摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 正义RNA植物病毒的复制 | 第14-18页 |
1.1.1 正义RNA植物病毒复制的特点 | 第14-15页 |
1.1.2 参与病毒复制的寄主蛋白因子 | 第15-17页 |
1.1.3 参与病毒复制的脂质成分 | 第17-18页 |
1.2 筛选病毒复制寄主因子的研究方法 | 第18-20页 |
1.2.1 酵母突变体文库 | 第18-19页 |
1.2.2 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第19-20页 |
1.2.3 免疫共沉淀分离病毒复制复合体 | 第20页 |
1.3 黄瓜花叶病毒 | 第20-23页 |
1.3.1 CMV的生物学特性 | 第20-21页 |
1.3.2 CMV基因组的构成及其功能 | 第21-22页 |
1.3.3 CMV的复制 | 第22-23页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
1.4.1 本研究的目的和意义 | 第23页 |
1.4.2 本研究的内容 | 第23-24页 |
第二章 烟草液泡分离体系的建立 | 第24-31页 |
2.1 材料与方法 | 第24-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 农杆菌与质粒 | 第24页 |
2.1.3 酶与试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 烟草液泡分离体系 | 第25-28页 |
2.1.4.1 农杆菌浸润接种LsCMV | 第25页 |
2.1.4.2 病毒CP蛋白的检测 | 第25-27页 |
2.1.4.3 烟草液泡的分离 | 第27-28页 |
2.2 结果与讨论 | 第28-30页 |
2.2.1 LS-CMV病毒接种和检测 | 第28-29页 |
2.2.2 烟草液泡的分离 | 第29-30页 |
2.3 小结 | 第30-31页 |
第三章 液泡膜蛋白的质谱鉴定和分析 | 第31-44页 |
3.1 材料与方法 | 第31-33页 |
3.1.1 酶与试剂 | 第31页 |
3.1.2 常用试剂的配制 | 第31页 |
3.1.3 LC/MS-MS鉴定液泡膜蛋白 | 第31-33页 |
3.1.3.1 液泡膜的富集 | 第31-32页 |
3.1.3.2 LC-MS/MS鉴定液泡膜蛋白 | 第32-33页 |
3.2 结果与讨论 | 第33-43页 |
3.2.1 SDS-PAGE电泳检测液泡样品的总蛋白 | 第33-34页 |
3.2.2 LC-MS/MS鉴定液泡膜蛋白的种类 | 第34-43页 |
3.3 小结 | 第43-44页 |
第四章 CMV复制相关蛋白的功能鉴定 | 第44-53页 |
4.1 材料与方法 | 第44-50页 |
4.1.1 实验材料 | 第44页 |
4.1.2 酶与试剂 | 第44页 |
4.1.3 目的基因载体的构建 | 第44-49页 |
4.1.4 目的蛋白下调对CMV复制的影响 | 第49-50页 |
4.1.4.1 Northern检测病毒基因组RNA含量的变化 | 第49页 |
4.1.4.2 GFP绿色荧光的观察 | 第49-50页 |
4.2 结果与讨论 | 第50-52页 |
4.2.1 目的基因的扩增 | 第50页 |
4.2.2 目的蛋白下调对CMV复制的影响 | 第50-52页 |
4.3 小结 | 第52-53页 |
总结和展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
附录:常用试剂配制 | 第57-59页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |