摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-39页 |
·卵菌基因组学和功能基因组学 | 第12-24页 |
·卵菌基因组测序 | 第12-16页 |
·卵菌BAC文库 | 第16页 |
·卵菌转录组学 | 第16-17页 |
·卵菌的分子遗传操作 | 第17-19页 |
·基因沉默技术在卵菌基因功能分析中的应用 | 第19-22页 |
·基因组定向诱变技术在卵菌中的应用 | 第22页 |
·异源表达在卵菌基因功能分析中的应用 | 第22-24页 |
·卵菌病害模式系统 | 第24-25页 |
·一种潜在的新型植物抗病策略-寄主诱导的基因沉默 | 第25-29页 |
·疫霉菌阶段发育的分子生物学 | 第29-34页 |
·质膜氢离子通道蛋白 | 第34-37页 |
·质膜氢离子通道蛋白的空间结构 | 第35-36页 |
·质膜氢离子通道蛋白基因翻译水平的调控 | 第36页 |
·质膜氢离子通道蛋白基因翻译后水平的调控 | 第36-37页 |
·质膜氢离子通道蛋白的生物学功能 | 第37页 |
·本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
第二章 寄生疫霉菌PnPMA1在游动孢子发育中的作用 | 第39-65页 |
·试验材料 | 第40页 |
·菌株、质粒 | 第40页 |
·植物材料 | 第40页 |
·试验方法 | 第40-52页 |
·PnPMA1亚细胞定位分析 | 第40-43页 |
·利用lacZ基因融合的生物化学方法分析PnPMA1拓扑结构 | 第43-46页 |
·基因沉默转化子的获得 | 第46-48页 |
·Northern blot检测疫霉菌沉默转化子中siRNA的表达 | 第48-49页 |
·实时定量PCR检测转化子中PnPMA1的表达 | 第49-51页 |
·沉默转化子表型分析 | 第51-52页 |
·结果与分析 | 第52-62页 |
·PnPMA1的亚细胞定位 | 第52-53页 |
·PnPMA1的拓扑结构分析 | 第53-55页 |
·PnPMA1沉默转化子的制备 | 第55-57页 |
·PnPMA1基因沉默转化子菌落形态和生长速率未受到影响 | 第57页 |
·PnPMA1基因沉默转化子产生不游动的游动孢子 | 第57-60页 |
·PnPMA1基因沉默转化子产生大的畸形游动孢子 | 第60-62页 |
·讨论 | 第62-65页 |
第三章 寄主诱导的基因沉默在卵菌中应用的可行性研究 | 第65-82页 |
·试验材料 | 第65-66页 |
·菌株、质粒 | 第65页 |
·植物材料 | 第65-66页 |
·试验方法 | 第66-70页 |
·植物表达载体构建 | 第66-67页 |
·农杆菌的电击转化和阳性克隆的鉴定 | 第67-68页 |
·拟南芥的培养 | 第68页 |
·拟南芥的转化 | 第68页 |
·拟南芥转化子的筛选 | 第68-69页 |
·拟南芥基因组DNA的提取 | 第69页 |
·转基因拟南芥的PCR鉴定 | 第69页 |
·拟南芥RNA的提取 | 第69页 |
·Northern blot检测转基因拟南芥中siRNA的表达 | 第69-70页 |
·拟南芥接菌测试 | 第70页 |
·细胞学观察 | 第70页 |
·实时定量PCR检测疫霉菌中靶基因的表达 | 第70页 |
·结果与分析 | 第70-78页 |
·寄生疫霉菌中存在小RNA介导的基因沉默通路 | 第70-72页 |
·制备表达GFP和PnPMA1基因dsRNA的转基因拟南芥 | 第72-73页 |
·定殖的寄生疫霉菌中GFP的荧光信号未受到转dsGFP寄主植物的干扰 | 第73-75页 |
·定殖的寄生疫霉菌中靶基因的转录未受到转基因植物的影响 | 第75-77页 |
·从病组织再分离的疫霉菌中未检测到靶基因同源的siRNA分子 | 第77-78页 |
·转基因拟南芥中定殖的寄生疫霉菌游动孢子游动性未受到影响 | 第78页 |
·讨论 | 第78-82页 |
第四章 结论 | 第82-84页 |
·结论 | 第82页 |
·创新点 | 第82-83页 |
·研究展望 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
作者简介 | 第99页 |