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游离二氧化硅诱导大鼠肺成纤维细胞转分化过程中基因组甲基化水平

中文摘要第1-7页
Abstract第7-10页
目录第10-12页
图和附表清单第12-13页
中英文縮略词第13-15页
前言第15-18页
材料与方法第18-32页
 1 材料第18-21页
   ·实验动物第18页
   ·主要试剂第18-19页
   ·主要仪器设备及实验材料第19页
   ·溶液的配制第19-21页
 2 实验方法第21-32页
   ·肺成纤维细胞的分离和纯化第21页
   ·胸腔巨噬细胞的提取和纯化第21-22页
   ·细胞培养方法第22-23页
   ·巨噬细胞、成纤维细胞活性的测定第23页
   ·矽肺纤维化体外细胞模型建立第23-24页
   ·成纤维细胞基因组甲基化水平检测第24-26页
   ·Real-Time PCR检测肺成纤维细胞中α-SMA、COL Ⅰ、COL Ⅲ、DMNT1、DNMT3a、DNMT3b、MeCP2和MBD2的mRNA水平的表达第26-30页
   ·ELISA检测α-SMA、COL Ⅰ、COL Ⅲ、DMNT1、DNMT3b、DNMT3a、MeCP2和MBD2的表达第30-31页
   ·统计学分析第31-32页
结果第32-48页
 1. 巨噬细胞、成纤维细胞的体外培养第32-35页
   ·巨噬细胞的培养第32页
   ·游离二氧化硅对巨噬细胞的活性的影响第32-33页
   ·成纤维细胞的培养第33-34页
   ·成纤维细胞生长曲线第34-35页
 2 肺成纤维细胞转分化鉴定第35-38页
   ·间接共培养模型中成纤维细胞的α-SMA、COL Ⅰ、和COL Ⅲ蛋白水平的表达第35-36页
   ·ThinCert~(TM)共培养模型中成纤维细胞的α-SMA、COL Ⅰ、和COLⅢ蛋白水平的表达第36-38页
 3 成纤维细胞基因组甲基化水平检测第38-42页
   ·基因组DNA的完整性与纯度的检测第38-39页
   ·检测各组基因组DNA中的dC和5-dmC的含量第39-42页
 4. 肺成纤维细胞中DMNT1、DNMT3a、DNMT3b、MeCP2和MBD2的mRNA水平及蛋白水平的表达情况第42-48页
   ·肺成纤维细胞总RNA完整性与纯度提取第42页
   ·甲基化相关酶mRNA水平的表达第42-46页
   ·甲基化相关酶蛋白水平的表达第46-48页
讨论第48-53页
结论第53-54页
参考文献第54-58页
综述第58-73页
 参考文献第67-73页
个人简历第73-74页
致谢第74页

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