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DNA修复相关基因变异与肿瘤发病风险及分子机制研究

目录第1-7页
中文摘要第7-11页
ABSTRACT第11-15页
第一章 前言第15-22页
 参考文献第19-22页
第二章 hMSH2、hMSH6蛋白相互作用体系的初步探索及hMSH2错义突变的功能评估第22-66页
 1. 材料和方法第22-33页
   ·主要仪器及试剂第22-24页
   ·质粒小量提取第24页
   ·质粒转化第24-25页
   ·TBE-agarose电泳及DNA片段回收第25页
   ·DNA的酶切及连接第25页
   ·酵母转化第25-26页
   ·酵母质粒的提取第26页
   ·酵母双杂交转化子的营养缺陷平板分析第26页
   ·B-半乳糖苷酶活性分析(ONPG底物法)第26-27页
   ·重叠延伸PCR法定点诱变第27-29页
   ·293T细胞培养第29页
   ·细胞转染第29-30页
   ·细胞裂解及提蛋白第30页
   ·Western Blot第30-33页
 2. 实验结果第33-58页
   ·质粒pGADT7-hMSH2的构建第33-37页
   ·质粒pGBKT7-hMSH6的构建第37-43页
   ·pGADT7-hMSH2突变质粒的构建第43-46页
   ·含不同hMSH6结构域的重组pGBKT7质粒的构建第46-48页
   ·酵母双杂交分析第48-53页
   ·免疫共沉淀重组质粒pCMV-Myc-hMSH2和pCMV-HA-hMSH6的构建第53-56页
     ·质粒pCMV-Myc-hMSH2的构建第53-54页
     ·质粒pCMV-HA-hMSH6的构建第54页
     ·重组质粒pCMV-Myc-hMSH2和pCMV-HA-hMSH6的鉴定第54-56页
   ·Western Blot分析pCMV-Myc-hMSH2、pCMV-HA-hMSH6双转染细胞第56-58页
 3. 讨论第58-64页
 参考文献第64-66页
第三章 AluYb8MUTYH与乳腺癌及胃癌发病易感性关系研究第66-81页
 1. 材料和方法第66-70页
   ·研究对象第66-67页
   ·主要仪器和试剂第67页
   ·基因组DNA提取第67-68页
   ·AluYb8MUTYH突变筛查第68-69页
   ·统计学分析第69-70页
 2. 实验结果第70-75页
   ·AluYb8MUTYH突变的检出第70-71页
   ·乳腺癌及对照中检出AluYb8MUTYH突变分析第71-73页
   ·胃癌及对照中检出AluYb8MUTYH突变分析第73-75页
 3. 讨论第75-77页
 参考文献第77-81页
第四章 结论第81-82页
缩略表第82-84页
附录第84-94页
 文献综述:Alu RNA的生物学功能第85-93页
  参考文献第89-93页
 博士研究生期间发表的论文第93-94页
致谢第94-95页

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