| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一部分 Dishevelled蛋白结构与功能的关系研究进展 | 第10-51页 |
| 1. Wnt信号通路 | 第10-11页 |
| 2. Dishevelled发现及主要结构 | 第11-13页 |
| 3. Dishevelled在Wnt信号通路中的作用 | 第13-21页 |
| 3.1 Dishevelled在经典Wnt信号通路中的作用 | 第13-15页 |
| 3.2 Dishevelled在非经典Wnt信号通路中的作用 | 第15-20页 |
| 3.2.1 Wnt/PCP信号 | 第15-18页 |
| 3.2.2 Wnt/Ca~(2+)信号 | 第18-20页 |
| 3.3 Dishevelled在受体内吞和降解中的功能 | 第20-21页 |
| 4. Dishevelled如何调控不同的Wnt信号通路 | 第21-37页 |
| 4.1 Dishevelled不同结构域的特异性选择 | 第22-24页 |
| 4.2 Dishevelled相互作用分子的特异性选择 | 第24-27页 |
| 4.3 Dishevelled的亚细胞定位 | 第27-29页 |
| 4.4 Dishevelled的细胞水平及小鼠模型上的功能冗余 | 第29-32页 |
| 4.5 Dishevelled蛋白的稳定性及其调控 | 第32-33页 |
| 4.6 Dishevelled的翻译后修饰作用 | 第33-37页 |
| 5. 结论与展望 | 第37-38页 |
| 6. 参考文献 | 第38-51页 |
| 第二部分 Dishevelled最后C末端介导的自我抑制在经典和非经典Wnt信号通路中发挥不同的作用 | 第51-85页 |
| 1. 前言 | 第51-53页 |
| 2. 结果 | 第53-78页 |
| 2.1 Dv1的C末端差异调节Wnt信号通路 | 第53-62页 |
| 2.1.1 Dv1的C末端在不同脊椎动物中高度保守 | 第53页 |
| 2.1.2 Dv1的C末端缺失降低经典Wnt/β-catenin信号的激活 | 第53-57页 |
| 2.1.3 Dv1的C末端缺失增强非经典Wnt/PCP信号的激活 | 第57-62页 |
| 2.2 Dv1的自我抑制负调节Wnt信号通路 | 第62-74页 |
| 2.2.1 Dv1最后C末端和PDZ结构域的互作调节自身构象变化 | 第62-64页 |
| 2.2.2 Dv1最后C末端与PDZ结构域的差异结合降低经典Wnt/β-catenin信号的激活 | 第64-67页 |
| 2.2.3 干扰Dv1最后C末端与PDZ结构域的结合增强非经典Wnt/PCP信号的激活 | 第67-69页 |
| 2.2.4 C末端融合的Dv1蛋白与野生型Dv1在Wnt信号活性中的表现不同 | 第69-72页 |
| 2.2.5 Dv1的自我抑制调节其与Wnt共受体LRP6在Wnt/β-catenin信号中体内的功能互作 | 第72-74页 |
| 2.3 最后C末端结构影响Dv1在Wnt/PCP信号中的活性 | 第74-76页 |
| 2.4 干扰C末端与PDZ结构域的结合增强Frizzled受体对Dv1的膜募集 | 第76-78页 |
| 3. 讨论 | 第78-81页 |
| 4. 参考文献 | 第81-85页 |
| 第三部分 材料和方法 | 第85-106页 |
| 1. 实验材料 | 第85-86页 |
| 1.1 哺乳动物细胞——HEK293细胞 | 第85页 |
| 1.2 实验动物——斑马鱼和爪蛙 | 第85-86页 |
| 2. 质粒构建及扩增 | 第86-88页 |
| 2.1 本论文用到的质粒名称及构建 | 第86页 |
| 2.2 质粒转化感受态细胞 | 第86-87页 |
| 2.3 质粒提取 | 第87-88页 |
| 3. mRNA的体外合成和纯化 | 第88-92页 |
| 3.1 单酶切线性化质粒 | 第88页 |
| 3.2 DNA纯化 | 第88-89页 |
| 3.3 体外合成mRNA | 第89-90页 |
| 3.4 RNA纯化 | 第90-92页 |
| 4. PDZi融合蛋白的表达和纯化 | 第92页 |
| 5. 动态光散射(DLS) | 第92-93页 |
| 6. 哺乳动物细胞的相关技术 | 第93-94页 |
| 6.1 质粒转染细胞 | 第93页 |
| 6.2 哺乳动物细胞蛋白的提取 | 第93-94页 |
| 7. 胚胎相关技术 | 第94-98页 |
| 7.1 斑马鱼胚胎的显微注射 | 第94-95页 |
| 7.2 爪蛙胚胎操作技术 | 第95页 |
| 7.3 斑马鱼胚胎的整体免疫荧光 | 第95-96页 |
| 7.4 斑马鱼胚胎蛋白的提取 | 第96-97页 |
| 7.5 斑马鱼胚胎的整体原位杂交 | 第97-98页 |
| 7.6 斑马鱼胚胎脊索细胞的激光共聚焦显微镜观察 | 第98页 |
| 8. 蛋白免疫印迹技术 | 第98-100页 |
| 9. 双荧光素酶报告基因检测技术 | 第100-101页 |
| 10. 相关试剂及配方 | 第101-104页 |
| 10.1 用于免疫荧光的试剂 | 第101页 |
| 10.2 用于免疫印迹的试剂 | 第101-103页 |
| 10.3 用于胚胎原位杂交的试剂 | 第103-104页 |
| 11. 参考文献 | 第104-106页 |
| 攻读学位期间完成的工作 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 学术论文评阅及答辩情况表 | 第108页 |
