| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第14-25页 |
| 1.1 硒元素的理化性质及分类 | 第14-15页 |
| 1.2 硒元素的生物学功能 | 第15-18页 |
| 1.2.1 硒具有抗氧化作用 | 第15-16页 |
| 1.2.2 硒具有调控免疫功能作用 | 第16-17页 |
| 1.2.3 硒具有促生长的作用 | 第17-18页 |
| 1.2.4 硒具有调节代谢的作用 | 第18页 |
| 1.2.5 硒具有预防癌症发生的作用 | 第18页 |
| 1.3 硒与细胞凋亡 | 第18-19页 |
| 1.4 MicroRNA（miRNA）概述 | 第19-22页 |
| 1.4.1 MiRNA研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4.2 MiRNA与细胞凋亡 | 第21页 |
| 1.4.3 MiRNA与免疫反应 | 第21-22页 |
| 1.5 MiRNA-155的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.6 肿瘤坏死因子超家族成员1B（TNFRSF1B）概述 | 第23页 |
| 1.7 实验目的与意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-41页 |
| 2.1 主要仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 试验动物分组与采样 | 第26-28页 |
| 2.3 试验设计 | 第28-40页 |
| 2.3.1 肉鸡免疫组织超微结构学的观察 | 第28页 |
| 2.3.2 肉鸡免疫组织病理学结构的观察 | 第28-29页 |
| 2.3.3 脾脏组织miRNA组学的检测 | 第29页 |
| 2.3.4 缺硒肉鸡脾脏组织中miRNA-155表达丰度的检测 | 第29-31页 |
| 2.3.5 生物信息学方法预测miRNA-155可能的靶基因 | 第31-32页 |
| 2.3.6 鸡淋巴细胞的原代培养 | 第32-33页 |
| 2.3.7 体外培养鸡淋巴细胞miRNA-155过表达/敲低模型的建立 | 第33-34页 |
| 2.3.8 MiRNA-155靶基因TNFRSF1B的鉴定 | 第34-37页 |
| 2.3.9 细胞中ROS水平的检测 | 第37-38页 |
| 2.3.10 AO-EB染色法检测淋巴细胞中凋亡水平 | 第38页 |
| 2.3.11 Tunel法染色法检测细胞中凋亡水平 | 第38页 |
| 2.3.12 RNA提取及qPCR | 第38-40页 |
| 2.3.13 蛋白提取及Western bloting | 第40页 |
| 2.4 试验数据的统计与分析 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-63页 |
| 3.1 缺硒肉鸡免疫组织超微结构观察结果 | 第41页 |
| 3.2 缺硒肉鸡免疫组织组织病理学观察结果 | 第41-42页 |
| 3.3 缺硒对肉鸡免疫组织内免疫球蛋白相关基因IgA、IgG、IgM和IgY mRNA表达的影响 | 第42-43页 |
| 3.4 缺硒肉鸡脾脏组织差异miRNA分析结果 | 第43-44页 |
| 3.5 缺硒对肉鸡脾脏组织内miRNA-155表达的影响 | 第44页 |
| 3.6 缺硒对肉鸡免疫组织内TNFRSF1B mRNA表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.7 缺硒对肉鸡免疫组织内TNFRSF1B蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.8 缺硒对肉鸡免疫组织内Gpx和MnSOD mRNA表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.9 缺硒对肉鸡免疫组织内Ca~(2+)稳态相关基因RyR1、RyR3和SERCA1s mRNA表达的影响 | 第47-48页 |
| 3.10 缺硒对肉鸡免疫组织内质网应激相关基因GRP78、GRP94、IRE1、eIF2α、ATF6和caspase 12 mRNA表达的影响 | 第48页 |
| 3.11 缺硒对肉鸡免疫组织内GRP78蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.12 缺硒对肉鸡免疫组织内凋亡相关基因JNK、Bcl-2、Bax、Bak、Cyt-c、caspase 9和caspase 3 mRNA表达的影响 | 第49页 |
| 3.13 缺硒对肉鸡免疫组织内凋亡相关基因JNK、Bcl-2、Bax和caspase 3蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.14 淋巴细胞转染miRNA-155后的干扰效率 | 第50-51页 |
| 3.15 双荧光素酶活性检测结果 | 第51-52页 |
| 3.16 H_2O_2对淋巴细胞内miRNA-155及TNFRSF1B的表达的影响 | 第52页 |
| 3.17 MiRNA-155对淋巴细胞内TNFRSF1B mRNA和蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.18 MiRNA-155对淋巴细胞内免疫球蛋白相关基因IgA、IgG、IgM和IgY mRNA表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.19 MiRNA-155对淋巴细胞内Gpx和MnSOD mRNA表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.20 MiRNA-155对淋巴细胞内ROS产生的影响 | 第55-56页 |
| 3.21 MiRNA-155对淋巴细胞内Ca~(2+)稳态相关基因RyR1、RyR3和SERCA1s mRNA表达的影响 | 第56页 |
| 3.22 MiRNA-155对淋巴细胞内内质网应激相关基因GRP78、GRP94、IRE1、eIF2α、ATF6和caspase 12 mRNA表达的影响 | 第56-57页 |
| 3.23 MiRNA-155对淋巴细胞内GRP78蛋白表达的影响 | 第57-58页 |
| 3.24 AO-EB检测结果 | 第58-59页 |
| 3.25 Tunel检测结果 | 第59-61页 |
| 3.26 MiRNA-155对淋巴细胞内凋亡相关基因JNK、Bcl-2、Bax、Bak、Cyt-c、caspase 9和caspase 3 mRNA表达的影响 | 第61页 |
| 3.27 MiRNA-155对淋巴细胞内凋亡相关基因JNK、Bcl-2、Bax和caspase 3蛋白表达的影响 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-70页 |
| 4.1 缺硒对肉鸡脾脏，胸腺和法氏囊组织免疫功能的影响 | 第63页 |
| 4.2 缺硒对肉鸡免疫组织氧化应激性凋亡的影响 | 第63-65页 |
| 4.3 缺硒对肉鸡脾脏，胸腺和法氏囊组织内miRNAs的影响 | 第65-66页 |
| 4.4 体外培养脾脏细胞miRNA-155过表达/敲低模型的建立 | 第66-67页 |
| 4.5 MiRNA-155对缺硒性肉鸡淋巴细胞凋亡通路的影响 | 第67-68页 |
| 4.6 缺硒对肉鸡脾脏，胸腺和法氏囊组织内质网应激的影响 | 第68-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-85页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第85页 |
