缩写词 | 第1-13页 |
摘要 | 第13-18页 |
Abstract | 第18-25页 |
第一章 引言 | 第25-44页 |
1 植物糖代谢的分子生物学研究进展 | 第26-34页 |
·植物淀粉代谢的分子生物学研究进展 | 第26-30页 |
·淀粉的合成途径及其关键酶 | 第27-29页 |
·淀粉的分解途径及其关键酶 | 第29-30页 |
·植物蔗糖代谢的分子生物学研究进展 | 第30-34页 |
·蔗糖的合成途径及其关键酶 | 第31-32页 |
·蔗糖的分解途径及其关键酶 | 第32-34页 |
2 植物山梨醇代谢的分子生物学研究进展 | 第34-35页 |
3 低温胁迫下植物糖代谢的分子生物学研究进展 | 第35-38页 |
·低温胁迫下植物的淀粉代谢及其关键酶 | 第35-36页 |
·低温胁迫下植物的蔗糖代谢及其关键酶 | 第36-38页 |
4 香蕉生物技术研究进展 | 第38-42页 |
·香蕉细胞工程研究 | 第38-39页 |
·香蕉悬浮细胞培养 | 第38-39页 |
·香蕉原生质体培养 | 第39页 |
·香蕉转基因研究 | 第39-40页 |
·香蕉分子生物学研究 | 第40-42页 |
·抗寒性相关基因 | 第40-41页 |
·抗病性相关基因 | 第41页 |
·其它抗逆性相关基因 | 第41-42页 |
·果实成熟相关基因 | 第42页 |
5 本研究的意义及主要内容 | 第42-44页 |
·本研究的意义 | 第42-43页 |
·本研究的主要内容 | 第43-44页 |
第二章 香蕉叶片糖代谢若干关键酶基因的克隆 | 第44-97页 |
第一节 香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ 基因 cDNA 全长的克隆 | 第44-58页 |
1 材料与方法 | 第45-48页 |
·材料 | 第45页 |
·方法 | 第45-48页 |
·总 RNA 提取以及 cDNA 第一链的合成 | 第45页 |
·引物的设计合成及目的片段的 PCR 扩增 | 第45-47页 |
·目的片段 PCR 扩增的体系和程序 | 第47-48页 |
·目的片段的回收、克隆和测序 | 第48页 |
·序列分析 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-57页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ cDNA 全长序列的获得 | 第48-52页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ cDNA 保守区序列的克隆 | 第48页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ cDNA 3' 末端序列的克隆 | 第48-50页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ cDNA 5' 末端序列的克隆 | 第50页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ cDNA 全长序列的验证 | 第50-52页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ 的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第52-57页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第52-54页 |
·香蕉叶片 SSⅢ 的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第54-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ 基因 cDNA 全长获得的关键因素 | 第57-58页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ 基因的 3' UTR 可变聚腺苷酸化 | 第58页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ 基因克隆的意义 | 第58页 |
第二节 香蕉叶片 AMY 和 BMY 基因 cDNA 全长的克隆 | 第58-68页 |
1 材料与方法 | 第59-60页 |
·材料 | 第59页 |
·方法 | 第59-60页 |
·总 RNA 提取以及 cDNA 第一链的合成 | 第59页 |
·引物的设计合成及目的片段的 PCR 扩增 | 第59页 |
·目的片段 PCR 扩增的体系和程序 | 第59页 |
·目的片段的回收、克隆和测序 | 第59页 |
·序列分析 | 第59-60页 |
2 结果与分析 | 第60-67页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 全长序列的获得 | 第60-64页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY cDNA 保守区序列的克隆 | 第60-61页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY cDNA 3' 末端序列的克隆 | 第61-63页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY cDNA 5' 末端序列的克隆 | 第63-64页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY cDNA 全长序列的验证 | 第64页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第64-67页 |
3 讨论 | 第67-68页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 基因 cDNA 全长的获得的关键因素 | 第67页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 基因克隆的意义 | 第67-68页 |
