| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| ·ATP依赖的染色质重塑体 | 第11页 |
| ·CHD家族结构域 | 第11-17页 |
| ·CHD家族亚族分类及功能 | 第12-15页 |
| ·CHD2的功能 | 第15-16页 |
| ·神经元产生机制 | 第16-17页 |
| ·研究目的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 材料方法 | 第19-35页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·质粒 | 第19页 |
| ·实验试剂和仪器设备 | 第19-23页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·实验试剂、培养基的配制 | 第19-20页 |
| ·其他常用试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·主要抗体 | 第21页 |
| ·主要实验仪器和材料 | 第21-23页 |
| ·实验方法步骤 | 第23-35页 |
| ·质粒提取 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第23-24页 |
| ·转化 | 第24页 |
| ·293FT、N2A细胞复苏 | 第24-25页 |
| ·293FT、N2A细胞冻存 | 第25页 |
| ·293FT或N2A细胞培养 | 第25页 |
| ·E12.5的胚胎大脑皮层NSC细胞分离与培养 | 第25页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶回收 | 第25-26页 |
| ·Trizol法提取鼠脑组织总mRNA | 第26页 |
| ·CHD2基因目的片段的获得 | 第26-27页 |
| ·菌落PCR反应 | 第27-28页 |
| ·二步法RT-PCR操作 | 第28-29页 |
| ·载体双酶切反应 | 第29页 |
| ·反转录反应 | 第29-30页 |
| ·细胞免疫组化染色(immunohistochemical staining) | 第30页 |
| ·蛋白质印迹实验(western blot) | 第30-31页 |
| ·胚胎脑组织固定、脱水 | 第31页 |
| ·冰冻切片 | 第31-32页 |
| ·胚胎电转 | 第32页 |
| ·Brdu标记 | 第32页 |
| ·慢病毒的包装 | 第32-33页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第33页 |
| ·病毒感染细胞 | 第33页 |
| ·脑片Brdu染色 | 第33-34页 |
| ·shRNA质粒的构建 | 第34-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-47页 |
| ·构建CHD2敲降质粒 | 第35-36页 |
| ·构建CHD2过表达质粒 | 第36-37页 |
| ·包装病毒及病毒滴度的测定 | 第37-38页 |
| ·WESTERN BLOTTING检测CHD2-SHRNA的敲降效率 | 第38-39页 |
| ·RT-PCR检测CHD2过表达效率 | 第39-40页 |
| ·内源性CHD2在神经干细胞/前体细胞的表达 | 第40页 |
| ·体外敲降CHD2抑制神经干细胞增殖并促进神经元分化 | 第40-42页 |
| ·利用胚胎电转技术研究CHD2在胚胎脑发育中的作用 | 第42页 |
| ·体内敲降CHD2促进神经元分化 | 第42-43页 |
| ·体内敲降CHD2抑制神经干细胞/前体细胞的增殖 | 第43-44页 |
| ·体内过表达CHD2促进神经前体细胞增殖 | 第44-45页 |
| ·CHD2结合REST启动子区调控REST,促进神经前体细胞增殖 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-51页 |
| ·CHD2维持神经前体细胞的自我更新 | 第47页 |
| ·CHD2结合到REST的启动子上直接调控REST的转录 | 第47页 |
| ·尚需解决的问题 | 第47-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 硕士期间发表论文 | 第61页 |
