摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-12页 |
1.1 渗透压与微生物的关系 | 第7-8页 |
1.1.1 渗透压与相容性物质 | 第7页 |
1.1.2 渗透压对微生物生长的影响 | 第7页 |
1.1.3 渗透压影响碳硫在代谢途径中的分布 | 第7-8页 |
1.2 酵母糖代谢的关键酶 | 第8-10页 |
1.2.1 磷酸果糖激酶 | 第8-9页 |
1.2.2 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 | 第9页 |
1.2.3 丙酮酸激酶 | 第9页 |
1.2.4 甘油-3 磷酸脱氢酶 | 第9-10页 |
1.3 渗透压对微生物的主要调控方式 | 第10页 |
1.3.1 HOG途径 | 第10页 |
1.3.2 代谢应答 | 第10页 |
1.4 研究意义及主要研究内容 | 第10-12页 |
1.4.1 研究意义 | 第10-11页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第11-12页 |
第二章 材料与方法 | 第12-19页 |
2.1 材料 | 第12-14页 |
2.1.1 实验菌株与载体 | 第12-13页 |
2.1.2 工具酶 | 第13页 |
2.1.3 主要试剂 | 第13页 |
2.1.4 培养基及用途 | 第13-14页 |
2.1.5 主要仪器 | 第14页 |
2.2 方法 | 第14-19页 |
2.2.1 酵母基因组DNA的提取 | 第14-15页 |
2.2.2 菌株平板生长实验 | 第15页 |
2.2.3 目标基因的PCR扩增 | 第15-16页 |
2.2.4 酵母总RNA提取 | 第16-17页 |
2.2.5 逆转录 | 第17页 |
2.2.6 荧光定量PCR | 第17页 |
2.2.7 产物测定 | 第17页 |
2.2.8 酶活力的测定 | 第17-19页 |
第三章 结果与讨论 | 第19-38页 |
3.1 关键代谢基因克隆及功能鉴定 | 第19-26页 |
3.1.1 关键代谢基因的克隆 | 第19-20页 |
3.1.2 重组质粒的构建 | 第20-21页 |
3.1.3 S. cerevisiae W303-1A pfk1、pyk1基因缺失株的构建 | 第21-23页 |
3.1.4 关键代谢基因的生理功能验证 | 第23-26页 |
3.2 不同渗透压下C. glycerinogenes代谢及发酵水平分析 | 第26-33页 |
3.2.1 不同渗透压对C. glycerinogenes生长和甘油积累的影响 | 第26-28页 |
3.2.2 渗透压对C. glycerinogenes发酵的影响 | 第28-30页 |
3.2.3 渗透压对C. glycerinogenes代谢流的影响 | 第30-33页 |
3.3 不同渗透压浓度下C. glycerinogenes关键酶水平及其转录水平分析 | 第33-38页 |
3.3.1 不同渗透压浓度下PFK、G6PDH、PYK、ctGPD关键酶水平变化 | 第33-35页 |
3.3.2 不同渗透压浓度下关键酶基因Cgpfk1、Cgpfk2、Cgzwf、Cgpyk和Cggpd转录水平变化 | 第35-38页 |
主要结论与展望 | 第38-39页 |
主要结论 | 第38页 |
展望 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
附录 | 第43-44页 |
附录A:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43-44页 |
附录B:C. glycerinogenes 代谢网络所涉及的反应式 | 第44页 |