第三节 香蕉叶片 SPS 和 SuSy 基因 cDNA 全长的克隆 | 第68-79页 |
1 材料与方法 | 第68-70页 |
·材料 | 第68-69页 |
·方法 | 第69-70页 |
·总 RNA 提取以及 cDNA 第一链的合成 | 第69-70页 |
·引物的设计合成及目的片段的 PCR 扩增 | 第70页 |
·目的片段 PCR 扩增的体系和程序 | 第70页 |
·目的片段的回收、克隆和测序 | 第70页 |
·序列分析 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-78页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 全长序列的获得 | 第70-72页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第72-78页 |
3 讨论 | 第78-79页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 基因 cDNA 全长的获得的关键因素 | 第78页 |
·在香蕉叶片 SPS 和 SuSy 基因 cDNA 全长序列的基础上值得进一步开展研究的方面 | 第78-79页 |
第四节 香蕉叶片 Inv 基因家族 cDNA 全长的克隆 | 第79-97页 |
1 材料与方法 | 第79-82页 |
·材料 | 第79-82页 |
·方法 | 第82页 |
·总 RNA 提取以及 cDNA 第一链的合成 | 第82页 |
·引物的设计合成及目的片段的 PCR 扩增 | 第82页 |
·目的片段 PCR 扩增的体系和程序 | 第82页 |
·目的片段的回收、克隆和测序 | 第82页 |
·序列分析 | 第82页 |
2 结果与分析 | 第82-95页 |
·香蕉叶片 Inv 基因家族不同成员 cDNA 全长序列的获得 | 第82-84页 |
·香蕉叶片 Inv-V、Inv-CW 和 Inv-N 基因核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第84-95页 |
·香蕉叶片 Inv-V 基因的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第84-86页 |
·香蕉叶片 Inv-CW 亚家族基因的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第86-90页 |
·香蕉叶片 Inv-N 亚家族基因的核酸序列及其推导的氨基酸序列 | 第90-95页 |
3 讨论 | 第95-97页 |
·香蕉叶片 Inv 基因家族不同成员 cDNA 全长获得的关键因素 | 第95页 |
·香蕉叶片 Inv 基因家族克隆的意义 | 第95-97页 |
第三章 香蕉叶片糖代谢若干关键酶基因的生物信息学分析 | 第97-153页 |
第一节 香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ基因的生物信息学分析 | 第97-109页 |
1 材料与方法 | 第97-98页 |
·材料 | 第97页 |
·方法 | 第97-98页 |
2 结果与分析 | 第98-108页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ蛋白质基本理化性质的预测与分析 | 第98页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ蛋白质细胞/亚细胞定位的预测与分析 | 第98-99页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ氨基酸序列保守结构域的预测与分析 | 第99页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ蛋白质二级结构的预测与分析 | 第99-101页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ蛋白质卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第101-102页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ蛋白质三维结构的预测与分析 | 第102-103页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ蛋白质磷酸化位点的预测与分析 | 第103-104页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ蛋白质功能位点的预测与分析 | 第104-105页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ和 SSⅢ氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第105-108页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第105-106页 |
·香蕉叶片 SSⅢ氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第106-108页 |
3 讨论 | 第108-109页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ与 SSⅢ以及其它类型 SSs 间的进化关系密切 | 第108页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ与 SSⅢ在淀粉合成中可能的作用机制 | 第108-109页 |
第二节 香蕉叶片 AMY 和 BMY 基因的生物信息学分析 | 第109-120页 |
1 材料与方法 | 第109页 |
·材料 | 第109页 |
·方法 | 第109页 |
