| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第8-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 李斯特菌病的流行病学特征 | 第12-14页 |
| ·病原学特性 | 第12-13页 |
| ·李斯特菌病的流行现状 | 第13-14页 |
| 2 LM的致病机理 | 第14-21页 |
| ·侵袭相关因子 | 第15-18页 |
| ·胞内感染相关因子 | 第18-19页 |
| ·毒力调控相关因子 | 第19-21页 |
| 第二章 实验内容 | 第21-48页 |
| 试验一 单增李斯特菌△InlAB、△InlABC突变株的构建 | 第21-35页 |
| 摘要 | 第21-22页 |
| 1 材料 | 第22-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-29页 |
| ·LM681△InlA、LM90△InlA、LM681△InlB突变株遗传稳定性的鉴定 | 第24页 |
| ·LM681△InlA、LM681△InlAB菌株基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·基因重叠PCR(SOE-PCR) | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·重组穿梭质粒pKSV7-△InlB、pKSV7-△InlC的构建 | 第26-27页 |
| ·LM90△InlA、LM681△InlA、LM681△InlAB感受态细胞的制备： | 第27-28页 |
| ·电转化 | 第28页 |
| ·同源重组 | 第28-29页 |
| ·缺失株遗传稳定性检测 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-33页 |
| ·LM681△InlA、LM681△InlB菌株缺失基因及遗传稳定性的鉴定 | 第29-30页 |
| ·InlB、InlC基因缺失片段的融合 | 第30-31页 |
| ·重组穿梭质粒pKSV7-△InlB、p KSV-△InlC的双酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·LM681△InlAB、LM90△InlAB、LM681△InlABC突变株的筛选及遗传稳定性鉴定 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 试验二 InlA、InlB、InlC基因缺失对LM毒力的影响 | 第35-42页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| ·菌株和试验动物 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-37页 |
| ·LD50的测定 | 第36页 |
| ·小鼠肝、脾、脑载菌量的测定 | 第36-37页 |
| ·溶血试验 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| ·小鼠LD50的测定 | 第37-38页 |
| ·小鼠肝脏、脾脏和脑的细菌计数 | 第38-39页 |
| ·溶血试验 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 试验三 InlA、InlB、InlC基因缺失对LM体外生物学特性的影响 | 第42-48页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| 1 材料 | 第43页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-44页 |
| ·耐酸耐碱生长试验 | 第43页 |
| ·生化特性 | 第43页 |
| ·药敏试验 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-46页 |
| ·耐酸耐碱生长曲线 | 第44-45页 |
| ·生化试验 | 第45-46页 |
| ·药敏试验 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 全文 结论 | 第48-49页 |
| 主要创新点 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57-59页 |
| 附件 | 第59页 |
