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基于凝胶电泳的Lysobacter sp.SNNU513胞外抗菌蛋白分离分析和质谱鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第1章 绪论第9-25页
   ·溶杆菌属(Lysobacter)的概述第9-11页
     ·溶杆菌属细菌对植物病原菌的抑制作用第10页
     ·产酶溶杆菌抗菌机制第10-11页
   ·分泌蛋白质组学概述第11-13页
   ·分泌蛋白质组学研究技术第13-22页
     ·双向电泳技术第13-19页
     ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(Native-PAGE)第19-21页
     ·质谱技术第21-22页
     ·生物信息学技术第22页
   ·本研究的目的和意义第22-25页
第2章 材料与方法第25-35页
   ·实验材料第25-26页
     ·实验仪器第25页
     ·实验试剂第25页
     ·菌种第25页
     ·常用溶液和培养基的配制第25-26页
   ·实验方法第26-35页
     ·细菌培养及胞外蛋白提取时间的确定第26-27页
     ·胞外分泌蛋白的抑菌试验第27页
     ·蛋白样品的制备第27页
     ·胞外分泌蛋白双向凝胶电泳方法的建立和优化第27-29页
     ·生物信息学预测胞外分泌蛋白的等电点和分子量第29-30页
     ·活性蛋白的非变性PAGE电泳分离与制备第30-31页
     ·基于2-DE的串联质谱技术鉴定活性蛋白第31-33页
     ·Shot-gun质谱技术鉴定活性蛋白第33-35页
第3章 结果与分析第35-53页
   ·胞外分泌蛋白提取时间的确定第35页
   ·胞外分泌蛋白的抑菌实验第35-36页
   ·胞外蛋白上样量的优化第36-37页
   ·胞外蛋白聚焦程序的优化第37-39页
   ·胞内蛋白和胞外蛋白图谱建立第39-40页
   ·胞外分泌蛋白等电点和分子量的分布规律第40-43页
   ·活性蛋白非变性PAGE电泳制备第43-44页
   ·基于2-DE的6号凝胶条带回收蛋白质的串联质谱鉴定分析第44-50页
     ·活性蛋白的2-DE第44-45页
     ·串联质谱鉴定分析第45-50页
   ·Shot-gun质谱技术鉴定分析7号凝胶条带回收的蛋白质第50-53页
第4章 讨论和结论第53-59页
   ·胞外分泌蛋白2-DE图谱的建立第53-56页
     ·样品的预处理第53页
     ·样品裂解液第53-54页
     ·蛋白上样量的选择第54-55页
     ·等电聚焦程序第55页
     ·胞外分泌蛋白等电点和分子量的分布范围第55-56页
   ·分泌蛋白活性组分的分离和质谱鉴定第56-59页
参考文献第59-71页
致谢第71-73页
攻读硕士学位期间科研成果第73页

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