| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-27页 |
| 1.1 Bt基因研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 Bt菌 | 第12-13页 |
| 1.1.2 Cry蛋白的特性及类型 | 第13-15页 |
| 1.2 Cry蛋白的杀虫机理 | 第15-16页 |
| 1.3 转基因水稻获得的方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 农杆菌介导法 | 第16-17页 |
| 1.3.2 回交转育 | 第17-18页 |
| 1.4 转Bt基因水稻的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 昆虫对转Bt基因作物产生抗性的对策 | 第19-21页 |
| 1.5.1 高剂量庇护所策略 | 第20页 |
| 1.5.2 基因堆叠策略 | 第20-21页 |
| 1.6 全球转基因作物产业化现状 | 第21-22页 |
| 1.7 转基因作物的安全性评价 | 第22-27页 |
| 第二章 两种Bt基因(cry2A~*cry1C~*)抗虫水稻的培育 | 第27-51页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 水稻转化受体 | 第27页 |
| 2.2.2 转化载体和目的基因 | 第27-28页 |
| 2.2.3 农杆菌菌株 | 第28页 |
| 2.2.4 试剂 | 第28页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第28-29页 |
| 2.2.6 T_0代转基因植株PCR目的基因跟踪检测和Basta涂抹检测 | 第29-30页 |
| 2.2.7 T_0代转基因植株Bt蛋白快速测定 | 第30页 |
| 2.2.8 T_0代转基因植株的总DNA提取和Southern blotting检测 | 第30-31页 |
| 2.2.9 转Bt基因植株后代的遗传分析 | 第31页 |
| 2.2.10 转基因纯合株系的筛选及田间抗虫性鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.11 纯合株系Bt蛋白含量的测定 | 第32页 |
| 2.2.12 重要农艺性状及产量表现的田间调查 | 第32页 |
| 2.2.13 利用Tail-PCR的方法确定cry2A~*基因和cry1C~*基因的插入位点 | 第32-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-49页 |
| 2.3.1 愈伤组织的诱导及农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第34-36页 |
| 2.3.2 T_0代转基因植株的PCR目的基因跟踪检测和Basta涂抹检测 | 第36-38页 |
| 2.3.3 T_0代转基因植株Bt蛋白的快速测定 | 第38-39页 |
| 2.3.4 T_0代转基因植株的Southern杂交 | 第39-40页 |
| 2.3.5 单拷贝转Bt水稻材料的遗传分析 | 第40-43页 |
| 2.3.6 纯合转基因水稻株系的筛选及田间抗虫性鉴定 | 第43-44页 |
| 2.3.7 纯合株系Bt蛋白含量的测定 | 第44-45页 |
| 2.3.8 转基因水稻的主要农艺性状分析 | 第45-49页 |
| 2.3.9 外源抗虫基因插入位点的确定 | 第49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 利用回交转育培育黄淮稻区抗虫转基因水稻新品系 | 第51-62页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 材料与方法 | 第51-54页 |
| 3.2.1 亲本材料 | 第51-52页 |
| 3.2.2 杂交及回交转育 | 第52页 |
| 3.2.3 Basta抗性选择和PCR分子检测 | 第52-53页 |
| 3.2.4 转基因植株的田间抗虫性鉴定 | 第53页 |
| 3.2.5 转基因植株的田间农艺性状调查 | 第53-54页 |
| 3.3 实验结果 | 第54-61页 |
| 3.3.1 转育经过 | 第54-55页 |
| 3.3.2 Bt转基因植株除草剂抗性鉴定 | 第55页 |
| 3.3.3 Bt转基因植株PCR检测 | 第55-57页 |
| 3.3.4 转基因稳定品系的筛选及田间抗虫性鉴定 | 第57-59页 |
| 3.3.5 转基因水稻品系的产量及其它农艺性状分析 | 第59-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-62页 |
| 第四章 总结与展望 | 第62-65页 |
| 4.1 本研究的目的和意义 | 第62-63页 |
| 4.2 后续工作 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录一 植物组培相关试剂制备 | 第73-76页 |
| 附录二 植物组培培养基制备 | 第76-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附件 | 第82页 |