2 结果与分析 | 第109-119页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 基本理化性质的预测与分析 | 第109-110页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 蛋白质细胞/亚细胞定位的预测与分析 | 第110页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 氨基酸序列保守结构域的预测与分析 | 第110-111页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 蛋白质二级结构的预测与分析 | 第111-112页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 蛋白质卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第112-113页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 蛋白质三维结构的预测与分析 | 第113-114页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 蛋白质磷酸化位点的预测与分析 | 第114-115页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 蛋白质功能位点的预测与分析 | 第115-116页 |
·香蕉叶片 AMY 和 BMY 氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第116-119页 |
·香蕉叶片 AMY 氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第116-117页 |
·香蕉叶片 BMY 氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第117-119页 |
3 讨论 | 第119-120页 |
·香蕉叶片 AMY 基因在淀粉水解中可能的作用机制 | 第119页 |
·香蕉叶片 BMY 基因在淀粉水解中可能的作用机制 | 第119-120页 |
第三节 香蕉叶片 SPS 和 SuSy 基因的生物信息学分析 | 第120-131页 |
1 材料与方法 | 第120页 |
·材料 | 第120页 |
·方法 | 第120页 |
2 结果与分析 | 第120-130页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 基本理化性质的预测与分析 | 第120-121页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 蛋白质细胞/亚细胞定位的预测与分析 | 第121页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 氨基酸序列保守结构域的预测与分析 | 第121页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 蛋白质二级结构的预测与分析 | 第121-123页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 蛋白质卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第123-124页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 蛋白质三维结构的预测与分析 | 第124-125页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 蛋白质磷酸化位点的预测与分析 | 第125-126页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 蛋白质功能位点的预测与分析 | 第126-127页 |
·香蕉叶片 SPS 和 SuSy 氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第127-130页 |
·香蕉叶片 SPS 氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第127-128页 |
·香蕉叶片 SuSy 氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第128-130页 |
3 讨论 | 第130-131页 |
·香蕉叶片 SPS 基因在蔗糖代谢中可能的作用机制 | 第130页 |
·香蕉叶片 SuSy 基因在蔗糖代谢中可能的作用机制 | 第130-131页 |
第四节 香蕉叶片 Inv 基因家族的生物信息学分析 | 第131-153页 |
1 材料与方法 | 第132页 |
·材料 | 第132页 |
·方法 | 第132页 |
2 结果与分析 | 第132-150页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员基本理化性质的预测与分析 | 第132-133页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员细胞/亚细胞定位的预测与分析 | 第133-134页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员氨基酸序列保守结构域的预测与分析 | 第134-135页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员蛋白质二级结构的预测与分析 | 第135-138页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员蛋白质卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第138-139页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员蛋白质三维结构的预测与分析 | 第139-141页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员蛋白质磷酸化位点的预测与分析 | 第141-145页 |
·Inv-V 蛋白质磷酸化位点的预测与分析 | 第141-142页 |
·Inv-CW 蛋白亚家族成员蛋白质磷酸化位点的预测与分析 | 第142页 |
·Inv-N 蛋白亚家族成员蛋白质磷酸化位点的预测与分析 | 第142-145页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员蛋白质功能位点的预测与分析 | 第145-147页 |
·Inv-V 蛋白质功能位点的预测与分析 | 第145-146页 |
·Inv-CW 蛋白亚家族成员功能位点的预测与分析 | 第146页 |
·Inv-N 蛋白亚家族成员功能位点的预测与分析 | 第146-147页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员氨基酸序列的同源性和进化分析 | 第147-150页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员氨基酸序列的同源性分析 | 第147-148页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族不同成员氨基酸序列的进化分析 | 第148-150页 |
3 讨论 | 第150-153页 |
·香蕉叶片 Inv 基因家族在蔗糖代谢中可能的作用机制 | 第150-151页 |
·香蕉叶片 Inv 蛋白家族可能的蛋白翻译后修饰方式 | 第151-153页 |
第四章 低温胁迫下香蕉叶片糖代谢若干关键酶基因的定量表达分析 | 第153-167页 |
1 材料与方法 | 第153-155页 |
·材料 | 第153页 |
·低温胁迫处理 | 第153页 |
·方法 | 第153-155页 |
·总 RNA 提取及 cDNA 合成 | 第153-154页 |
·引物设计及 qPCR | 第154-155页 |
2 结果与分析 | 第155-162页 |
·香蕉叶片糖代谢关键酶基因 qPCR 扩增引物的扩增效率和特异性分析 | 第155-156页 |
·低温胁迫下香蕉叶片糖代谢关键酶基因的差异表达分析 | 第156-162页 |
·低温胁迫下香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ 基因的差异表达分析 | 第156-157页 |
·低温胁迫下香蕉叶片 AMY 和 BMY 基因的差异表达分析 | 第157-158页 |
·低温胁迫下香蕉叶片 SPS 和 SuSy 基因的差异表达分析 | 第158-159页 |
·不同低温胁迫处理下香蕉叶片 Inv 基因家族的差异表达分析 | 第159-162页 |
3 讨论 | 第162-167页 |
·香蕉叶片 GBSSⅠ 和 SSⅢ 基因的转录水平受温度调控 | 第162-163页 |
·低温胁迫下香蕉叶片 AMY 基因表达相对稳定 | 第163页 |
·低温胁迫下香蕉叶片叶绿体型 BMY 基因的显著上调表达 | 第163-164页 |
·香蕉叶片 SPS 基因对不同低温的应答机制可能不同 | 第164页 |
·低温胁迫下香蕉叶片 SuSy 基因迅速上调表达 | 第164-165页 |
·低温胁迫下香蕉叶片 Inv-V 基因的上调幅度最大 | 第165-166页 |
·低温胁迫下 Inv-CW1 和 Inv-CW2 基因的表达模式有较大差异 | 第166页 |
·Inv-N1 基因的上调表达可能在应答低温胁迫的机制中起着至关重要的作用 | 第166-167页 |
第五章 低温胁迫下香蕉叶片可溶性糖的变化分析 | 第167-173页 |
1 材料与方法 | 第167-168页 |
·材料和低温胁迫处理 | 第167页 |
·试剂 | 第167页 |
·方法 | 第167-168页 |
·可溶性糖的提取 | 第167页 |
·标准曲线的绘制 | 第167-168页 |
·样品测定 | 第168页 |
·结果计算 | 第168页 |
2 结果与分析 | 第168-169页 |
·可溶性糖提取标准曲线 | 第168-169页 |
·不同低温胁迫处理下香蕉可溶性糖含量的变化 | 第169页 |
3 讨论 | 第169-173页 |
·不同低温下香蕉叶片糖代谢关键酶基因的转录水平与可溶性糖水平之间的关系 | 第170-171页 |
·逐步降温处理中香蕉叶片糖代谢相关基因的转录水平与可溶性糖水平之间的关系 | 第171-172页 |
·香蕉叶片可溶性糖的变化应答低温胁迫的可能分子机制 | 第172-173页 |
第六章 根癌农杆菌介导的木奈S6PDH 基因转入香蕉研究 | 第173-184页 |
1 材料与方法 | 第173-176页 |
·材料 | 第173页 |
·培养基 | 第173页 |
·方法 | 第173-176页 |
·香蕉遗传转化受体系统的建立和优化 | 第173-175页 |
·菌体的活化 | 第175页 |
·受体材料与农杆菌共培养 | 第175-176页 |
·GUS 基因瞬时表达检测 | 第176页 |
·抗性芽的筛选、生根培养及移栽 | 第176页 |
·DNA 的提取和 PCR 检测 | 第176页 |
2 结果与分析 | 第176-182页 |
·香蕉遗传转化受体系统的优化 | 第176-180页 |
·椰汁对香蕉受体材料的影响 | 第176-179页 |
·受体材料抗生素适宜浓度的选择 | 第179-180页 |
·抗性芽的筛选、生根及抗性植株的移栽 | 第180页 |
·抗性芽的 PCR 检测 | 第180-182页 |
3 讨论 | 第182-184页 |
·采用横切薄片为受体材料对转化效率的影响 | 第182页 |
·培养条件的改善对转化率的影响 | 第182-183页 |
·转化条件的优化对提高遗传转化率的影响 | 第183-184页 |
第七章 小结 | 第184-190页 |
1 香蕉叶片若干糖代谢关键酶基因 cDNA 全长的克隆 | 第184-185页 |
2 香蕉叶片若干糖代谢关键酶基因的生物信息学分析 | 第185-186页 |
3 低温胁迫下香蕉叶片若干糖代谢关键酶基因的定量表达分析 | 第186-187页 |
4 低温胁迫下香蕉叶片可溶性糖的变化分析 | 第187-188页 |
5 根癌农杆菌介导的木奈S6PDH 基因转入香蕉研究 | 第188-190页 |
参考文献 | 第190-211页 |
附录 香蕉叶片糖代谢若干关键酶基因(cDNA)序列登录 GenBank | 第211-244页 |
攻读博士期间发表论文情况与参加学术会议情况 | 第244-245页 |
致谢 | 第245页 |