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转Bcl-2、Ced-9、PpBl-1基因水稻抗盐性及其抗性机理研究

致谢第1-11页
摘要第11-14页
Abstract第14-17页
第一章 文献综述第17-35页
 1 动物细胞程序性死亡第17-23页
   ·动物细胞凋亡第17-18页
   ·凋亡调控途径第18-20页
     ·线粒体途径第18-19页
     ·死亡受体途径第19-20页
   ·凋亡抑制基因第20-23页
     ·Bcl-2第20-21页
     ·Ced-9第21-22页
     ·BI-1第22-23页
 2 植物细胞程序性死亡第23-30页
   ·植物细胞程序性死亡概念第23-24页
   ·动物抗凋亡基因和植物细胞程序性死亡第24-25页
   ·植物细胞程序性死亡离子信号传导机制第25-30页
     ·Ca~(2+)信号第25-27页
     ·胞质离子平衡第27-30页
 3 非损伤微测技术与植物耐盐生理研究第30-35页
   ·非损伤微测技术简介第30-31页
   ·SIET的工作原理第31-32页
   ·非损伤微测技术在植物耐盐生理和PCD研究进展第32-35页
第二章 Bcl-2通过调控K~+外流抑制盐胁迫因起的PCD而提高水稻抗盐胁迫能力第35-59页
 1 前言第35-36页
 2 实验材料和方法第36-41页
   ·实验材料第36页
   ·实验方法第36-41页
     ·生理指标检测第36页
     ·凋亡检测第36-37页
     ·FDA检测第37页
     ·根部Ca~(2+)信号测定第37-38页
     ·水稻总RNA提取第38页
     ·实时定量RT-PCR第38-41页
 3 实验结果和分析第41-55页
   ·Bcl-2可提高水稻的抗盐胁迫能力第41-44页
   ·Bcl-2的表达抑制盐胁迫引起的PCD第44-47页
   ·Bcl-2通过调控胞质自由Ca~(2+)来抑制PCD第47-48页
   ·Bcl-2通过调控K~+外流抑制PCD第48-53页
     ·Bcl-2调控盐胁迫引起的水稻根尖细胞K~+流的变化第48-49页
     ·Bcl-2调控氧化胁迫引起的水稻根尖细胞K~+流的变化第49-50页
     ·La~(3+)抑制盐胁迫引起的水稻根尖细胞K~+外流第50-52页
     ·Bcl-2影响对盐胁迫引起的水稻根尖分生区细胞Ca~(2+)流第52-53页
   ·在盐胁迫下,胞质K~+浓度可能影响OsVPEs的表达第53-55页
 4 讨论第55-59页
   ·Bcl-2通过抑制PCD提高水稻对盐胁迫的耐受性第55页
   ·Bcl-2通过控制Ca~(2+)流抑制盐胁迫引起的PCD第55-56页
   ·Bcl-2通过调控K~+外流抑制盐胁迫引起的PCD第56-57页
   ·胞质K~+浓度可能影响OsVPEs的表达第57-59页
第三章 农杆菌介导法将Ced-9/PpBI-1基因转入水稻及其鉴定分析第59-83页
 1 前言第59-60页
 2 实验材料和方法第60-68页
   ·实验材料第60页
     ·菌株第60页
     ·植物材料第60页
   ·实验方法第60-68页
     ·农杆菌介导法转化水稻第60-61页
     ·转基因植株分子鉴定第61-63页
     ·转基因水稻T1代Southern检测第63-66页
     ·转基因水稻T1代基因表达检测第66-67页
     ·转基因水稻抗盐性鉴定第67页
     ·DNA ladder检测第67-68页
 3 实验结果和分析第68-80页
   ·转基因植株获得第68-70页
   ·转基因植株T1代筛选及鉴定第70页
   ·转Ced-9/PpBI-1水稻T1代部分株系的鉴定第70-71页
   ·转Ced-9/PpBI-1水稻T1代株系的Southern分析及表达鉴定第71-72页
     ·转Ced-9和PpBI-1基因水稻T1代株系的Southern杂交分析第71-72页
     ·转Ced-9PpBI-1基因水稻T1代株系的表达分析第72页
   ·T2代水稻的目的基因PCR检测及筛选纯合体第72-73页
   ·转基因植株T3代生长发育分析第73-75页
     ·发芽率鉴定第73-74页
     ·转Ced-9和PpBI-1基因水稻T3代株系生长发育坚定第74-75页
   ·Ced-9/PpBI-1基因植株抗盐性鉴定第75-78页
     ·Ced-9和PpBI-1能改善盐胁迫引起的萌发率下降第75-77页
     ·Ced-9和PpBI-1能减少盐胁迫对水稻根伸长的影响第77-78页
   ·Ced-9能抑制盐胁迫引起的PCD第78-80页
 4 讨论第80-83页
   ·抗凋亡基因转化和转化株系的遗传特性第80-81页
   ·转抗凋亡基因株系的生长发育特性第81页
   ·抗凋亡基因Ced-9和PpBI1可提高水稻对盐胁迫的耐受性第81-83页
第四章 总结与展望第83-86页
 1 总结第83-84页
   ·主要结论第83-84页
   ·创新性第84页
 2 展望第84-86页
参考文献第86-97页
附录1:缩略词—中英文对照第97-98页
附录2:抗生素及培养基母液配方第98-104页
附录3:Southern blotting试剂第104-106页
攻读学位期间研究成果第106页

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