| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| ·PEDV 研究进展 | 第11-13页 |
| ·PED 的概况 | 第11页 |
| ·PEDV 的基因组结构 | 第11页 |
| ·PEDV 基因组编码的蛋白 | 第11-12页 |
| ·PED 的流行病学 | 第12页 |
| ·PED 的临床表现及病理变化 | 第12-13页 |
| ·PED 的诊断与防制 | 第13页 |
| ·PEDV 的抗原表位研究进展 | 第13页 |
| ·噬菌体展示技术的研究进展 | 第13-15页 |
| ·噬菌体展示技术基本原理 | 第14页 |
| ·噬菌体展示技术的应用 | 第14-15页 |
| ·研究目的与意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-34页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·菌种、毒株及质粒 | 第17页 |
| ·试剂盒、工具酶和抗体 | 第17页 |
| ·主要药品及试剂 | 第17页 |
| ·实验试剂的配制 | 第17-18页 |
| ·仪器设备 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-34页 |
| ·PEDV rS1 原核表达载体的构建 | 第18-21页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第21-22页 |
| ·重组质粒 pGEX-6P-1- rS1 的诱导表达 | 第22-24页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第24-25页 |
| ·多克隆抗体的效价检测及生物活性检测 | 第25-26页 |
| ·噬菌体随机十二肽库对靶分子亲和配体的生物淘选 | 第26-28页 |
| ·结合克隆的特征鉴定 | 第28-30页 |
| ·所选多肽配体共有氨基酸序列的推导及合成 | 第30-31页 |
| ·淘选多肽的生物活性鉴定 | 第31-34页 |
| 3 试验结果 | 第34-45页 |
| ·重组表达质粒 pGEX-6P-1- rS1 的构建 | 第34-35页 |
| ·rS1 基因的亚克隆 | 第34页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的表达及活性鉴定 | 第35-37页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的 Western-Blot 检测 | 第37页 |
| ·rS1 多克隆抗体的活性鉴定 | 第37-39页 |
| ·多克隆抗体效价的测定 | 第37-38页 |
| ·多克隆抗体的间接免疫荧光检测 | 第38-39页 |
| ·多克隆抗体的 Western-Blot 检测 | 第39页 |
| ·噬菌体十二肽库对靶蛋白的生物淘选 | 第39-45页 |
| ·噬菌体十二肽库对靶蛋白的淘选 | 第39-41页 |
| ·Phage-ELISA 敏感性试验 | 第41-42页 |
| ·Phage-ELISA 的鉴别诊断检测 | 第42-43页 |
| ·多肽对病毒的体外抑制作用 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·rS1 基因在大肠杆菌中的表达 | 第45-46页 |
| ·rS1 原核表达质粒的设计与构建 | 第45页 |
| ·重组蛋白表达条件优化及蛋白纯化与复性 | 第45-46页 |
| ·多克隆抗血清的制备及鉴定 | 第46页 |
| ·rS1 亲和肽的筛选与鉴定 | 第46-48页 |
| ·噬菌体随机十二肽库对 rS1 亲和肽的筛选 | 第46-47页 |
| ·rS1 亲和肽的鉴定与功能分析 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |