| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第8-13页 |
| 1.1 植物与氮素营养 | 第8页 |
| 1.2 杨树与氮素营养 | 第8页 |
| 1.2.1 杨树的社会经济价值 | 第8页 |
| 1.2.2 氮素营养与杨树生长发育 | 第8页 |
| 1.3 植物对于氮素营养的吸收和同化 | 第8-11页 |
| 1.3.1 植物对于氮素营养的吸收 | 第8-10页 |
| 1.3.2 硝酸根转运蛋白(NRT) | 第10页 |
| 1.3.3 铵转运蛋白(AMT) | 第10-11页 |
| 1.3.4 GS/GOGAT途径 | 第11页 |
| 1.4 地上部分铵的再利用 | 第11-12页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| 2 毛果杨铵转运蛋白PtrAMT1；6的表达模式 | 第13-19页 |
| 2.1 材料 | 第13页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第13页 |
| 2.1.2 试剂及器材 | 第13页 |
| 2.2 实验方法 | 第13-16页 |
| 2.2.1 材料处理 | 第13-14页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第14页 |
| 2.2.3 cDNA制备 | 第14-16页 |
| 2.2.4 实时定量PCR | 第16页 |
| 2.3 实验结果 | 第16-18页 |
| 2.3.1 RNA提取结果 | 第16-17页 |
| 2.3.2 荧光定量PCR结果 | 第17-18页 |
| 2.4 本章小结 | 第18-19页 |
| 3 酵母铵转运蛋白突变体的功能恢复 | 第19-29页 |
| 3.1 材料 | 第19-21页 |
| 3.1.1 载体和菌种 | 第19页 |
| 3.1.2 试验所用的试剂 | 第19-20页 |
| 3.1.3 酵母培养配制 | 第20-21页 |
| 3.1.4 试剂和器材 | 第21页 |
| 3.2 实验方法 | 第21-25页 |
| 3.2.1 基因序列分析 | 第21页 |
| 3.2.2 酵母表达载体pYES2-PtrAMT1；6构建 | 第21-24页 |
| 3.2.3 酵母感受态的制备和转化 | 第24页 |
| 3.2.4 酵母功能互补 | 第24-25页 |
| 3.3 实验结果 | 第25-28页 |
| 3.3.1 毛果杨和番茄AMT1家族蛋白N端序列多重比对 | 第25页 |
| 3.3.2 跨膜结构域预测 | 第25页 |
| 3.3.3 基因克隆及酵母表达载体pYES2-PtrAMT1；6载体构建 | 第25-27页 |
| 3.3.4 酵母功能互补 | 第27-28页 |
| 3.4 本章小结 | 第28-29页 |
| 4 PtrAMT1；6P：：GUS构建以及在拟南芥中的表达 | 第29-38页 |
| 4.1 材料 | 第29-30页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 4.1.2 载体和菌种 | 第29页 |
| 4.1.3 试剂和器材 | 第29-30页 |
| 4.2 实验方法 | 第30-35页 |
| 4.2.1 启动子元件分析 | 第30页 |
| 4.2.2 毛果杨基因组DNA的提取 | 第30页 |
| 4.2.3 毛果杨PtrAMT1；6启动子克隆和表达载体构建 | 第30-32页 |
| 4.2.4 农杆菌感受态的制备及转化 | 第32-33页 |
| 4.2.5 拟南芥种子表面消毒、萌发和幼苗移栽 | 第33-34页 |
| 4.2.6 拟南芥遗传转化和纯合转化系的筛选 | 第34页 |
| 4.2.7 GUS染色 | 第34-35页 |
| 4.3 实验结果 | 第35-37页 |
| 4.3.1 启动子元件分析 | 第35页 |
| 4.3.2 毛果杨PtrAMT1；6启动子克隆 | 第35-36页 |
| 4.3.3 PtrAMT1；6P：：GUS在拟南芥中的表达 | 第36-37页 |
| 4.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 5 PtrAMT1；6在拟南芥中过表达 | 第38-45页 |
| 5.1 材料 | 第38-39页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 5.1.2 载体和菌种 | 第38页 |
| 5.1.3 培养基配制 | 第38-39页 |
| 5.1.4 实验所用试剂 | 第39页 |
| 5.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 5.2.1 pROKE2-PtrAMT1；6表达载体的构建和农杆菌转化 | 第39-40页 |
| 5.2.2 拟南芥遗传转化和纯合系筛选和鉴定 | 第40页 |
| 5.2.3 拟南芥过表达转化株系在不同营养培养基上竖直生长 | 第40页 |
| 5.3 实验结果 | 第40-43页 |
| 5.3.1 载体pROKE2-PtrAMT1；6构建 | 第40-41页 |
| 5.3.2 PtrAMT1；6基因拟南芥纯合系PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 5.3.3 转化系过表达定量检测 | 第42页 |
| 5.3.4 拟南芥不同氮素处理试验 | 第42-43页 |
| 5.4 本章小结 | 第43-45页 |
| 6 84K杨PtrAMT1；6基因遗传转化 | 第45-53页 |
| 6.1 材料 | 第45页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第45页 |
| 6.1.2 菌种和载体 | 第45页 |
| 6.1.3 试验所用试剂盒 | 第45页 |
| 6.1.4 84K组织培养所用培养基配置 | 第45页 |
| 6.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 6.2.1 过表达载体转化农杆菌 | 第45页 |
| 6.2.2 RNA干扰载体构建 | 第45-47页 |
| 6.2.3 外植体消毒和84K杨扩繁 | 第47-48页 |
| 6.2.4 农杆菌介导遗传转化 | 第48页 |
| 6.2.5 转化系分子鉴定 | 第48-49页 |
| 6.3 实验结果 | 第49-52页 |
| 6.3.1 过表达载体转化农杆菌 | 第49页 |
| 6.3.2 RNA干扰载体构建 | 第49-51页 |
| 6.3.3 84K杨PtrAMT1；6基因遗传转化 | 第51页 |
| 6.3.4 84K杨过表达系分子鉴定 | 第51-52页 |
| 6.3.5 84K杨过抑制系分子鉴定 | 第52页 |
| 6.4 本章小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
