突变位点分析第87-89页
        5.3.5 糖苷水解酶基因功能分析及验证第89-91页
        5.3.6 糖苷水解酶蛋白表达纯化及体外酶促第91-93页
    5.4 讨论与小结第93-95页
第6章 人参皂苷对人参端粒长度的影响及调控机制研究第95-104页
    6.1 前言第95页
    6.2 实验材料和方法第95-98页
        6.2.1 实验仪器与材料第95-96页
        6.2.2 人参样品的处理第96页
        6.2.3 人参样品端粒长度的检测第96-97页
        6.2.4 人参皂苷对悬浮细胞端粒长度的影响第97-98页
            6.2.4.1 不同浓度的人参皂苷添加入人参悬浮细胞第97页
            6.2.4.2 人参悬浮细胞DNA和RNA的提取第97页
            6.2.4.3 人参悬浮细胞端粒长度、端粒酶基因表达的检测第97-98页
    6.3 实验结果与分析第98-102页
        6.3.1 端粒检测PCR反应条件优化第98-99页
        6.3.2 不同年限人参在不同生长时期的端粒长度变化第99-100页
        6.3.3 人参皂苷影响人参悬浮细胞端粒长度和激活端粒酶活性第100-102页
    6.4 讨论与小结第102-104页
第7章 结论第104-106页
参考文献第106-125页
致谢第125-127页
个人简历第127页

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