| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-19页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 受体亲和色谱简介 | 第12-13页 |
| 1.3 细胞膜亲和色谱简介 | 第13页 |
| 1.4 研究对象简介 | 第13-17页 |
| 1.4.1 血小板及P2Y_(12)受体简介 | 第13-16页 |
| 1.4.2 杆状病毒表达系统简介 | 第16-17页 |
| 1.5 本论文主要内容以及研究意义 | 第17-19页 |
| 第二章 血小板细胞膜色谱模型的构建 | 第19-27页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2.2 试剂与试药 | 第19-20页 |
| 2.2.3 实验用试剂与试药的配制 | 第20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.3.1 血小板及其细胞膜的制备 | 第20-22页 |
| 2.3.2 色谱固定相硅胶的活化 | 第22页 |
| 2.3.3 血小板细胞膜色谱固定相制备 | 第22页 |
| 2.3.4 空白硅胶柱和血小板细胞膜色谱柱制备 | 第22-23页 |
| 2.3.5 工具药在血小板CMC上的保留特性考察 | 第23页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第23-25页 |
| 2.4.1 血小板细胞膜破碎方法的考察 | 第23-24页 |
| 2.4.2 硅胶载体与膜蛋白含量比例的条件优化 | 第24-25页 |
| 2.4.3 工具药在血小板CMC上的保留特性 | 第25页 |
| 2.5 本章小结 | 第25-27页 |
| 第三章 血小板细胞膜色谱模型的表征及应用 | 第27-39页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 实验材料 | 第27-28页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第27-28页 |
| 3.2.2 实验试剂与试药 | 第28页 |
| 3.3 血小板细胞膜色谱系统的表征 | 第28-30页 |
| 3.3.1 供试液制备 | 第28-29页 |
| 3.3.2 CMSP的扫描电镜及表面能谱分析 | 第29页 |
| 3.3.3 流动相条件的考察 | 第29-30页 |
| 3.3.4 血小板CMC模型评价 | 第30页 |
| 3.4 血小板细胞膜色谱系统应用 | 第30页 |
| 3.4.1 丹参提取液在血小板CMC上保留特性的考察 | 第30页 |
| 3.4.2 HPLC-Q-TOF-MS/MS鉴别丹参提取液在血小板CMC上的保留成分 | 第30页 |
| 3.5 实验结果与讨论 | 第30-38页 |
| 3.5.1 CMSP的扫描电镜分析结果 | 第30-31页 |
| 3.5.2 CMSP的表面能谱分析结果 | 第31-32页 |
| 3.5.3 流动相条件的考察 | 第32-33页 |
| 3.5.4 血小板CMC系统专属性考察 | 第33-34页 |
| 3.5.5 血小板CMC模型的应用 | 第34-38页 |
| 3.6 本章小结 | 第38-39页 |
| 第四章 利用杆状病毒表达系统表达血小板膜蛋白P2Y_(12)受体 | 第39-58页 |
| 4.1 引言 | 第39-40页 |
| 4.2 实验材料 | 第40-41页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第40页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第40-41页 |
| 4.3 实验方法 | 第41-51页 |
| 4.3.1 重组P2Y_(12)R的克隆信息 | 第41-42页 |
| 4.3.2 Sf9昆虫细胞培养 | 第42-43页 |
| 4.3.3 生产重组杆状病毒储备液 | 第43页 |
| 4.3.4 扩增杆状病毒储液 | 第43-44页 |
| 4.3.5 空斑实验测定病毒液效价 | 第44-45页 |
| 4.3.6 中性红染色分析病毒空斑实验 | 第45-46页 |
| 4.3.7 病毒空斑纯化 | 第46页 |
| 4.3.8 重组P2Y_(12)R的表达与检测 | 第46-50页 |
| 4.3.9 重组P2Y_(12)R的纯化 | 第50-51页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第51-57页 |
| 4.4.1 细胞生长状态考察 | 第51-52页 |
| 4.4.2 病毒储备液感染不同的时间对细胞状态影响 | 第52-53页 |
| 4.4.3 空斑实验结果 | 第53页 |
| 4.4.4 重组蛋白大量表达条件的优化 | 第53-54页 |
| 4.4.5 Western Blot分析检测目的蛋白表达 | 第54-55页 |
| 4.4.6 重组蛋白纯化实验 | 第55-57页 |
| 4.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 总结与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
