| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 高血压调控 | 第12-14页 |
| 1.1.1 高血压 | 第12页 |
| 1.1.2 血压调控关键酶ACE及氨肽酶 | 第12-13页 |
| 1.1.3 高血压调控关键酶的分离纯化 | 第13-14页 |
| 1.2 皱纹盘鲍简介 | 第14-15页 |
| 1.2.1 皱纹盘鲍 | 第14页 |
| 1.2.2 营养及活性成分研究 | 第14-15页 |
| 1.3 ACE抑制肽 | 第15-17页 |
| 1.3.1 ACE抑制肽的分离纯化 | 第15-16页 |
| 1.3.2 ACE抑制肽的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 本课题研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-29页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 原料 | 第18页 |
| 2.1.2 实验试剂与层析树脂 | 第18-19页 |
| 2.2 实验所用溶液的配制 | 第19-20页 |
| 2.2.1 酶纯化所用溶液 | 第19页 |
| 2.2.2 ACE酶活测定所用溶液 | 第19页 |
| 2.2.3 SDS-PAGE所用溶液 | 第19页 |
| 2.2.4 银染所用溶液 | 第19页 |
| 2.2.5 RP-HPLC所用溶液 | 第19-20页 |
| 2.3 实验所用仪器 | 第20页 |
| 2.4 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.4.1 ACE酶活力的测定 | 第20-21页 |
| 2.4.2 ACE抑制活性的测定 | 第21页 |
| 2.4.3 氨肽酶酶活力测定 | 第21页 |
| 2.4.4 蛋白浓度测定 | 第21页 |
| 2.4.5 抑制肽浓度的测定 | 第21-22页 |
| 2.4.6 SDS-PAGE | 第22页 |
| 2.4.7 Tricine-SDS-PAGE | 第22页 |
| 2.4.8 硝酸银染色方法 | 第22页 |
| 2.5 ACE分离纯化方案 | 第22-24页 |
| 2.5.1 预处理 | 第22页 |
| 2.5.2 氯化钠盐析 | 第22-23页 |
| 2.5.3 DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析 | 第23页 |
| 2.5.4 Phenyl-Sepharose疏水层析 | 第23页 |
| 2.5.5 Sephacryl S-200 凝胶过滤层析 | 第23-24页 |
| 2.6 氨肽酶分离纯化方案 | 第24-25页 |
| 2.6.1 预处理 | 第24页 |
| 2.6.2 硫酸铵盐析 | 第24页 |
| 2.6.3 DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析 | 第24页 |
| 2.6.4 Phenyl-Sepharose疏水层析 | 第24-25页 |
| 2.6.5 Sephacryl S-300 凝胶过滤层析 | 第25页 |
| 2.7 酶学性质分析 | 第25-26页 |
| 2.7.1 蛋白酶分子量的大小和纯度的鉴定 | 第25页 |
| 2.7.2 肽指纹质量图谱分析 | 第25页 |
| 2.7.3 最适pH和pH稳定性 | 第25页 |
| 2.7.4 最适反应温度、热稳定性及冻藏稳定性 | 第25页 |
| 2.7.5 最适底物测定 | 第25页 |
| 2.7.6 动力学参数测定 | 第25页 |
| 2.7.7 金属离子对蛋白酶活力的影响 | 第25-26页 |
| 2.7.8 2D-PAGE | 第26页 |
| 2.8 鲍鱼ACE抑制肽的纯化制备 | 第26-29页 |
| 2.8.1 原料预处理 | 第26页 |
| 2.8.2 单因素法选取最佳酶种类 | 第26页 |
| 2.8.3 响应面法优化酶解条件 | 第26-27页 |
| 2.8.4 Superdex G-15 凝胶柱层析 | 第27页 |
| 2.8.5 RP-HPLC | 第27页 |
| 2.8.6 热稳定性及pH稳定性 | 第27页 |
| 2.8.7 消化稳定性 | 第27-28页 |
| 2.8.8 体内降血压效果的研究 | 第28-29页 |
| 第3章 结果与分析 | 第29-55页 |
| 3.1 血管紧张素转换酶（ACE）的制备与纯化 | 第29-34页 |
| 3.1.1 工具酶ACE的制备 | 第29-31页 |
| 3.1.2 ACE的纯化 | 第31-34页 |
| 3.2 ACE的性质分析 | 第34-38页 |
| 3.2.1 肽质量指纹图谱分析 | 第34-35页 |
| 3.2.2 ACE的最适温度和热稳定性 | 第35-36页 |
| 3.2.3 ACE的最适pH和pH稳定性 | 第36-37页 |
| 3.2.4 2D-PAGE | 第37页 |
| 3.2.5 冻藏对ACE活性的影响 | 第37-38页 |
| 3.3 氨肽酶B的分离纯化 | 第38-40页 |
| 3.3.1 硫酸铵盐析 | 第38页 |
| 3.3.2 氨肽酶的柱层析分离 | 第38-40页 |
| 3.4 氨肽酶的性质分析 | 第40-45页 |
| 3.4.1 肽质量指纹图谱分析 | 第40-41页 |
| 3.4.2 猪氨肽酶最适温度和热稳定性、最适pH值和pH稳定性分析 | 第41-42页 |
| 3.4.3 底物特异性 | 第42-43页 |
| 3.4.4 APB动力学分析 | 第43页 |
| 3.4.5 蛋白酶抑制剂对酶活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.6 金属离子对酶活性的影响 | 第44-45页 |
| 3.5 鲍鱼ACE抑制肽的制备 | 第45-55页 |
| 3.5.1 预处理 | 第45页 |
| 3.5.2 单因素法筛选最佳酶种类 | 第45页 |
| 3.5.3 响应面优化酶解条件 | 第45-46页 |
| 3.5.4 鲍鱼多肽的稳定性分析 | 第46-47页 |
| 3.5.5 体内降血压效果研究 | 第47-49页 |
| 3.5.6 ACE抑制肽的分离纯化 | 第49-55页 |
| 第4章 讨论 | 第55-58页 |
| 第5章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第67页 |
