| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 水稻齿叶矮缩病毒(rice ragged stunt virus,RRSV)的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 病毒的发生与分布 | 第11页 |
| 1.1.2 RRSV的分类地位、介体、寄主及其危害症状 | 第11-12页 |
| 1.1.3 RRSV的基因组结构及其蛋白功能 | 第12-14页 |
| 1.1.4 RRSV的防治对策 | 第14-15页 |
| 1.2 水稻草矮病毒(rice grassy stunt virus,RGSV)的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 病害的发生与分布 | 第15页 |
| 1.2.2 RGSV的分类地位、介体、寄主及其危害症状 | 第15-16页 |
| 1.2.3 RGSV的基因组结构及其蛋白功能 | 第16-18页 |
| 1.2.4 RGSV的防治对策 | 第18页 |
| 1.3 vsiRNAs(virus-derived small interfering RNA)的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 RNA沉默 | 第18页 |
| 1.3.2 vsiRNAs | 第18-20页 |
| 1.4 本项目研究的目的及其意义 | 第20-21页 |
| 第二章 small RNA高通量测序结果分析 | 第21-28页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21页 |
| 2.1.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.2 方法 | 第21页 |
| 2.2 结果与分析 | 第21-27页 |
| 2.2.1 vsiRNAs的分布情况 | 第21-22页 |
| 2.2.2 vsiRNAs在病毒各个基因片段上的产生情况 | 第22-23页 |
| 2.2.3 vsiRNA在病毒RNA正负链上的产生情况 | 第23-24页 |
| 2.2.4 不同长度的vsiRNAs的产生情况 | 第24-25页 |
| 2.2.5 small RNA 5'端碱基偏好性 | 第25-26页 |
| 2.2.6 靶基因预测结果 | 第26-27页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 vsiRNAs预测靶基因的相对表达量分析 | 第28-37页 |
| 3.1 材料、试剂及仪器 | 第28页 |
| 3.1.1 材料 | 第28页 |
| 3.1.2 试剂及仪器 | 第28页 |
| 3.2 方法 | 第28-31页 |
| 3.2.1 水稻叶片总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 3.2.2 基因组DNA的消化及反转录 | 第29-30页 |
| 3.2.3 Real time PCR引物的设计 | 第30页 |
| 3.2.4 Real time PCR引物的筛选 | 第30-31页 |
| 3.2.5 标准曲线的绘制 | 第31页 |
| 3.2.6 Real time PCR检测预测出的vsiRNA靶基因表达量 | 第31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-35页 |
| 3.3.1 Real-time PCR引物可靠性检测 | 第31-32页 |
| 3.3.2 内参基因与目的基因的标准曲线 | 第32-35页 |
| 3.3.3 vsiRNAs靶基因在病健株中的表达量 | 第35页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 vsiRNAs前体的植物表达载体的构建及其农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第37-62页 |
| 4.1 材料、试剂及仪器 | 第37-38页 |
| 4.1.1 材料 | 第37页 |
| 4.1.2 试剂 | 第37页 |
| 4.1.3 仪器 | 第37-38页 |
| 4.2 方法 | 第38-49页 |
| 4.2.1 vsiRNAs前体的植物表达载体的构建 | 第38-44页 |
| 4.2.2 vsiRNAs前体的植物表达载体转化农杆菌 | 第44-45页 |
| 4.2.3 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第45-47页 |
| 4.2.4 转基因水稻的检测 | 第47-49页 |
| 4.2.5 Real time PCR检测T_0代转基因水稻对应靶基因的表达量 | 第49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-60页 |
| 4.3.1 vsiRNAs前体的植物表达载体的构建 | 第49-56页 |
| 4.3.2 PCR鉴定T_0代转基因水稻 | 第56-59页 |
| 4.3.3 Real time PCR检测T_0代转基因水稻对应靶基因的表达量 | 第59-60页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 总结与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 全文总结 | 第62-63页 |
| 5.2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录一 引物名称及其序列 | 第71-73页 |
| 附录二 本文中使用到的载体 | 第73-74页 |
| 附录三 本文所使用到的培养基配方 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
