| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-19页 |
| 1、植物耐盐基因的发掘与利用现状 | 第11-16页 |
| ·盐离子吸收和转运 | 第11-14页 |
| ·HKT基因 | 第11-12页 |
| ·NHX基因 | 第12页 |
| ·AHA基因 | 第12-13页 |
| ·H~+-PPase基因 | 第13-14页 |
| ·SOS基因 | 第14页 |
| ·其它离子转运蛋白基因 | 第14页 |
| ·控制渗透调节物质合成的基因 | 第14-15页 |
| ·耐盐性相关的蛋白激酶基因GSK | 第15页 |
| ·耐盐性相关的转录因子DREB | 第15-16页 |
| 2、本研究的目的和意义 | 第16-19页 |
| 第二部分 研究报告 | 第19-71页 |
| 1 材料和方法 | 第19-30页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·供试材料 | 第19页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第19页 |
| ·生化试剂 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-30页 |
| ·基因组DNA提取 | 第20页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第21-24页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第21-22页 |
| ·cDNA第一链浓度调整 | 第22-23页 |
| ·半定量RT-PCR表达分析 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第23-24页 |
| ·PCR产物的回收和克隆 | 第24-26页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第24页 |
| ·PCR回收产物的连接 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·热击转化实验 | 第25页 |
| ·阳性克隆的菌液PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·本研究生物信息学分析所用到的网站网址 | 第26页 |
| ·转基因受体材料准备 | 第26-27页 |
| ·培养基成份 | 第27页 |
| ·载体构建 | 第27-28页 |
| ·农杆菌转化烟草 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA转化转化农杆菌 | 第28-29页 |
| ·农杆菌侵染共培养 | 第29页 |
| ·抗性植株再生 | 第29页 |
| ·基因枪介导小麦基因转化 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第29页 |
| ·微弹制备 | 第29-30页 |
| ·轰击转化 | 第30页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-67页 |
| ·小麦耐盐相关EST的半定量表达分析 | 第30-34页 |
| ·百萨偃麦草HKT1基因的同源克隆与表达分析 | 第34-39页 |
| ·百萨偃麦草HKT1基因的同源克隆 | 第34-36页 |
| ·百萨偃麦草HKT1基因的表达分析 | 第36页 |
| ·百萨偃麦草中HKT1及其同源基因编码蛋白序列比较与进化分析 | 第36-38页 |
| ·HKT1基因在百萨偃麦草染色体上的定位 | 第38-39页 |
| ·百萨偃麦草GSK基因的同源克隆与表达分析 | 第39-43页 |
| ·百萨偃麦草GSK基因的同源克隆 | 第39-40页 |
| ·百萨偃麦草GSK基因的表达分析 | 第40-41页 |
| ·百萨偃麦草中GSK及其同源基因编码蛋白序列比较与进化分析 | 第41-43页 |
| ·百萨偃麦草中NHX1基因的同源克隆与表达分析 | 第43-47页 |
| ·百萨偃麦草中NHX1基因的同源克隆 | 第43-45页 |
| ·百萨偃麦草中NHX1基因的表达分析 | 第45页 |
| ·百萨偃麦草中NHX1及其同源基因编码蛋白序列比较 | 第45-47页 |
| ·百萨偃麦草中AHA基因的同源克隆与表达分析 | 第47-52页 |
| ·百萨偃麦草中AHA基因的同源克隆 | 第47-49页 |
| ·百萨偃麦草中AHA基因的表达分析 | 第49-50页 |
| ·百萨偃麦草中AHA及其同源基因编码蛋白序列比较与进化分析 | 第50-52页 |
| ·百萨偃麦草中矿H~+-Ppase基因的同源克隆与表达分析 | 第52-56页 |
| ·百萨偃麦草中矿H~+-Ppase基因的同源克隆 | 第52-54页 |
| ·百萨偃麦草中H~+-Ppase基因的表达分析 | 第54页 |
| ·百萨偃麦草中H~+-Ppase及其同源基因编码蛋白序列比较与进化分析 | 第54-56页 |
| ·百萨偃麦草中DREB1基因的同源克隆与表达分析 | 第56-59页 |
| ·百萨偃麦草中DREB1基因的同源克隆 | 第56-57页 |
| ·百萨偃麦草中DREB1基因的表达分析 | 第57-58页 |
| ·百萨偃麦草中DREB1及其同源基因编码蛋白序列比较与进化分析 | 第58-59页 |
| ·百萨偃麦草耐盐相关基因质粒载体的构建 | 第59-63页 |
| ·百萨偃麦草GSK基因质粒载体的构建 | 第59-61页 |
| ·转化及抗性植株的筛选和再生 | 第61-62页 |
| ·百萨偃麦草GSK转基因植株的分子鉴定 | 第62-63页 |
| ·百萨偃麦草HKT1基因质粒载体的构建和转化 | 第63-67页 |
| ·百萨偃麦草HKT1基因质粒载体的构建 | 第63-65页 |
| ·转化及抗性植株的筛选和再生 | 第65-66页 |
| ·百萨偃麦草HKT1转基因植株的分子鉴定 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-71页 |
| ·如何从百萨偃麦草中发掘耐盐相关基因 | 第67-68页 |
| ·百萨偃麦草耐盐相关基因的定位与表达特点 | 第68页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第68-71页 |
| 全文结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
