中文摘要 | 第4-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
绪论 | 第17-31页 |
一、膀胱癌相关背景 | 第17-25页 |
二、SCL14A1基因及其表达 | 第25-28页 |
三、SLC14A1、UT-B与膀胱肿瘤 | 第28-31页 |
第一章 材料和方法 | 第31-55页 |
1.1 组织样本来源及细胞培养 | 第31-32页 |
1.1.1 组织及样本来源 | 第31页 |
1.1.2 细胞培养 | 第31-32页 |
1.2 RT-PCR | 第32-36页 |
1.2.1 TRizol法提取总RNA | 第32-33页 |
1.2.2 Oligo-dT法合成cDNA | 第33-34页 |
1.2.3 PCR | 第34-35页 |
1.2.4 qPCR定量分析 | 第35-36页 |
1.3 质粒构建 | 第36-40页 |
1.3.1 测序TA质粒载体构建 | 第36-37页 |
1.3.2 质粒DNA小提及酶切鉴定 | 第37-38页 |
1.3.3 PCR产物回收 | 第38-39页 |
1.3.4 pcDNA3表达载体构建 | 第39-40页 |
1.4 细胞转染 | 第40-41页 |
1.5 细胞表面生物素化 | 第41-42页 |
1.5.1 反应Buffer的配制 | 第41-42页 |
1.5.2 细胞表面生物素标记 | 第42页 |
1.6 脂筏分离,PNGase F消化及凝集素沉淀实验 | 第42-46页 |
1.6.1 脂筏分离试验TNEV lysis buffer配制 | 第43页 |
1.6.2 利用连续浓度梯度蔗糖超速离心分离脂筏 | 第43-45页 |
1.6.3 PNGase F消化试验 | 第45页 |
1.6.4 凝集素沉降试验 | 第45-46页 |
1.7 Western blot | 第46-48页 |
1.7.1 RIPA buffer配制 | 第46-47页 |
1.7.2 2 X Laemmli buffer配制 | 第47页 |
1.7.3 Western Blot | 第47-48页 |
1.8 免疫组化 | 第48-49页 |
1.9 蟾蜍卵细胞培养及通水试验 | 第49-54页 |
1.9.1 pGH19蟾蜍卵细胞表达载体构建 | 第49-50页 |
1.9.2 pGH19质粒线性化及cRNA合成 | 第50-52页 |
1.9.3 蟾蜍卵细胞分离及培养 | 第52-53页 |
1.9.4 cRNA显微注射与通水试验 | 第53-54页 |
1.10 统计分析 | 第54-55页 |
第二章 结果 | 第55-67页 |
2.1 UT-B在正常膀胱组织中的表达筛查 | 第55-57页 |
2.2 UT-B在膀胱肿瘤组织中的表达及序列分析 | 第57-62页 |
2.3 肿瘤特异性△UT-B1序列在细胞膜上的表达,分布及功能分析 | 第62-64页 |
2.4 膀胱肿瘤中UT-B蛋白的糖基化结构分析 | 第64-67页 |
第三章 讨论 | 第67-75页 |
第四章 结论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-95页 |
综述 | 第95-109页 |
1. 膀胱癌诊断性肿瘤标志物 | 第96-98页 |
2. 膀胱癌预后相关肿瘤标志物 | 第98-101页 |
3. SLC14A1基因作为膀胱癌肿瘤标志物的展望 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-109页 |
作者简介 | 第109-111页 |
致谢 | 第111页 |