摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
引言 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-25页 |
·血红素过氧化物酶 | 第11-18页 |
·血红素过氧化物酶 | 第11页 |
·血红素过氧化物酶的分类 | 第11页 |
·血红素过氧化物酶的催化过程 | 第11-12页 |
·血红素过氧化物酶的结构特征 | 第12-17页 |
·血红素过氧化物酶的生理功能 | 第17页 |
·血红素过氧化物酶的应用 | 第17-18页 |
·DyP-type过氧化物酶 | 第18-23页 |
·DyP-type过氧化物酶的发现 | 第18-19页 |
·DyP-type过氧化物酶的分类 | 第19-20页 |
·DyP-type过氧化物酶的晶体结构 | 第20-22页 |
·DyP-type过氧化物酶的潜在应用价值 | 第22-23页 |
·本论文的选题依据和研究内容 | 第23-25页 |
·选题依据 | 第23页 |
·研究内容 | 第23-25页 |
2 运动发酵单胞菌中假定过氧化物基因序列分析及pET21b-ZmDyP载体构建 | 第25-34页 |
·引言 | 第25页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-29页 |
·Zm-DyP过氧化物酶基因的序列分析 | 第26页 |
·动发酵单胞菌中总DNA的提取 | 第26-27页 |
·Zm-DyP过氧化物酶基因的PCR扩增 | 第27页 |
·Zm-DyP过氧化物酶基因的纯化 | 第27-28页 |
·Zm-DyP过氧化物酶基因与载体的连接 | 第28页 |
·pET21b(+)-ZmDyP表达载体转化大肠杆菌 | 第28-29页 |
·结果与讨论 | 第29-33页 |
·Zm-DyP过氧化物酶基因在大肠杆菌中的克隆 | 第29-30页 |
·Zm-DyP过氧化物酶的进化分析 | 第30-32页 |
·Zm-DyP过氧化物酶保守氨基酸残基的分析 | 第32-33页 |
·小结 | 第33-34页 |
3 ZmDyP过氧化物酶的重组表达、血红素特征分析及分子量鉴定 | 第34-41页 |
·引言 | 第34页 |
·实验材料 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-36页 |
·重组菌株的诱导表达 | 第34-35页 |
·重组ZmDyP的分离纯化 | 第35页 |
·重组ZmDyP的PAGE分析 | 第35页 |
·酶活测定方法 | 第35-36页 |
·重组ZmDyP的光谱分析 | 第36页 |
·重组ZmDyP的MALDI-TOF MS分析 | 第36页 |
·结果与讨论 | 第36-40页 |
·ZmDyP在大肠杆菌BL21(DE3)/pLysS中表达条件的优化 | 第36页 |
·重组ZmDyP的纯化 | 第36-38页 |
·重组ZmDyP的分子量鉴定 | 第38-39页 |
·ZmDyP的光谱分析 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
4 运动发酵单胞菌中ZmDyP过氧化物酶的生化性质表征 | 第41-51页 |
·引言 | 第41页 |
·实验材料 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-43页 |
·温度和pH值对重组ZmDyP活性的影响 | 第41页 |
·金属离子、抑制剂及有机溶剂对重组ZmDyP活性的影响 | 第41-42页 |
·重组ZmDyP的底物特异性及催化动力学 | 第42页 |
·外源性氧化压力对异源表达ZmDyP宿主菌的影响 | 第42-43页 |
·结果与讨论 | 第43-49页 |
·重组ZmDyP催化的最适条件 | 第43-44页 |
·金属离子及抑制剂对重组ZmDyP活性的影响 | 第44-47页 |
·重组ZmDyP的底物特异性利动力学参数 | 第47-48页 |
·大肠杆菌中表达ZmDyP对氧化压力的抗性 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录A ZmDyP的基因序列及编码的氨基酸序列 | 第57-58页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |