| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-30页 |
| ·Vero细胞培养在疫苗生产中的应用 | 第11-18页 |
| ·哺乳动物细胞的发展 | 第11页 |
| ·疫苗概述 | 第11-14页 |
| ·Vero细胞在疫苗生产中的应用 | 第14-16页 |
| ·低血清培养基的开发研究 | 第16-18页 |
| ·生物反应器微载体大规模培养Vero细胞 | 第18-27页 |
| ·动物细胞大规模培养的发展 | 第18-20页 |
| ·生物反应器大规模培养方式的介绍 | 第20-22页 |
| ·分批式培养 | 第21页 |
| ·流加培养 | 第21页 |
| ·连续培养(continuous culture) | 第21-22页 |
| ·贴壁细胞的微载体培养 | 第22-23页 |
| ·生物反应器微载体大规模培养Vero细胞 | 第23-27页 |
| ·培养基的优化 | 第24页 |
| ·微载体培养系统优化 | 第24-25页 |
| ·放大工艺优化 | 第25-26页 |
| ·Vero细胞的基础代谢分析和参数检测控制 | 第26-27页 |
| ·溶瘤单纯性疱疹病毒和疫苗 | 第27-29页 |
| ·溶瘤单纯性疱疹病毒 | 第27-28页 |
| ·单纯性疱疹病毒的反应器生产 | 第28-29页 |
| ·本课题的研究目的、意义及内容 | 第29-30页 |
| 第二章 Vero细胞低血清培养基的开发 | 第30-39页 |
| ·前言 | 第30页 |
| ·实验材料、仪器和试剂 | 第30-33页 |
| ·材料、仪器和设备 | 第30-31页 |
| ·Vero细胞的复苏和传代培养 | 第31页 |
| ·Vero细胞无血清培养基的适应 | 第31页 |
| ·Vero细胞的无血清传代适应 | 第31页 |
| ·胰酶对Vero细胞传代的影响 | 第31页 |
| ·不同无血清培养基的比较优化 | 第31页 |
| ·低血清Vero细胞的适应和传代 | 第31-32页 |
| ·Vero低血清培养细胞冻存和复苏 | 第32页 |
| ·低血清培养细胞冻存 | 第32页 |
| ·低血清培养细胞复苏 | 第32页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第32页 |
| ·细胞密度、存活率及比生长速率的测定及计算 | 第32-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-38页 |
| ·Vero细胞在无血清培养基适应过程中,细胞形态、Cd与含血清、中的比较 | 第33-34页 |
| ·Vero细胞无血清培养基的筛选 | 第34页 |
| ·胰酶对Vero细胞传代的影响 | 第34-35页 |
| ·低血清培养基的选择 | 第35-36页 |
| ·替代物的选择 | 第36-37页 |
| ·Vero细胞在VD-LSM地血清培养基中的生长 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第三章 利用低血清培养基微载体转瓶及生物反应器培养VERO细胞 | 第39-50页 |
| ·前言 | 第39页 |
| ·实验材料和方法 | 第39-41页 |
| ·实验材料和仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·Cytodex 1微载体处理 | 第39页 |
| ·结晶紫计数方法 | 第39页 |
| ·代谢物分析 | 第39-40页 |
| ·Vero细胞的微载体转瓶培养 | 第40页 |
| ·生物反应器批培养方法 | 第40页 |
| ·生物反应器补料培养方法 | 第40页 |
| ·分析和计算方法 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-49页 |
| ·Vero细胞在VD-LSM培养基批培养中的生长 | 第41-42页 |
| ·Vero细胞在VD-LSM培养基批培养中的葡萄糖和乳酸代谢 | 第42-44页 |
| ·Vero细胞在VD-LSM培养基批培养中的氨代谢 | 第44-45页 |
| ·Vero细胞在VD-LSM培养基批培养中的氨基酸代谢 | 第45-47页 |
| ·Vero细胞的反应器微载体流加补料培养及换液培养 | 第47-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第四章 生物反应器微载体放大工艺 | 第50-59页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·实验材料和方法 | 第50-51页 |
| ·实验材料和设备 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·Vero细胞的微载体培养 | 第50页 |
| ·Vero细胞的球转球放大 | 第50-51页 |
| ·Vero细胞在新老微载体间的转移过程 | 第51页 |
| ·微载体的取样 | 第51页 |
| ·生物反应器的微载体在位消化转移放大方法 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-57页 |
| ·Vero细胞球到球转移过程的建桥分析 | 第51-52页 |
| ·Vero细胞球转球最佳转移时间的确定 | 第52-53页 |
| ·Vero细胞球转球转移过程中最佳间歇搅拌停留时间的确定 | 第53-55页 |
| ·Vero细胞球转球间歇式转移放大次数的确定 | 第55-57页 |
| ·生物反应球转球转移放大培养与在位消化转移放大的比较 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 第五章 VD-LSM低血清培养基生产单纯性疱疹病毒-Ⅱ的工艺优化 | 第59-70页 |
| ·前言 | 第59页 |
| ·实验材料和方法 | 第59-61页 |
| ·实验材料和设备 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-61页 |
| ·单纯性疱瘆病毒-II (HSV-II)在Vero细胞上培养 | 第59页 |
| ·Ⅱ型单纯性疱疹病毒病毒滴度的测定方法 | 第59-60页 |
| ·血清对Ⅱ型单纯性疱疹病毒吸附和增殖的影响分析 | 第60页 |
| ·血清含量对病毒增殖的影响 | 第60页 |
| ·BSA替代血清对病毒增殖的影响 | 第60-61页 |
| ·病毒感染复数MOI的确定 | 第61页 |
| ·病毒感染时间TOI及收毒时间的确定 | 第61页 |
| ·温度对病毒增殖的影响 | 第61页 |
| ·pH值对病毒的影响 | 第61页 |
| ·病毒的冻融和裂解 | 第61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-69页 |
| ·血清对病毒吸附及增殖的影响 | 第61-63页 |
| ·HSV-Ⅱ感染复数MOI对病毒增殖的影响 | 第63-64页 |
| ·温度对HSV-Ⅱ在Vero细胞上增殖的影响 | 第64-65页 |
| ·HSV-Ⅱ在Vero细胞上增殖最佳接毒时间及收毒时间的确定 | 第65-66页 |
| ·BSA替代血清 | 第66-67页 |
| ·pH对HSV-Ⅱ的影响 | 第67页 |
| ·5L生物反应器补料生产HSV-Ⅱ | 第67-68页 |
| ·病毒的冻融和裂解 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 第六章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
