| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-22页 |
| 第一章 干扰素 | 第11-17页 |
| 1.1 干扰素的定义及发展史 | 第11-12页 |
| 1.2 干扰素的种类 | 第12页 |
| 1.3 干扰素的结构 | 第12页 |
| 1.4 干扰素的理化性质 | 第12-13页 |
| 1.5 干扰素的生物活性 | 第13-14页 |
| 1.5.1 抗病毒 | 第13-14页 |
| 1.5.2 抗肿瘤 | 第14页 |
| 1.6 干扰素IFNα-2b | 第14-16页 |
| 1.7 临床医疗中应用 | 第16页 |
| 1.8 干扰素优点及不足 | 第16-17页 |
| 第二章 长效干扰素 | 第17-22页 |
| 2.1 长效干扰素种类 | 第17页 |
| 2.2 点击化学 | 第17页 |
| 2.3 mPEG和mPEG-SPA20000 | 第17-18页 |
| 2.4 长效干扰素mPEG-IFN | 第18-19页 |
| 2.5 长效干扰素的理化性质及生物活性 | 第19页 |
| 2.6 临床中的应用及发展前景 | 第19-22页 |
| 第二篇 研究内容 | 第22-49页 |
| 第一章 P32-TrxA- Smt3-IFNα-2b基因构建表达及纯化 | 第22-32页 |
| 1.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 1.1.1 仪器 | 第22页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.3 预溶液的配制 | 第23-24页 |
| 1.2 试验方法 | 第24-27页 |
| 1.2.1 重组P32-TrxA-Smt3-IFNα-2b质粒的构建 | 第24-25页 |
| 1.2.2 工程菌P32-TrxA-Smt3-IFNα-2b/ BL21（DE3）的制备与诱导表达 | 第25-26页 |
| 1.2.3 融合蛋白P32-TrxA-Smt3-IFNα-2b的纯化 | 第26页 |
| 1.2.4 重组人干扰素IFNα-2b的纯度检测 | 第26-27页 |
| 1.3 结果 | 第27-31页 |
| 1.3.1 P32-TrxA-Smt3-IFNα-2b基因片段的酶切与回收 | 第27页 |
| 1.3.2 重组载体P32-TrxA-Smt3-IFNα-2b的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 1.3.3 融合蛋白TrxA-Smt3-IFNα-2b的表达 | 第28页 |
| 1.3.4 融合蛋白TrxA-Smt3-IFNα-2b的粗纯化 | 第28-30页 |
| 1.3.5 融合蛋白的精度纯化 | 第30页 |
| 1.3.6 高效液相色谱浓度鉴定 | 第30-31页 |
| 1.4 讨论 | 第31页 |
| 1.5 小结 | 第31-32页 |
| 第二章 长效干扰素mPEG-IFNα-2b制备 | 第32-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第32页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第33页 |
| 2.2 实验方案 | 第33-36页 |
| 2.2.1 长效干扰素mPEG-IFNα-2b的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.2 单甲基化的长效干扰素mPEG-IFNα-2b的纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.3 单甲基化的长效干扰素mPEG-IFNα-2b纯度检测 | 第35-36页 |
| 2.3 结果 | 第36-39页 |
| 2.3.1 长效干扰素mPEG-IFNα-2b正交试验结果 | 第36-38页 |
| 2.3.2 单甲基化的长效干扰素mPEG-IFNα-2b的纯化 | 第38-39页 |
| 2.3.3 长效干扰素mPEG-IFNα-2b的反向高效液相色谱 | 第39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.5 小结 | 第40-41页 |
| 第三章 两种干扰素的体外生物活性的研究 | 第41-49页 |
| 3.1 试验材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 材料 | 第41页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第41页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第41-42页 |
| 3.2 试验方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 细胞复苏 | 第42页 |
| 3.2.2 细胞铺板 | 第42-43页 |
| 3.2.3 两种干扰素的体外抗肿瘤细胞实验 | 第43页 |
| 3.2.4 两种干扰素的体外抗病毒实验 | 第43-45页 |
| 3.3 结果 | 第45-47页 |
| 3.3.1 两种干扰素作用于Hela细胞效果 | 第45页 |
| 3.3.2 两种干扰素作用于Hep-2 细胞效果 | 第45-46页 |
| 3.3.3 两种干扰素作用于Ishikawa细胞效果 | 第46页 |
| 3.3.4 两种干扰素作用于BGC细胞效果 | 第46页 |
| 3.3.5 两种干扰素作用于Wish细胞效果 | 第46-47页 |
| 3.3.6 两种干扰素作用于 Wish-VSV 系统蛋白效价 | 第47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-48页 |
| 3.5 小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
