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小鼠非完整透明带胚胎的构建、培养及转染的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第1章 绪论第14-32页
   ·研究背景第14-15页
   ·无透明带胚胎培养的研究进展第15-22页
     ·透明带功能及其去除方法第15-16页
     ·无透明带胚胎培养方法的研究第16-19页
       ·无透明带胚胎的应用第19-22页
   ·哺乳动物卵母细胞及胚胎透明带的研究进展第22-28页
     ·卵母细胞受精前后透明带结构的变化第22-23页
     ·透明带糖蛋白的研究进展第23-27页
     ·透明带糖蛋白在受精过程中的作用第27-28页
     ·透明带糖蛋白和卵黄膜糖蛋白第28页
   ·病毒载体对胚胎的转染第28-30页
     ·逆转录病毒载体第28-29页
     ·.慢病毒载体第29-30页
   ·本课题的目的及主要研究内容第30-32页
第2章 材料与方法第32-39页
   ·试验材料第32页
     ·试验动物第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器第32页
   ·试验方法第32-38页
     ·溶液及相关试剂的配制第32-34页
     ·小鼠超排及胚胎的收集第34-35页
     ·无透明带胚胎与非完整透明带胚胎的获取及培养第35页
     ·彗星电泳第35-36页
     ·胚胎细胞统计第36-37页
     ·假孕鼠的制备第37页
     ·结扎雄鼠制备第37-38页
     ·胚胎移植第38页
     ·受胎率与出生率第38页
   ·数据统计与分析第38-39页
第3章 外源性透明质酸对无透明带胚胎发育影响的研究第39-52页
   ·引言第39页
   ·试验设计第39-41页
     ·外源性透明质酸浓度对小鼠无透明带发育的影响第39-40页
       ·透明质酸与其它大分子对无透明带胚胎发育的比较第40页
     ·透明质酸及大分子对无透明带胚胎移植后发育活力的影响第40页
     ·透明质酸移植液对无透明带胚胎移植后生活力的影响第40-41页
     ·移植液中透明质酸与其它大分子对无透明带胚胎生活力的影响第41页
   ·结果第41-46页
     ·外源性透明质酸浓度对小鼠无透明带发育的影响第41-43页
     ·透明质酸与其它大分子对无透明带胚胎发育的比较第43-44页
     ·透明质酸及大分子对无透明带胚胎移植发育活力的影响第44-45页
     ·透明质酸移植液对无透明带胚胎移植后生活力的影响第45-46页
     ·移植液中透明质酸与其它大分子对无透明带胚胎生活力的影响第46页
   ·讨论第46-51页
     ·外源性透明质酸浓度对小鼠无透明带发育的影响第47-49页
     ·透明质酸与其它大分子对无透明带胚胎发育的比较第49页
     ·透明质酸及大分子对无透明带胚胎移植发育活力的影响第49-50页
     ·透明质酸移植液对无透明带胚胎移植后生活力的影响第50页
     ·移植液中透明质酸与其它大分子对无透明带胚胎生活力的影响第50-51页
   ·小结第51-52页
第4章 构建非完整透明带胚胎适宜条件的研究第52-66页
   ·引言第52页
   ·试验设计第52-54页
     ·Pronase E 浓度对消化时间、胚胎发育及其转染效率的影响第52-53页
     ·非完整透明带胚胎消化时间区间的确定第53页
     ·Pronase E 消化时间对胚胎转染率及胚胎发育的影响第53页
     ·Pronase E 消化温度对非完整透明带胚胎发育的影响第53-54页
     ·终止消化太牛血清浓度对胚胎发育的影响第54页
     ·终止消化的时间对非完整透明带胚胎发育的影响第54页
   ·结果第54-60页
     ·Pronase E 浓度对消化时间、胚胎发育及转染率的影响第54-56页
     ·非完整透明带胚胎消化时间区间的确定第56页
     ·消化时间对胚胎发育率、转染率以及透明带结构的影响第56-58页
     ·消化温度对胚胎转染及发育的影响第58页
     ·终止消化的胎牛血清浓度对胚胎发育的影响第58-59页
     ·终止消化的时间对非完整透明带胚胎发育的影响第59-60页
   ·讨论第60-65页
     ·Pronase E 浓度对消化时间、胚胎发育及转染率的影响第60-61页
     ·非完整透明带胚胎消化时间区间的确定第61页
     ·消化时间对胚胎发育率、转染率以及透明带结构的影响第61-63页
     ·消化温度对胚胎转染及发育的影响第63-64页
     ·终止消化的胎牛血清浓度对胚胎发育的影响第64-65页
     ·终止消化的时间对非完整透明带胚胎发育的影响第65页
   ·小结第65-66页
第5章 海藻糖和透明质酸对非完整透明带胚胎发育影响的研究第66-80页
   ·引言第66页
   ·试验设计第66-68页
     ·基础培养液对非完整透明带胚胎发育的影响第66-67页
     ·海藻糖对非完整透明带胚胎发育的影响第67页
     ·透明质酸添加对非完整透明带胚胎发育的影响第67页
     ·海藻糖和透明质酸对非完整透明带胚胎发育联合效果的比较第67-68页
   ·结果第68-75页
