| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-30页 |
| ·共生固氮 | 第9-17页 |
| ·共生固氮的意义 | 第9-10页 |
| ·豆科植物中根瘤的形成过程 | 第10-12页 |
| ·豆科植物中的共生固氮信号转导途径 | 第12-17页 |
| ·结瘤因子受体NFR1和NFR5 | 第13-14页 |
| ·共生受体激酶SymRK | 第14-16页 |
| ·百脉根组氨酸激酶LHK1 | 第16-17页 |
| ·分裂泛素(Split-Ub)系统 | 第17-24页 |
| ·Split-Ub系统的意义 | 第17-19页 |
| ·Split-Ub系统的原理 | 第19-21页 |
| ·以RUra3p为报告蛋白的Split-Ub系统 | 第20-21页 |
| ·以转录因子为报告蛋白的Split-Ub系统 | 第21页 |
| ·Split-Ub系统的发展和应用 | 第21-24页 |
| ·分裂泛素cDNA文库酵母筛选系统 | 第21-22页 |
| ·分裂泛素酵母三杂交系统 | 第22-23页 |
| ·植物分裂泛素系统 | 第23-24页 |
| ·Gateway技术 | 第24-29页 |
| ·Gateway技术的原理和应用 | 第24-25页 |
| ·Gateway载体 | 第25-29页 |
| ·Gateway供体载体pDONR | 第25-26页 |
| ·Gateway入门载体pENTR | 第26-27页 |
| ·MultiSite Gateway载体 | 第27-29页 |
| ·研究目的 | 第29-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-36页 |
| ·材料 | 第30-34页 |
| ·本研究所用菌株和质粒 | 第30-32页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第32页 |
| ·引物 | 第32-34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第34页 |
| ·pEntry克隆的获得 | 第34-35页 |
| ·目的表达载体的获得 | 第35页 |
| ·酵母共转化 | 第35页 |
| ·共转化酵母生长分析 | 第35-36页 |
| 3 结果和分析 | 第36-49页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第36-42页 |
| ·pMet系列表达载体 | 第38-39页 |
| ·Myc-GWY-Nul系列表达载体 | 第39-40页 |
| ·Nul-GWY-Myc系列表达载体 | 第40-42页 |
| ·酵母表达载体共转化酵母JD53 | 第42-43页 |
| ·酵母生长和蛋白互作分析 | 第43-49页 |
| ·融合蛋白X-Cub-URA3和Y-Nub间相互作用的验证 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白X-Cub-URA3和Nub-Y间相互作用的验证 | 第45-46页 |
| ·跨膜蛋白间相互作用的探索 | 第46-49页 |
| 4 总结和讨论 | 第49-54页 |
| ·Gateway技术的优缺点 | 第49页 |
| ·Split-Ub双杂交系统 | 第49-52页 |
| ·Split-Ub酵母双杂交系统的适用性 | 第49-51页 |
| ·Split-Ub双杂交系统的优缺点 | 第51页 |
| ·降低假阳性和假阴性的策略 | 第51-52页 |
| ·Split-Ub系统在共生信号转导研究中的应用前景 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
