中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
目录 | 第10-12页 |
图和附表清单 | 第12-13页 |
中英文縮略词 | 第13-15页 |
前言 | 第15-18页 |
材料与方法 | 第18-32页 |
1 材料 | 第18-21页 |
·实验动物 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要仪器设备及实验材料 | 第19页 |
·溶液的配制 | 第19-21页 |
2 实验方法 | 第21-32页 |
·肺成纤维细胞的分离和纯化 | 第21页 |
·胸腔巨噬细胞的提取和纯化 | 第21-22页 |
·细胞培养方法 | 第22-23页 |
·巨噬细胞、成纤维细胞活性的测定 | 第23页 |
·矽肺纤维化体外细胞模型建立 | 第23-24页 |
·成纤维细胞基因组甲基化水平检测 | 第24-26页 |
·Real-Time PCR检测肺成纤维细胞中α-SMA、COL Ⅰ、COL Ⅲ、DMNT1、DNMT3a、DNMT3b、MeCP2和MBD2的mRNA水平的表达 | 第26-30页 |
·ELISA检测α-SMA、COL Ⅰ、COL Ⅲ、DMNT1、DNMT3b、DNMT3a、MeCP2和MBD2的表达 | 第30-31页 |
·统计学分析 | 第31-32页 |
结果 | 第32-48页 |
1. 巨噬细胞、成纤维细胞的体外培养 | 第32-35页 |
·巨噬细胞的培养 | 第32页 |
·游离二氧化硅对巨噬细胞的活性的影响 | 第32-33页 |
·成纤维细胞的培养 | 第33-34页 |
·成纤维细胞生长曲线 | 第34-35页 |
2 肺成纤维细胞转分化鉴定 | 第35-38页 |
·间接共培养模型中成纤维细胞的α-SMA、COL Ⅰ、和COL Ⅲ蛋白水平的表达 | 第35-36页 |
·ThinCert~(TM)共培养模型中成纤维细胞的α-SMA、COL Ⅰ、和COLⅢ蛋白水平的表达 | 第36-38页 |
3 成纤维细胞基因组甲基化水平检测 | 第38-42页 |
·基因组DNA的完整性与纯度的检测 | 第38-39页 |
·检测各组基因组DNA中的dC和5-dmC的含量 | 第39-42页 |
4. 肺成纤维细胞中DMNT1、DNMT3a、DNMT3b、MeCP2和MBD2的mRNA水平及蛋白水平的表达情况 | 第42-48页 |
·肺成纤维细胞总RNA完整性与纯度提取 | 第42页 |
·甲基化相关酶mRNA水平的表达 | 第42-46页 |
·甲基化相关酶蛋白水平的表达 | 第46-48页 |
讨论 | 第48-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
综述 | 第58-73页 |
参考文献 | 第67-73页 |
个人简历 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |