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SLC14A1基因在膀胱肿瘤中异常表达机制的研究

中文摘要第4-9页
Abstract第9-13页
绪论第17-31页
    一、膀胱癌相关背景第17-25页
    二、SCL14A1基因及其表达第25-28页
    三、SLC14A1、UT-B与膀胱肿瘤第28-31页
第一章 材料和方法第31-55页
    1.1 组织样本来源及细胞培养第31-32页
        1.1.1 组织及样本来源第31页
        1.1.2 细胞培养第31-32页
    1.2 RT-PCR第32-36页
        1.2.1 TRizol法提取总RNA第32-33页
        1.2.2 Oligo-dT法合成cDNA第33-34页
        1.2.3 PCR第34-35页
        1.2.4 qPCR定量分析第35-36页
    1.3 质粒构建第36-40页
        1.3.1 测序TA质粒载体构建第36-37页
        1.3.2 质粒DNA小提及酶切鉴定第37-38页
        1.3.3 PCR产物回收第38-39页
        1.3.4 pcDNA3表达载体构建第39-40页
    1.4 细胞转染第40-41页
    1.5 细胞表面生物素化第41-42页
        1.5.1 反应Buffer的配制第41-42页
        1.5.2 细胞表面生物素标记第42页
    1.6 脂筏分离,PNGase F消化及凝集素沉淀实验第42-46页
        1.6.1 脂筏分离试验TNEV lysis buffer配制第43页
        1.6.2 利用连续浓度梯度蔗糖超速离心分离脂筏第43-45页
        1.6.3 PNGase F消化试验第45页
        1.6.4 凝集素沉降试验第45-46页
    1.7 Western blot第46-48页
        1.7.1 RIPA buffer配制第46-47页
        1.7.2 2 X Laemmli buffer配制第47页
        1.7.3 Western Blot第47-48页
    1.8 免疫组化第48-49页
    1.9 蟾蜍卵细胞培养及通水试验第49-54页
        1.9.1 pGH19蟾蜍卵细胞表达载体构建第49-50页
        1.9.2 pGH19质粒线性化及cRNA合成第50-52页
        1.9.3 蟾蜍卵细胞分离及培养第52-53页
        1.9.4 cRNA显微注射与通水试验第53-54页
    1.10 统计分析第54-55页
第二章 结果第55-67页
    2.1 UT-B在正常膀胱组织中的表达筛查第55-57页
    2.2 UT-B在膀胱肿瘤组织中的表达及序列分析第57-62页
    2.3 肿瘤特异性△UT-B1序列在细胞膜上的表达,分布及功能分析第62-64页
    2.4 膀胱肿瘤中UT-B蛋白的糖基化结构分析第64-67页
第三章 讨论第67-75页
第四章 结论第75-77页
参考文献第77-95页
综述第95-109页
    1. 膀胱癌诊断性肿瘤标志物第96-98页
    2. 膀胱癌预后相关肿瘤标志物第98-101页
    3. SLC14A1基因作为膀胱癌肿瘤标志物的展望第101-102页
    参考文献第102-109页
作者简介第109-111页
致谢第111页

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