中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-12页 |
一、 引言—水稻遗传转化研究进展 | 第12-36页 |
1.1 水稻遗传转化的主要方法 | 第13-25页 |
1.2 水稻遗传转化应用的外植体 | 第25-26页 |
1.3 水稻遗传转化常用的培养基 | 第26-28页 |
1.4 水稻遗传转化的报告基因、标记基因及选择剂 | 第28-29页 |
1.5 外源基因在转基因水稻植株中的遗传特性 | 第29-30页 |
1.6 有益农艺性状基因在水稻改良方面的应用 | 第30-31页 |
1.7 水稻为模式植物在基因表达调控研究中的应用 | 第31-36页 |
二、 实验材料与方法 | 第36-56页 |
2.1 水稻抗除草剂基因转化 | 第36-47页 |
2.1.1 实验材料 | 第36-38页 |
2.1.2 实验方法 | 第38-47页 |
2.1.2.1 水稻愈伤组织的诱导和继代培养 | 第38页 |
2.1.2.2 水稻植株的再生 | 第38-39页 |
2.1.2.3 水稻愈伤组织对BASTA除草剂抗性测定 | 第39页 |
2.1.2.4 pCAMBIA 1201质粒的提取 | 第39-40页 |
2.1.2.5 基因枪法转化水稻参数的优化 | 第40页 |
2.1.2.6 水稻bar基因的基因枪法转化 | 第40-41页 |
2.1.2.7 BASTA除草剂抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第41-42页 |
2.1.2.8 转bar基因水稻植株的检测 | 第42-47页 |
2.2 水稻抗稻瘟病基因转化及遗传 | 第47-49页 |
2.2.1 实验材料 | 第47页 |
2.2.2 实验方法 | 第47-49页 |
2.2.2.1 水稻芪类合成酶基因的基因枪法转化 | 第47页 |
2.2.2.2 T_1、T_2代转芪类合成酶基因水稻植株苗期叶瘟鉴定 | 第47-48页 |
2.2.2.3 T_1代转芪类合成酶基因水稻植株穗颈瘟鉴定 | 第48页 |
2.2.2.4 T_1代转芪类合成酶基因水稻植株农艺性状调查 | 第48页 |
2.2.2.5 T_1、T_2代转芪类合成酶基因水稻植株的PCR鉴定 | 第48-49页 |
2.3 Xa21基因与载体质粒pCAMBIA 1201的重组 | 第49-56页 |
2.3.1 实验材料 | 第49-50页 |
2.3.2 实验方法 | 第50-56页 |
2.3.2.1 质粒pCAMBIA 1201转化大肠杆菌及鉴定 | 第50-53页 |
2.3.2.2 质粒pCAMBIA 1201冷冻热激法转化农杆菌 | 第53页 |
2.3.2.3 质粒pB822 DNA的限制性酶切 | 第53-54页 |
2.3.2.4 Xa21基因片段的分离及纯化 | 第54-55页 |
2.3.2.5 Xa21基因片段与载体pCAMBIA 1201重组 | 第55-56页 |
三、 结果与分析 | 第56-77页 |
3.1 吉林省主栽水稻品种再生培养体系的优化 | 第56-59页 |
3.1.1 不同基因型水稻成熟胚愈伤组织诱导频率 | 第56-57页 |
3.1.2 继代培养基不同激素水平对水稻愈伤组织分化的影响 | 第57-58页 |
3.1.3 干燥处理对水稻愈伤组织分化能力的影响 | 第58-59页 |
3.2 转bar基因水稻植株的获得 | 第59-65页 |
3.2.1 愈伤组织对BASTA除草剂敏抗测定结果 | 第60页 |
3.2.2 不同基因枪转化参数对Gus基因瞬时表达的影响 | 第60-61页 |
3.2.3 BASTA除草剂抗性愈伤组织的筛选 | 第61-62页 |
3.2.4 转bar基因水稻植株的再生 | 第62-63页 |
3.2.5 转bar基因水稻植株的检测结果 | 第63-65页 |
3.2.5.1 转bar基因水稻植株Gus基因的组织化学分析结果 | 第63页 |
3.2.5.2 转bar基因水稻植株叶片BASTA涂布鉴定结果 | 第63页 |
3.2.5.3 转bar基因水稻植株PCR检测结果 | 第63-64页 |
3.2.5.4 转bar基因水稻植株Southern杂交结果 | 第64-65页 |
3.3 水稻芪类合成酶基因转化及后代遗传特性研究 | 第65-76页 |
3.3.1 T_0代转芪类合成酶基因水稻植株的获得 | 第65页 |
3.3.2 T_1代转芪类合成酶基因水稻植株抗病鉴定及遗传特性 | 第65-73页 |
3.3.3 T_2代转芪类合成酶基因水稻植株抗病鉴定及遗传特性 | 第73-76页 |
3.4 Xa21基因重组 | 第76-77页 |
3.4.1 质粒pCAMBIA 1201 DNA转化大肠杆菌 | 第76页 |
3.4.2 质粒pB822的KpnI限制酶切 | 第76页 |
3.4.3 Xa21基因片段与载体pCAMBIA 1201的重组 | 第76-77页 |
四、 结论 | 第77-79页 |
五、 参考文献 | 第79-92页 |
六、 附图 | 第92-97页 |
后记——致谢 | 第97页 |