摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-28页 |
1. 文献综述 | 第11-26页 |
1.1 花发育模型的建立与发展 | 第11-15页 |
1.2 重瓣花的起源 | 第15-16页 |
1.3 矮牵牛的花发育研究 | 第16-19页 |
1.4 关于启动子 | 第19-24页 |
1.4.1 启动子的基本结构 | 第19页 |
1.4.2 启动子的分类 | 第19-21页 |
1.4.3 启动子的克隆方法 | 第21-22页 |
1.4.4 启动子的功能分析 | 第22-24页 |
1.5 基因沉默技术 | 第24-26页 |
1.5.1 共抑制与反义RNA技术 | 第24页 |
1.5.2 RNAi技术 | 第24-25页 |
1.5.3 MiRNA技术 | 第25页 |
1.5.4 VIGS | 第25-26页 |
1.5.5 T-DNA插入突变与转座子插入突变 | 第26页 |
2. 研究目的与意义 | 第26-28页 |
第一章 矮牵牛单重瓣相关基因启动子及相关片段的克隆与序列比较分析 | 第28-37页 |
1. 引言 | 第28页 |
2. 材料和方法 | 第28-32页 |
2.1 植物材料 | 第28-29页 |
2.2 实验试剂及主要仪器 | 第29-30页 |
2.3 实验方法 | 第30-32页 |
2.3.1 引物设计 | 第30页 |
2.3.2 CTAB法提取单瓣矮牵牛与重瓣矮牵牛DNA | 第30页 |
2.3.3 相关基因目标片段的扩增及序列分析 | 第30-32页 |
2.3.3.1 PCR扩增 | 第30-31页 |
2.3.3.2 连接T载体 | 第31页 |
2.3.3.3 热激法转化大肠杆菌DH5α感受态 | 第31-32页 |
2.3.3.4 序列分析 | 第32页 |
3. 结果与分析 | 第32-35页 |
3.1 DNA的质量检测 | 第32页 |
3.2 目标片段扩增 | 第32-35页 |
3.3 目标片段的序列分析 | 第35页 |
4. 讨论 | 第35-37页 |
第二章 矮牵牛单重瓣相关基因的干涉载体构建 | 第37-47页 |
1. 引言 | 第37页 |
2. 材料与方法 | 第37-42页 |
2.1 实验试剂,质粒,菌株 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38-42页 |
2.2.1 引物设计 | 第38页 |
2.2.2 目的片段的扩增 | 第38-39页 |
2.2.3 T-A克隆 | 第39页 |
2.2.4 连接中间载体V97 | 第39-40页 |
2.2.4.1 提取质粒 | 第39页 |
2.2.4.2 酶切及连接 | 第39-40页 |
2.2.5 LR反应 | 第40-41页 |
2.2.6 电转法转化农杆菌EHA105 | 第41-42页 |
3. 结果与分析 | 第42-45页 |
3.1 目的片段的PCR扩增 | 第42-43页 |
3.2 中间载体的连接与检测 | 第43-44页 |
3.3 干涉载体:目的基因-V139 菌落PCR检测 | 第44页 |
3.4 转化农杆菌菌落PCR检测 | 第44-45页 |
4. 讨论 | 第45-47页 |
第三章 矮牵牛FBP20,PMADS12,scPD4,sshPD1 基因的遗传转化及功能分析 | 第47-55页 |
1. 引言 | 第47页 |
2. 材料与方法 | 第47-50页 |
2.1 植物材料,菌株,转基因载体 | 第47页 |
2.2 实验试剂 | 第47-48页 |
2.3 培养基 | 第48-49页 |
2.3.1 植物培养基 | 第48页 |
2.3.2 农杆菌培养基 | 第48-49页 |
2.4 实验方法 | 第49-50页 |
2.4.1 叶盘法转化矮牵牛W115 | 第49页 |
2.4.2 不定芽诱导 | 第49页 |
2.4.3 生根诱导 | 第49-50页 |
2.4.4 驯化移栽 | 第50页 |
2.4.5 阳性植株检测 | 第50页 |
2.4.6 转基因植株的主要园艺性状观测 | 第50页 |
3. 结果与分析 | 第50-53页 |
3.1 植物转化 | 第50-51页 |
3.2 转基因植株PCR阳性检测 | 第51-53页 |
3.3 转基因植株表型观测 | 第53页 |
4. 讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-64页 |
附录 | 第64-104页 |
致谢 | 第104页 |