目录 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
第一章 前言 | 第15-22页 |
参考文献 | 第19-22页 |
第二章 hMSH2、hMSH6蛋白相互作用体系的初步探索及hMSH2错义突变的功能评估 | 第22-66页 |
1. 材料和方法 | 第22-33页 |
·主要仪器及试剂 | 第22-24页 |
·质粒小量提取 | 第24页 |
·质粒转化 | 第24-25页 |
·TBE-agarose电泳及DNA片段回收 | 第25页 |
·DNA的酶切及连接 | 第25页 |
·酵母转化 | 第25-26页 |
·酵母质粒的提取 | 第26页 |
·酵母双杂交转化子的营养缺陷平板分析 | 第26页 |
·B-半乳糖苷酶活性分析(ONPG底物法) | 第26-27页 |
·重叠延伸PCR法定点诱变 | 第27-29页 |
·293T细胞培养 | 第29页 |
·细胞转染 | 第29-30页 |
·细胞裂解及提蛋白 | 第30页 |
·Western Blot | 第30-33页 |
2. 实验结果 | 第33-58页 |
·质粒pGADT7-hMSH2的构建 | 第33-37页 |
·质粒pGBKT7-hMSH6的构建 | 第37-43页 |
·pGADT7-hMSH2突变质粒的构建 | 第43-46页 |
·含不同hMSH6结构域的重组pGBKT7质粒的构建 | 第46-48页 |
·酵母双杂交分析 | 第48-53页 |
·免疫共沉淀重组质粒pCMV-Myc-hMSH2和pCMV-HA-hMSH6的构建 | 第53-56页 |
·质粒pCMV-Myc-hMSH2的构建 | 第53-54页 |
·质粒pCMV-HA-hMSH6的构建 | 第54页 |
·重组质粒pCMV-Myc-hMSH2和pCMV-HA-hMSH6的鉴定 | 第54-56页 |
·Western Blot分析pCMV-Myc-hMSH2、pCMV-HA-hMSH6双转染细胞 | 第56-58页 |
3. 讨论 | 第58-64页 |
参考文献 | 第64-66页 |
第三章 AluYb8MUTYH与乳腺癌及胃癌发病易感性关系研究 | 第66-81页 |
1. 材料和方法 | 第66-70页 |
·研究对象 | 第66-67页 |
·主要仪器和试剂 | 第67页 |
·基因组DNA提取 | 第67-68页 |
·AluYb8MUTYH突变筛查 | 第68-69页 |
·统计学分析 | 第69-70页 |
2. 实验结果 | 第70-75页 |
·AluYb8MUTYH突变的检出 | 第70-71页 |
·乳腺癌及对照中检出AluYb8MUTYH突变分析 | 第71-73页 |
·胃癌及对照中检出AluYb8MUTYH突变分析 | 第73-75页 |
3. 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-81页 |
第四章 结论 | 第81-82页 |
缩略表 | 第82-84页 |
附录 | 第84-94页 |
文献综述:Alu RNA的生物学功能 | 第85-93页 |
参考文献 | 第89-93页 |
博士研究生期间发表的论文 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |