| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| ·卡拉胶的研究进展 | 第12-15页 |
| ·简介 | 第12页 |
| ·卡拉胶的结构组成与分类 | 第12-14页 |
| ·卡拉胶的性质 | 第14-15页 |
| ·物理特性 | 第14页 |
| ·溶解性能 | 第14页 |
| ·凝胶化性能 | 第14页 |
| ·酸稳定性 | 第14页 |
| ·粘度 | 第14页 |
| ·与蛋白质反应 | 第14-15页 |
| ·泌水性 | 第15页 |
| ·稳定性 | 第15页 |
| ·卡拉胶的应用 | 第15页 |
| ·卡拉胶寡糖的研究进展 | 第15-17页 |
| ·卡拉胶寡糖的制备方法 | 第15-16页 |
| ·化学法降解 | 第15-16页 |
| ·物理法降解 | 第16页 |
| ·酶法降解 | 第16页 |
| ·卡拉胶寡糖的生物活性 | 第16-17页 |
| ·抗肿瘤活性 | 第16页 |
| ·抗病毒活性 | 第16-17页 |
| ·抗氧化活性 | 第17页 |
| ·卡拉胶酶的研究进展 | 第17-20页 |
| ·卡拉胶酶的来源 | 第17页 |
| ·卡拉胶酶的分类 | 第17-18页 |
| ·卡拉胶酶活性的检测方法 | 第18页 |
| ·卡拉胶酶的研究进展 | 第18-20页 |
| ·卡拉胶酶的应用 | 第20页 |
| ·课题的研究内容 | 第20-21页 |
| 2 高温卡拉胶酶菌株的筛选及种属鉴定 | 第21-30页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·主要设备 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·培养基组成 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·富集培养 | 第22页 |
| ·菌株初筛 | 第22-23页 |
| ·菌株复筛 | 第23页 |
| ·粗酶液的制备 | 第23页 |
| ·DNS 法测酶活力[53] | 第23-25页 |
| ·标准曲线的制备 | 第24-25页 |
| ·卡拉胶酶降解菌 Lc50-1 的菌种鉴定 | 第25-26页 |
| ·形态学观察 | 第25页 |
| ·卡拉胶酶降解菌 Lc50-1 的 16S rDNA 序列分析 | 第25-26页 |
| ·实验结果与分析 | 第26-28页 |
| ·产卡拉胶酶菌株的初筛和复筛 | 第26页 |
| ·实验菌株的确定 | 第26-27页 |
| ·菌株 Lc 50-1 的种属鉴定 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 3 菌株 Lc 50-1 产酶发酵条件优化 | 第30-49页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·菌株来源 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·发酵培养制备粗酶 | 第31页 |
| ·酶活力的测定——DNS 法 | 第31页 |
| ·生长曲线和产酶曲线的测定 | 第31页 |
| ·单因素实验 | 第31-33页 |
| ·装液量对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·接种量对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第32页 |
| ·转速对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第32页 |
| ·培养温度对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第32页 |
| ·pH 对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第32页 |
| ·碳源的种类对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第32页 |
| ·碳源的含量对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第32页 |
| ·氮源的种类对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第32-33页 |
| ·氮源的含量对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第33页 |
| ·金属离子对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第33页 |
| ·金属离子的浓度对 Bacillus sp. Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第33页 |
| ·发酵条件的优化分析 | 第33页 |
| ·Plackett-Burman 实验 | 第33页 |
| ·响应面实验 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-47页 |
| ·生长曲线和酶活曲线 | 第33-34页 |
| ·单因素试验结果 | 第34-42页 |
| ·装液量对 Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·接种量对 Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第35页 |
| ·摇瓶转速对 Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第35-36页 |
| ·培养温度对 Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第36-37页 |
| ·初始 pH 对 Lc 50-1 生长和产酶的影响 | 第37页 |
| ·不同碳源及浓度对产酶的影响 | 第37-39页 |
| ·不同氮源及其浓度产酶的影响 | 第39-40页 |
| ·不同金属离子及其浓度对 Lc 50-1 生长及产酶的影响 | 第40-42页 |
| ·发酵条件的优化分析 | 第42-47页 |
| ·Plackett-Burman 实验 | 第42-43页 |
| ·响应面实验 | 第43-45页 |
| ·响应面分析及最佳发酵条件的确定 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 4 卡拉胶酶的分离纯化 | 第49-59页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·菌种与培养基 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-54页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第50-51页 |
| ·发酵液制备 | 第51页 |
| ·酶活测定 | 第51-52页 |
| ·卡拉胶酶的分离纯化 | 第52-53页 |
| ·硫酸铵分级盐析 | 第52页 |
| ·卡拉胶粗酶粉的制备 | 第52页 |
| ·Q-Sepharose Fast Flow 离子交换层析 | 第52页 |
| ·Sephacryl S-200HR 凝胶过滤层析 | 第52-53页 |
| ·卡拉胶酶纯度鉴定及分子量测定 | 第53-54页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第53页 |
| ·银染 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-57页 |
| ·硫酸铵盐析曲线的制备 | 第54页 |
| ·Q-Sepharose Fast.Flow 离子交换层析 | 第54-55页 |
| ·Sephacryl S-200HR 凝胶过滤层析 | 第55-56页 |
| ·卡拉胶酶纯度鉴定及其分子量 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 5 卡拉胶酶的酶学性质及降解产物分析 | 第59-67页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·卡拉胶酶的来源 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| ·方法 | 第60-61页 |
| ·卡拉胶酶酶学性质的研究 | 第60-61页 |
| ·卡拉胶酶的底物专一性研究 | 第60页 |
| ·卡拉胶酶的最适反应温度 | 第60页 |
| ·卡拉胶酶的温度稳定性 | 第60页 |
| ·卡拉胶酶的最适反应 pH | 第60-61页 |
| ·金属离子对卡拉胶酶活性的影响 | 第61页 |
| ·薄层层析法分析卡拉胶酶的降解产物 | 第61页 |
| ·毛细管点样 | 第61页 |
| ·层析缸展层 | 第61页 |
| ·显色剂显色 | 第61页 |
| ·实验结果与分析 | 第61-65页 |
| ·卡拉胶酶的底物专一性研究 | 第61-62页 |
| ·卡拉胶酶的最适反应温度 | 第62页 |
| ·卡拉胶酶的温度稳定性 | 第62-63页 |
| ·卡拉胶酶的最适反应 pH | 第63-64页 |
| ·金属离子对卡拉胶酶活性的影响 | 第64页 |
| ·薄层层析法分析卡拉胶酶的降解产物 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-69页 |
| 总结 | 第67页 |
| 课题展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第75-76页 |
