| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 肺动脉高压定义及研究概述 | 第11-13页 |
| 1.2 miRNA研究概述 | 第13-14页 |
| 1.3 miRNA在肺动脉高压中的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4 细胞核miRNA | 第16-18页 |
| 1.5 外泌体miRNA在肺动脉高压中的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.6 本课题研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第21-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 细胞培养相关试剂 | 第21页 |
| 2.1.2 转染试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 荧光定量PCR相关试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 western blot相关试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 动物实验相关试剂 | 第21页 |
| 2.1.6 细胞系 | 第21-22页 |
| 2.1.7 动物 | 第22页 |
| 2.1.8 其他试剂 | 第22页 |
| 2.1.9 分子生物学相关软件 | 第22页 |
| 2.2 仪器与耗材 | 第22-23页 |
| 2.2.1 细胞培养相关仪器 | 第22页 |
| 2.2.2 细菌实验相关仪器 | 第22页 |
| 2.2.3 离心机 | 第22页 |
| 2.2.4 PCR相关仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.5 DNA/RNA浓度测量仪器 | 第23页 |
| 2.2.6 核酸电泳相关仪器 | 第23页 |
| 2.2.7 蛋白质检测相关仪器 | 第23页 |
| 2.2.8 显微镜 | 第23页 |
| 2.2.9 其他仪器 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.3.2 miRNAmimic的SI瞬时转染 | 第24-25页 |
| 2.3.3 miRNA表达谱的构建 | 第25-30页 |
| 2.3.4 Western blot检测蛋白质的表达水平 | 第30-34页 |
| 2.3.5 细胞迁移实验 | 第34页 |
| 2.3.6 血管生成实验 | 第34页 |
| 2.3.7 MCT诱导肺动脉高压大鼠模型构建 | 第34-35页 |
| 2.3.8 数据处理 | 第35-36页 |
| 第3章 结果与分析 | 第36-53页 |
| 3.1 缺氧HPAEC miRNA表达谱的绘制 | 第36-39页 |
| 3.1.1 HPAEC缺氧效果鉴定 | 第36-37页 |
| 3.1.2 缺氧HPAEC miRNA表达谱的绘制 | 第37-39页 |
| 3.2 缺氧HPAEC差异表达miRNA的靶基因预测和KEGG分析 | 第39-40页 |
| 3.3 HPAEC核miRNA的筛选 | 第40-43页 |
| 3.4 HPAEC核miRNA的功能研究 | 第43-46页 |
| 3.4.1 HPAEC核miRNA对HPAEC增殖的影响 | 第43页 |
| 3.4.2 HPAEC核miRNA对HPAEC迁移的影响 | 第43-45页 |
| 3.4.3 HPAEC核miRNA对HPAEC血管生成的影响 | 第45-46页 |
| 3.5 miR-92b-5p在MCT诱导的PAH大鼠肺动脉组织中表达下调 | 第46-47页 |
| 3.6 HPAEC核miRNA靶基因预测 | 第47-48页 |
| 3.7 缺氧HPAEC外泌体miRNA表达谱的绘制 | 第48-53页 |
| 3.7.1 缺氧HPAEC外泌体mi NA高通量测序 | 第48-51页 |
| 3.7.2 缺氧HPAEC外泌体miRNAqRT-PCR验证 | 第51-53页 |
| 第4章 讨论 | 第53-58页 |
| 第5章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第69页 |
