摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第11-17页 |
1.1 蛋白质组学研究背景及意义 | 第11-12页 |
1.2 蛋白质酪氨酸磷酸化修饰概况 | 第12-13页 |
1.3 酪氨酸磷酸肽富集方法 | 第13-15页 |
1.3.1 金属氧化物亲和色谱和固相金属离子亲和色谱 | 第13-14页 |
1.3.2 抗体免疫沉淀 | 第14页 |
1.3.3 其他方法 | 第14-15页 |
1.4 我国肝癌现状 | 第15页 |
1.5 本课题研究内容和意义 | 第15-17页 |
第二章 基于离心式富集装置和抗体的酪氨酸磷酸肽分析方法 | 第17-34页 |
2.1 仪器和试剂 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-21页 |
2.2.1 C57BL/6 小鼠肝脏细胞全蛋白提取 | 第18-19页 |
2.2.2 鼠肝酶解产物纯化 | 第19页 |
2.2.3 磷酸肽富集 | 第19-20页 |
2.2.4 抗体富集酪氨酸磷酸化肽段 | 第20页 |
2.2.5 质谱鉴定及数据处理 | 第20-21页 |
2.3 结果与讨论 | 第21-33页 |
2.3.1 磷酸化肽段的富集策略 | 第21-22页 |
2.3.2 TiO_2 富集方法的优化 | 第22-27页 |
2.3.3 蛋白质酪氨酸磷酸化新型富集策略的建立与优化 | 第27-31页 |
2.3.4 小鼠肝脏蛋白质酪氨酸磷酸化修饰蛋白质组分析 | 第31-33页 |
2.4 本章小结 | 第33-34页 |
第三章 肝癌酪氨酸磷酸化修饰蛋白的规模化富集与鉴定 | 第34-44页 |
3.1 仪器和试剂 | 第34-35页 |
3.2 实验方法 | 第35-37页 |
3.2.1 癌与癌旁组织样品蛋白酶解 | 第35页 |
3.2.2 癌与癌旁组织酶解产物纯化 | 第35页 |
3.2.3 磷酸肽富集 | 第35-36页 |
3.2.4 抗体富集酪氨酸磷酸化肽段 | 第36-37页 |
3.2.5 质谱鉴定及数据处理 | 第37页 |
3.3 结果与讨论 | 第37-43页 |
3.4 本章小结 | 第43-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录 | 第48-65页 |
发表论文 | 第65-80页 |
个人简历 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |