| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一部分:p16过表达载体的构建 | 第14-25页 |
| 前言 | 第14页 |
| 1 材料与方法 | 第14-19页 |
| ·材料 | 第14-15页 |
| ·菌种与质粒 | 第14页 |
| ·细胞 | 第14页 |
| ·主要试剂及设备 | 第14-15页 |
| ·方法 | 第15-19页 |
| ·RNA提取 | 第15页 |
| ·PCR引物设计 | 第15-16页 |
| ·重组载体的构建 | 第16-19页 |
| 2 结果 | 第19-23页 |
| ·总RNA提取结果 | 第19-20页 |
| ·p16ORF电泳结果 | 第20页 |
| ·目的片段和质粒双酶切后电泳图谱 | 第20-21页 |
| ·重组质粒菌液PCR鉴定结果 | 第21-22页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定 | 第22页 |
| ·重组过表达质粒测序 | 第22-23页 |
| 3 讨论和小结 | 第23-25页 |
| 第二部分:P16基因高表达对细胞衰老的调控及机制研究 | 第25-40页 |
| 前言 | 第25-26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-33页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·方法 | 第28-33页 |
| ·脂质体转染 | 第28-29页 |
| ·流式细胞术检测转染效率 | 第29页 |
| ·CCK-8法检测p16对293细胞增殖的影响 | 第29页 |
| ·流式细胞术检测p16对293细胞周期的影响 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR检测p16和p21的表达 | 第30-31页 |
| ·各组中p16和p21蛋白的表达 | 第31-33页 |
| ·β-半乳糖苷酶染色 | 第33页 |
| 2 实验结果 | 第33-37页 |
| ·p16过表达载体转染293细胞 | 第33-34页 |
| ·p16高表达对293细胞增殖的影响 | 第34页 |
| ·p16高表达对293细胞周期的影响 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR检测转染前后p16,p21的表达 | 第35-36页 |
| ·Western bloting检测转染前后p16,p21的表达 | 第36页 |
| ·β-半乳糖苷酶染色 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 4 主要结论和进一步的研究设想 | 第39-40页 |
| ·本研究的主要结果和结论 | 第39页 |
| ·进一步研究设想 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 综述 | 第43-48页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 个人简历 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |