| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1 生长素与生长素受体 | 第12-15页 |
| 1.1 TIR1 | 第13页 |
| 1.2 ABP1 | 第13-15页 |
| 2 植物小分子G蛋白ROP | 第15-16页 |
| 2.1 ROP蛋白的结构与分类 | 第15-16页 |
| 2.2 ROP蛋白的功能和信号转导途径 | 第16页 |
| 3 植物细胞的膜泡运输 | 第16-18页 |
| 3.1 参与膜泡运输的蛋白家族 | 第17页 |
| 3.2 ABP1及ROP2与细胞膜泡运输 | 第17页 |
| 3.3 分泌载体膜蛋白SCAMP2 | 第17-18页 |
| 4 SNARE蛋白 | 第18-21页 |
| 4.1 SNARE的结构和分类 | 第18-19页 |
| 4.2 SNARE蛋白复合体和信号转导途径 | 第19-20页 |
| 4.3 SNARE蛋白的生理功能 | 第20页 |
| 4.4 SYP71蛋白 | 第20-21页 |
| 5 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 SYP71对生长素响应的膜泡运输调控 | 第22-43页 |
| 1 SYP71基因cDNA的克隆及表达载体的构建 | 第22-32页 |
| 1.1 材料 | 第22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-29页 |
| 1.2.1 Trizol法提取野生型拟南芥总RNA | 第22-23页 |
| 1.2.2 RT-PCR | 第23页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第23页 |
| 1.2.4 AtSYP71基因的克隆 | 第23-26页 |
| 1.2.5 pWM101-AtSYP71表达载体构建 | 第26-29页 |
| 1.3 结果与分析 | 第29-32页 |
| 1.3.1 拟南芥的总RNA提取 | 第29页 |
| 1.3.2 AtSYP71基因的扩增及重组转化菌PCR检测 | 第29-30页 |
| 1.3.3 AtSYP71基因测序结果比对分析 | 第30-31页 |
| 1.3.4 表达载体菌落PCR检测 | 第31-32页 |
| 1.3.5 表达载体双酶切检测 | 第32页 |
| 2 烟草BY-2细胞转化 | 第32-41页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.2.1 根癌农杆菌LBA4404的感受态制备及转化 | 第33页 |
| 2.2.2 农杆菌的菌落PCR检测 | 第33页 |
| 2.2.3 烟草BY-2悬浮细胞系的培养 | 第33页 |
| 2.2.4 烟草BY-2悬浮细胞系的转化筛选及分子检测 | 第33-34页 |
| 2.2.5 转基因BY-2细胞的显微观察 | 第34-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-41页 |
| 2.3.1 转化农杆菌菌落PCR检测 | 第35页 |
| 2.3.2 转化细胞的抗性筛选 | 第35页 |
| 2.3.3 转化BY2细胞的分子检测 | 第35-37页 |
| 2.3.4 SYP71转化BY2细胞的处理观察 | 第37-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 ROP2对烟草BY-2细胞膜泡外排运输的影响 | 第43-50页 |
| 1 材料与试剂 | 第43-44页 |
| 1.1 植物材料 | 第43页 |
| 1.2 试剂及仪器 | 第43页 |
| 1.3 培养基及溶液配方 | 第43-44页 |
| 2 实验方法 | 第44页 |
| 2.1 烟草BY-2悬浮细胞系的培养 | 第44页 |
| 2.2 基因转化的BY-2细胞系的处理及显微观察 | 第44页 |
| 3 转基因BY-2细胞系的处理和观察结果 | 第44-47页 |
| 3.1 ROP2过表达(OX-ROP2),组成激活型表达(CA-rop2)及显性抑制型表达(DN-rop2)的膜泡运输 | 第44-45页 |
| 3.2 ABP1对ROP2调节生长素响应的膜泡运输的影响 | 第45-46页 |
| 3.3 生长素快速响应膜泡运输观察 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 第四章 结果与结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