     ·基础培养液对非完整透明带胚胎体外发育的影响第68-70页
     ·海藻糖对非完整透明带胚胎发育的影响第70-72页
     ·透明质酸添加对非完整透明带胚胎发育的影响第72-74页
     ·透明质酸与海藻糖对非完整透明带胚胎发育的影响第74-75页
   ·讨论第75-79页
     ·基础培养液对非完整透明带胚胎体外发育的影响第75-76页
     ·海藻糖对非完整透明带胚胎发育的影响第76-77页
     ·透明质酸添加对非完整透明带胚胎发育的影响第77-78页
     ·透明质酸与海藻糖对非完整透明带胚胎发育的影响第78-79页
   ·小结第79-80页
第6章 腺病毒载体转染非完整透明带胚胎适宜条件的研究第80-92页
   ·引言第80页
   ·试验设计第80-82页
     ·腺病毒载体转染时间对胚胎转染率的影响第80-81页
     ·腺病毒载体的滴度对胚胎转染效率及其发育率的影响第81页
     ·腺病毒载体滴度和转染时间对胚胎转染效率和发育的影响第81-82页
     ·腺病毒载体表达产物和胚胎消化处理对胚胎发育的影响第82页
   ·结果第82-87页
     ·腺病毒载体转染时间对胚胎转染率的影响第82-84页
     ·腺病毒载体滴度对胚胎转染率和胚胎发育的影响第84-85页
     ·腺病毒载体滴度和转染时间对胚胎转染效率和发育的影响第85-86页
     ·Pronase E 消化与腺病毒载体表达物对胚胎发育的影响第86-87页
   ·讨论第87-91页
     ·腺病毒载体转染时间对胚胎转染率的影响第87-89页
     ·腺病毒载体滴度对胚胎转染率和胚胎发育的影响第89-90页
     ·腺病毒载体滴度和转染时间对胚胎转染效率和发育的影响第90页
     ·Pronase E 消化与腺病毒载体表达物对胚胎发育的影响第90-91页
   ·小结第91-92页
第7章 海藻糖和透明质酸对非完整透明带胚胎转染及发育影响的研究第92-104页
   ·引言第92页
   ·试验设计第92-95页
     ·海藻糖转染液对非完整透明带胚胎转染率及发育率的影响第92-93页
     ·海藻糖添加顺序对非完整透明带胚胎转染效率及发育的影响第93页
     ·腺病毒载体滴度和海藻糖对胚胎转染率及发育率的影响第93-94页
     ·透明质酸转染液对非完整透明带胚胎转染率及发育率的影响第94页
     ·透明质酸添加顺序对非完整透明带胚胎转染率及发育的影响第94页
     ·腺病毒载体滴度及透明质酸对胚胎转染率及发育率的影响第94-95页
   ·结果第95-100页
     ·海藻糖转染液对非完整透明带胚胎转染率及发育率的影响第95-96页
     ·海藻糖添加顺序对非完整透明带胚胎转染效率及发育的影响第96页
     ·腺病毒载体及海藻糖对胚胎转染率及发育率的影响第96-97页
     ·透明质酸转染液对非完整透明带胚胎转染率及发育率的影响第97-98页
     ·透明质酸添加顺序对非完整透明带胚胎转染率及发育的影响第98-99页
     ·腺病毒载体滴度及透明质酸对胚胎转染率及发育率的影响第99-100页
   ·讨论第100-103页
     ·海藻糖转染液对非完整透明带胚胎转染率及发育率的影响第100-101页
     ·海藻糖添加顺序对非完整透明带胚胎转染效率及发育的影响第101页
     ·腺病毒载体及海藻糖对胚胎转染率及发育率的影响第101-102页
     ·透明质酸和海藻糖转染液对非完整透明带胚胎转染率及发育率的影响第102页
     ·腺病毒载体滴度及透明质酸对胚胎转染率及发育率的影响第102-103页
   ·小结第103-104页
第8章 非完整透明带胚胎透明带结构模型及其转染机制的研究第104-116页
   ·引言第104页
   ·试验设计第104-106页
     ·Pronase E 消化时间对形成非完整透明带胚胎比例的影响第104页
     ·海藻糖对非完整透明带胚胎转染效率的影响第104-105页
     ·透明质酸对非完整透明带胚胎转染效率的影响第105页
     ·海藻糖和透明质酸的添加时间对非完整透明带胚胎转染率的影响第105页
     ·转染载体分子大小对非完整透明带胚胎转染效率的影响第105-106页
   ·结果第106-109页
     ·Pronase E 消化时间对形成非完整透明带胚胎比例的影响第106-107页
     ·海藻糖对非完整透明带胚胎转染率的影响第107-108页
     ·透明质酸对非完整透明带胚胎转染效率的影响第108页
     ·海藻糖和透明质酸添加时间对非完整透明带胚胎转染率的影响第108-109页
     ·转染载体分子量对非完整透明带胚胎转染效率的影响第109页
   ·讨论第109-115页
     ·Pronase E 消化时间对形成非完整透明带胚胎比例的影响第112-113页
     ·透明质酸对非完整透明带胚胎转染效率的影响第113-114页
     ·海藻糖和透明质酸对非完整透明带胚胎转染率的影响第114-115页
     ·转染载体分子量对非完整透明带胚胎转染效率的影响第115页
   ·小结第115-116页
结论第116-117页
参考文献第117-130页
攻读博士学位期间承担的科研任务与主要成果第130-131页
致谢第131-132页
作者简介第132页

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