摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
主要缩略语英文索引 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第10-12页 |
技术路线 | 第12-14页 |
第2章 材料和方法 | 第14-20页 |
2.1 材料 | 第14-15页 |
2.1.1 细胞系 | 第14页 |
2.1.2 菌株和质粒载体 | 第14页 |
2.1.3 主要试剂 | 第14页 |
2.1.4 引物 | 第14-15页 |
2.1.5 主要实验仪器 | 第15页 |
2.2 方法 | 第15-20页 |
2.2.1 质粒的转化和纯化 | 第15页 |
2.2.2 RT-PCR | 第15-16页 |
2.2.3 pCDNA3.1- SERPINA3真核表达载体的构建 | 第16页 |
2.2.4 细胞培养 | 第16-17页 |
2.2.5 基因转染 | 第17页 |
2.2.6 转染阳性克隆细胞的鉴定 | 第17页 |
2.2.7 MTT比色法绘制细胞生长曲线 | 第17-18页 |
2.2.8 流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和凋亡 | 第18页 |
2.2.9 平板克隆形成实验 | 第18-19页 |
2.2.10 软琼脂集落形成实验 | 第19页 |
2.2.11 结果统计学分析 | 第19-20页 |
第3章 实验结果 | 第20-32页 |
3.1 pcDNA3.1- SERPINA3质粒的重组与鉴定 | 第20-22页 |
3.2 建立SERPINA3稳定高表达的MGC803细胞系 | 第22-24页 |
3.3 MTT法检测SERPINA3高表达对MGC803细胞生长的影响15 | 第24-25页 |
3.4 平皿克隆形成实验检测SERPINA3高表达对MGC803细胞停泊依赖性生长的影响 | 第25-26页 |
3.5 软琼脂集落形成实验检测SERPINA3高表达对MGC803细胞非停泊依赖性生长的影响 | 第26-28页 |
3.6 流式细胞术检测SERPINA3高表达对MGC803细胞周期分布的影响 | 第28-29页 |
3.7 流式细胞术检测SERPINA3高表达对MGC803细胞凋亡的影响 | 第29-32页 |
第4章 讨论 | 第32-36页 |
第5章 结论 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
文献综述 启动子报道基因分析的原理与应用 | 第42-52页 |
参考文献 | 第48-52页 |
作者攻读学位期间的科研成果 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
基金 | 第55页 |