摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第一章 绪论 | 第8-19页 |
1.1 降钙素原的研究进展 | 第8-11页 |
1.2 降钙素原的检测方法 | 第11页 |
1.3 胶体金免疫层析检测方法概述 | 第11-15页 |
1.3.1 胶体金的制备 | 第12-13页 |
1.3.2 胶体金的标记与纯化 | 第13-14页 |
1.3.3 胶体金免疫层析试纸条的结构及检测模式 | 第14-15页 |
1.3.4 胶体金免疫层析检测技术的优势 | 第15页 |
1.4 ELISA免疫检测方法概述 | 第15-18页 |
1.4.1 ELISA检测方法的种类 | 第15-17页 |
1.4.2 ELISA方法的检测模式 | 第17页 |
1.4.3 ELISA检测方法的优势 | 第17-18页 |
1.5 本论文的研究目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 降钙素原胶体金免疫层析检测方法的建立 | 第19-40页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 主要试剂和材料 | 第19页 |
2.1.2 主要溶液 | 第19-20页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第20页 |
2.2 实验内容 | 第20-24页 |
2.2.1 反应模式 | 第20页 |
2.2.2 胶体金溶液的制备 | 第20-21页 |
2.2.3 胶体金粒径大小的确定 | 第21页 |
2.2.4 标记抗体最适标记pH条件的摸索 | 第21页 |
2.2.5 标记抗体最适标记量的摸索 | 第21页 |
2.2.6 胶体金标记抗体的制备与纯化 | 第21页 |
2.2.7 胶体金层析试纸条所用溶液及材料的摸索 | 第21-22页 |
2.2.8 金标抗体及包被抗体浓度的摸索 | 第22页 |
2.2.9 样品垫预处理 | 第22-23页 |
2.2.10 金标垫的预处理 | 第23页 |
2.2.11 质控线抗体包被量的摸索 | 第23页 |
2.2.12 检测线的包被位置的摸索 | 第23页 |
2.2.13 胶体金试纸条比色卡颜色梯度的建立 | 第23页 |
2.2.14 试纸条的组装 | 第23页 |
2.2.15 胶体金免疫层析试纸条的性能评估 | 第23-24页 |
2.2.16 与市场现有产品的比较 | 第24页 |
2.3 实验结果 | 第24-37页 |
2.3.1 胶体金粒径大小的确定 | 第24页 |
2.3.2 标记抗体最适标记pH条件的确定 | 第24-25页 |
2.3.3 标记抗体最适标记量的确定 | 第25页 |
2.3.4 胶体金层析试纸条所用溶液及材料的确定 | 第25-30页 |
2.3.5 金标抗体及包被抗体浓度的确定 | 第30-31页 |
2.3.6 质控线(C线)抗体包被量的确定 | 第31-32页 |
2.3.7 检测线的包被位置的确定 | 第32-33页 |
2.3.8 半定量比色卡颜色梯度的建立 | 第33页 |
2.3.9 胶体金免疫层析试纸条的性能评估 | 第33-36页 |
2.3.10 与市场现有产品的比较 | 第36-37页 |
2.4 讨论 | 第37-38页 |
2.4.1 胶体金的制备 | 第37页 |
2.4.2 金标抗体和包被抗体的最佳组合用量 | 第37-38页 |
2.4.3 胶体金层析试纸条所用溶液及材料 | 第38页 |
2.4.4 半定量标准比色卡的建立 | 第38页 |
2.4.5 胶体金检测试纸条的重复性和稳定性 | 第38页 |
2.5 小结 | 第38-40页 |
第三章 降钙素原ELISA免疫检测方法的建立 | 第40-51页 |
3.1 实验材料 | 第40-41页 |
3.1.1 主要试剂和材料 | 第40页 |
3.1.2 主要溶液 | 第40-41页 |
3.2 实验内容 | 第41-43页 |
3.2.1 双抗夹心ELISA方法的检测过程 | 第41页 |
3.2.2 抗体的辣根过氧化物酶标记 | 第41页 |
3.2.3 包被的PCT抗体与酶标的PCT抗体最佳使用浓度的确定 | 第41-42页 |
3.2.4 最佳包被条件的确定 | 第42页 |
3.2.5 最佳封闭剂的确定 | 第42页 |
3.2.6 最佳封闭时间的确定 | 第42页 |
3.2.7 待检品作用时间的确定 | 第42页 |
3.2.8 酶标单抗最佳作用时间的摸索确定 | 第42-43页 |
3.2.9 双抗夹心ELISA阳性样品临界值的确定 | 第43页 |
3.2.10 双抗夹心ELISA免疫检测方法性能评估 | 第43页 |
3.2.11 与市场现有产品的比较 | 第43页 |
3.3 实验结果 | 第43-49页 |
3.3.1 包被的PCT抗体与酶标的PCT抗体最佳使用浓度的确定 | 第43-44页 |
3.3.2 最佳包被条件的确定 | 第44-45页 |
3.3.3 最佳封闭剂的确定 | 第45页 |
3.3.4 最佳封闭时间的确定 | 第45-46页 |
3.3.5 待检样品作用时间的确定 | 第46页 |
3.3.6 酶标PCT单抗最佳作用时间的确定 | 第46页 |
3.3.7 双抗夹心ELISA阳性样品临界值的确定 | 第46-47页 |
3.3.8 双抗夹心ELISA免疫检测方法性能评估 | 第47-49页 |
3.3.9 与市场现有产品的比较 | 第49页 |
3.4 讨论 | 第49-50页 |
3.5 小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |