| 摘要 | 第5-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 缩略词表 | 第17-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-29页 |
| 1.1 病原学 | 第19页 |
| 1.2 病毒的基因组结构 | 第19-21页 |
| 1.3 基因遗传与变异 | 第21-22页 |
| 1.4 流行病学 | 第22-23页 |
| 1.5 致病机理 | 第23-24页 |
| 1.6 PRRSV的诊断技术 | 第24-26页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 1.8 技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 PRRSV美洲型经典株、变异株和TJM-F92疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 | 第29-46页 |
| 2.1 材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 病毒 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第30页 |
| 2.2 方法 | 第30-36页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第30-31页 |
| 2.2.2 重组质粒标准品的构建 | 第31-34页 |
| 2.2.3 多重PCR条件的优化 | 第34-35页 |
| 2.2.4 敏感性试验 | 第35页 |
| 2.2.5 重复性试验 | 第35-36页 |
| 2.2.6 特异性试验 | 第36页 |
| 2.2.7 临床应用 | 第36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-43页 |
| 2.3.1 重组质粒的鉴定结果 | 第36-37页 |
| 2.3.2 多重RT-PCR的建立 | 第37-40页 |
| 2.3.3 敏感性试验 | 第40-41页 |
| 2.3.4 重复性试验 | 第41-42页 |
| 2.3.5 特异性分析 | 第42页 |
| 2.3.6 最佳反应条件的确定 | 第42-43页 |
| 2.3.7 临床样品检测 | 第43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-46页 |
| 第三章 2014-2016年广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2和ORF5基因的遗传多样性分析 | 第46-63页 |
| 3.1 材料 | 第47页 |
| 3.1.1 病料采集 | 第47页 |
| 3.1.2 试剂及耗材 | 第47页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第47页 |
| 3.1.4 分子生物学软件 | 第47页 |
| 3.2 方法 | 第47-51页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第47-48页 |
| 3.2.2 病料处理 | 第48页 |
| 3.2.3 病毒RNA的提取 | 第48页 |
| 3.2.4 PRRSV RT-PCR的检测 | 第48-49页 |
| 3.2.5 Nsp2及ORF5全长的扩增及测序 | 第49-50页 |
| 3.2.6 序列比对分析 | 第50-51页 |
| 3.3 结果 | 第51-61页 |
| 3.3.1 临床病料的RT-PCR检测 | 第51页 |
| 3.3.2 Nsp2和ORF5基因序列测定 | 第51-53页 |
| 3.3.3 Nsp2基因的序列分析 | 第53-56页 |
| 3.3.4 ORF5基因序列分析 | 第56-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 PRRSV野毒感染猪群免疫接种弱毒活疫苗的效果分析 | 第63-73页 |
| 4.1 材料 | 第63-64页 |
| 4.1.1 主要仪器设备 | 第63-64页 |
| 4.1.2 主要试剂及耗材 | 第64页 |
| 4.1.3 统计软件 | 第64页 |
| 4.1.4 猪场的选定 | 第64页 |
| 4.2 方法 | 第64-66页 |
| 4.2.1 血清样品的采集 | 第64-65页 |
| 4.2.2 抗体检测 | 第65页 |
| 4.2.3 处理样品中病毒RNA的提取 | 第65页 |
| 4.2.4 PRRSV RT-PCR的检测 | 第65页 |
| 4.2.5 数据分析 | 第65-66页 |
| 4.3 结果与分析 | 第66-71页 |
| 4.3.1 免疫接种前母猪感染情况 | 第66页 |
| 4.3.2 仔猪免疫接种后抗体消长情况 | 第66-67页 |
| 4.3.3 两种ELISA试剂盒检测抗体阳性率比较 | 第67-68页 |
| 4.3.4 病原检测结果 | 第68-70页 |
| 4.3.5 两种ELISA试剂盒一致性及相关性分析 | 第70-71页 |
| 4.4 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 高水平母源抗体仔猪免疫接种PRRSV弱毒活疫苗的效果分析 | 第73-82页 |
| 5.1 材料 | 第73-74页 |
| 5.1.1 主要仪器设备 | 第73-74页 |
| 5.1.2 主要试剂及耗材 | 第74页 |
| 5.1.3 统计软件 | 第74页 |
| 5.1.4 猪场的选定 | 第74页 |
| 5.2 方法 | 第74-75页 |
| 5.2.1 血清样品的采集 | 第74页 |
| 5.2.2 抗体检测 | 第74页 |
| 5.2.3 处理样品中病毒RNA的提取 | 第74-75页 |
| 5.2.4 PRRSV RT-PCR的检测 | 第75页 |
| 5.2.5 数据分析 | 第75页 |
| 5.3 结果与分析 | 第75-79页 |
| 5.3.1 免疫接种前母猪感染情况 | 第75页 |
| 5.3.2 病原检测结果 | 第75-77页 |
| 5.3.3 抗体消长情况 | 第77页 |
| 5.3.4 两种ELISA试剂盒检测抗体阳性率比较 | 第77-78页 |
| 5.3.5 两种ELISA试剂盒一致性及相关性分析 | 第78-79页 |
| 5.4 讨论 | 第79-82页 |
| 第六章 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-94页 |
| 附录一 | 第94-95页 |
| 附录二 | 第95-96页 |
| 附录三 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文情况 | 第98页 |
