| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
| 第一章 转基因动物乳腺生物反应器的研究进展 | 第10-26页 |
| ·防御素的研究进展 | 第10-16页 |
| ·防御素的来源和分布 | 第10-11页 |
| ·防御素的分子结构特征 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽的作用机制 | 第12-13页 |
| ·防御素的生物学活性 | 第13-14页 |
| ·防御素的应用前景 | 第14-16页 |
| ·转基因动物的研究进展 | 第16-20页 |
| ·转基因动物的研究历史 | 第16-17页 |
| ·转基因技术 | 第17-19页 |
| ·转基因技术面临的问题 | 第19-20页 |
| ·乳腺生物反应器的研究进展 | 第20-26页 |
| ·转基因乳腺生物反应器的概述 | 第20页 |
| ·乳腺特异性表达载体调控元件的类型 | 第20-22页 |
| ·乳腺表达载体检验方法 | 第22-24页 |
| ·动物乳腺生物反应器存在的问题及展望 | 第24-26页 |
| 第二部分 试验研究 | 第26-65页 |
| 第一章 牦牛β-防御素 5 基因的克隆及序列分析 | 第26-35页 |
| ·材料与方法 | 第26-30页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·实验仪器 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-34页 |
| ·牦牛肺组织总 RNA 提取及检测 | 第30-31页 |
| ·牦牛 BNBD5 成熟肽基因 RT-PCR 扩增结果 | 第31页 |
| ·重组子的筛选及双酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·牦牛 BNBD5 成熟肽 cDNA 序列分析 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第二章 牦牛β-防御素 5 基因的原核表达及产物体外抗菌活性的鉴定 | 第35-46页 |
| ·材料与方法 | 第35-41页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·主要试剂的配制 | 第35-37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第41页 |
| ·IPTG 诱导不同时间牦牛β-防御素 5 的表达 | 第41-42页 |
| ·纯化蛋白 | 第42页 |
| ·重组蛋白浓度的测定结果 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白抑菌活性的鉴定 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第三章 牦牛β-防御素 5 基因真核表达载体的构建 | 第46-57页 |
| ·材料与方法 | 第46-53页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·实验仪器 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·CSN25' 端、CSN23' 端调控区及牦牛 BNBD5 ORF 的 PCR 扩增结果 | 第53页 |
| ·质粒 pEGFP-C1 和 pMD19-BNBD5 的双酶切结果 | 第53页 |
| ·质粒 pEGFP- BNBD5 和 pMD19-BC3 的双酶切结果 | 第53-54页 |
| ·质粒 pEGFP- BNBD5-BC3 和 pMD19-BC5 的双酶切结果 | 第54-55页 |
| ·质粒 pEGFP- BNBD5-BC3-BC5 的双酶切鉴定 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 牦牛β-防御素 5 基因转染牦牛乳腺上皮细胞及其在细胞中的表达 | 第57-64页 |
| ·材料与方法 | 第57-59页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-62页 |
| ·质粒的纯化 | 第59-60页 |
| ·牦牛乳腺上皮细胞的原代及传代培养 | 第60页 |
| ·抗性筛选结果 | 第60-61页 |
| ·细胞转染和筛选 | 第61页 |
| ·PCR 检测细胞转染的结果 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第五章 结论、创新点以及存在的问题 | 第64-65页 |
| 1 本论文的结论 | 第64页 |
| 2 本论文的创新点 | 第64页 |
| 3 本论文存在的不足之处 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
