| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-32页 |
| 1.1 丹参研究概况 | 第13-15页 |
| 1.1.1 丹参生物学研究 | 第13页 |
| 1.1.2 丹参有效成分研究 | 第13-14页 |
| 1.1.3 丹参资源现状 | 第14-15页 |
| 1.2 植物基因工程主要实施策略 | 第15-19页 |
| 1.2.1 基因过表达技术 | 第15-16页 |
| 1.2.2 基因表达沉默技术 | 第16-18页 |
| 1.2.3 基因定向修饰技术 | 第18-19页 |
| 1.3 丹参的遗传转化研究 | 第19-22页 |
| 1.3.1 植物主要遗传转化技术 | 第19页 |
| 1.3.2 根癌农杆菌介导的丹参遗传转化 | 第19-21页 |
| 1.3.3 发根农杆菌介导的丹参遗传转化 | 第21-22页 |
| 1.4 丹参主要次生代谢产物合成途径 | 第22-28页 |
| 1.4.1 丹酚酸合成途径及其关键基因 | 第22-25页 |
| 1.4.2 丹参酮合成途径及其关键基因 | 第25-28页 |
| 1.5 丹参次生代谢工程研究进展 | 第28-30页 |
| 1.5.1 基于丹参次生代谢途径关键基因的代谢工程 | 第28页 |
| 1.5.2 基于植物转录因子的丹参代谢工程 | 第28-29页 |
| 1.5.3 基于胁迫响应基因的丹参代谢工程 | 第29-30页 |
| 1.6 立题依据及研究内容 | 第30-32页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第30-31页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第32页 |
| 2.2 实验试剂 | 第32页 |
| 2.3 实验仪器 | 第32-35页 |
| 2.4 实验方法 | 第35-56页 |
| 2.4.1 植物表达载体构建 | 第35-41页 |
| 2.4.2 丹参遗传转化体系建立 | 第41-46页 |
| 2.4.3 丹参转基因材料分子鉴定 | 第46-49页 |
| 2.4.4 GUS组织化学染色 | 第49页 |
| 2.4.5 除草剂Basta筛选 | 第49页 |
| 2.4.6 丹参干旱胁迫处理 | 第49-50页 |
| 2.4.7 高效液相色谱（HPLC）检测丹参酮类和丹酚酸类 | 第50页 |
| 2.4.8 目标基因RT-PCR分析 | 第50-51页 |
| 2.4.9 烟草遗传转化及鉴定 | 第51页 |
| 2.4.10 转基因烟草分子水平鉴定 | 第51页 |
| 2.4.11 烟草干旱胁迫处理 | 第51页 |
| 2.4.12 烟草植株理化指标测定 | 第51-53页 |
| 2.4.13 RT-PCR 分析 | 第53页 |
| 2.4.14 数据分析与统计 | 第53-56页 |
| 第三章 结果与分析 | 第56-86页 |
| 3.1 丹参遗传转化体系的创新及优化 | 第56-63页 |
| 3.1.1 基于Basta除草剂抗性选择的丹参遗传转化体系 | 第56-60页 |
| 3.1.2 基于rolABC基因簇的丹参毛状根诱导体系建立 | 第60-63页 |
| 3.2 基于转录因子AtEDT1过表达的丹参次生代谢工程 | 第63-70页 |
| 3.2.1 丹参AtEDT1转基因阳性再生株系的获得 | 第63-64页 |
| 3.2.2 过表达AtEDT1显著促进转基因丹参根系生长 | 第64-65页 |
| 3.2.3 过表达AtEDT1增加转基因丹参根系丹酚酸积累 | 第65-67页 |
| 3.2.4 过表达AtEDT1影响丹酚酸类合成代谢相关基因表达 | 第67页 |
| 3.2.5 过表达AtEDT1影响转基因丹参根系丹参酮的积累 | 第67-68页 |
| 3.2.6 过表达AtEDT1影响转基因丹参酮类合成代谢相关基因的表达 | 第68-69页 |
| 3.2.7 过表达AtEDT1增强干旱胁迫条件下转基因丹参生长能力 | 第69-70页 |
| 3.3 基于丹酚酸合成代谢旁路基因抑制表达的丹参代谢工程 | 第70-78页 |
| 3.3.1 基于MIGS的丹参目标基因抑制表达体系验证 | 第70-73页 |
| 3.3.2 丹酚酸合成代谢旁路基因SmHPPD、SmCCR抑制表达 | 第73-78页 |
| 3.4 丹参多胺调控基因SmSAMDC的遗传转化 | 第78-86页 |
| 3.4.1 SmSAMDC表达特性及丹参同源表达分析 | 第78-80页 |
| 3.4.2 SmSAMDC烟草异源表达分析 | 第80-86页 |
| 第四章 讨论 | 第86-94页 |
| 4.1 丹参遗传转化新体系建立及优化 | 第86-88页 |
| 4.1.1 除草剂抗性筛选体系在丹参遗传转化中的建立及应用 | 第86-87页 |
| 4.1.2 基于rolABC基因簇的最简丹参毛状根诱导系统评价 | 第87-88页 |
| 4.2 转录因子AtEDT1过表达策略有效性分析 | 第88-90页 |
| 4.3 丹酚酸合成代谢旁路基因抑制表达策略有效性分析 | 第90-92页 |
| 4.4 SmSAMDC基因在丹参代谢工程应用可行性分析 | 第92-94页 |
| 第五章 结论 | 第94-96页 |
| 后续工作展望 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-114页 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 | 第114-115页 |
| 附表 | 第115-118页 |
