| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-30页 |
| 1．1 植物病毒在植物原生质体中侵染的研究进展 | 第11-17页 |
| 1．1．1 原生质体培养体系在植物病毒研究中的作用 | 第12页 |
| 1．1．2 病毒粒体在原生质体内的积累 | 第12-13页 |
| 1．1．3 病毒核酸在原生质体内的合成 | 第13-14页 |
| 1．1．4 病毒在原生质体内诱导蛋白质的合成 | 第14-15页 |
| 1．1．5 病毒核酸在原生质体内的瞬间表达 | 第15-17页 |
| 1．2 水稻条纹病毒的研究概况 | 第17-26页 |
| 1．2．1 病原学 | 第17-18页 |
| 1．2．2 血清学 | 第18-19页 |
| 1．2．3 分子生物学 | 第19-26页 |
| 1．2．3．1 基因组的结构和功能 | 第19-21页 |
| 1．2．3．2 基因组的转录和表达 | 第21-22页 |
| 1．2．3．3 病害特异性蛋白（SP） | 第22-23页 |
| 1．2．3．4 外壳蛋白（CP） | 第23-24页 |
| 1．2．3．5 依赖RNA的RNA的聚合酶（RdRp） | 第24-25页 |
| 1．2．3．6 其它可能编码的蛋白 | 第25-26页 |
| 1．3 RSV与寄主之间的互作 | 第26-28页 |
| 1．3．1 RSV与寄主水稻之间的互作 | 第26-27页 |
| 1．3．2 RSV与介体灰飞虱间的互作 | 第27-28页 |
| 1．4 存在的问题及本研究目的与意义 | 第28-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-51页 |
| 2．1 材料 | 第30-31页 |
| 2．1．1 供试毒源 | 第30页 |
| 2．1．2 供试昆虫 | 第30页 |
| 2．1．3 供试水稻 | 第30页 |
| 2．1．4 抗血清 | 第30页 |
| 2．1．5 试剂 | 第30-31页 |
| 2．2 方法 | 第31-51页 |
| 2．2．1 毒源繁殖 | 第31页 |
| 2．2．2 病毒提纯 | 第31-33页 |
| 2．2．2．1 提纯方法 | 第31-32页 |
| 2．2．2．2 提纯制剂的紫外扫描 | 第32页 |
| 2．2．2．3 提纯病毒的电镜观察 | 第32-33页 |
| 2．2．3 水稻愈伤组织诱导 | 第33-34页 |
| 2．2．3．1 未成熟胚诱导 | 第33页 |
| 2．2．3．2 成熟胚诱导 | 第33-34页 |
| 2．2．4 悬浮细胞系建立 | 第34页 |
| 2．2．5 原生质体病毒侵染体系的建立 | 第34-37页 |
| 2．2．5．1 原生质体分离和纯化 | 第34-36页 |
| 2．2．5．2 原生质体活力测定 | 第36页 |
| 2．2．5．3 RSV接种原生质体 | 第36页 |
| 2．2．5．4 荧光抗体染色统计感染病毒原生质体的百分比 | 第36-37页 |
| 2．2．6 ELISA检测RSV侵染的原生质体内的CP、SP | 第37-39页 |
| 2．2．6．1 抗血清效价的测定 | 第37-38页 |
| 2．2．6．2 抗血清最适工作浓度测定 | 第38页 |
| 2．2．6．3 细胞粗蛋白的制备 | 第38-39页 |
| 2．2．6．4 Bradford法测定蛋白质含量 | 第39页 |
| 2．2．6．5 ELISA检测 | 第39页 |
| 2．2．7 Western-blot检测RSV侵染的原生质体内CP、SP | 第39-41页 |
| 2．2．7．1 CP、SP的SDS-PAGE分析 | 第39-40页 |
| 2．2．7．2 Western-blot检测 | 第40-41页 |
| 2．2．8 Northern-blot检测病毒RNA在原生质体内的积累 | 第41-46页 |
| 2．2．8．1 引物的设计和合成 | 第41页 |
| 2．2．8．2 植物总RNA的提取 | 第41-42页 |
| 2．2．8．3 CP、SP基因的cDNA第一条链合成 | 第42页 |
| 2．2．8．4 PCR扩增 | 第42-43页 |
| 2．2．8．5 PCR产物纯化 | 第43-44页 |
| 2．2．8．6 DIG标记DNA探针 | 第44页 |
| 2．2．8．7 探针浓度的测定 | 第44-45页 |
| 2．2．8．8 Northen-blot点杂交检测 | 第45-46页 |
| 2．2．9 叶绿体中CP、SP的含量与水稻褪绿症状的关系 | 第46-51页 |
| 2．2．9．1 完整游离叶绿体的提纯 | 第46-48页 |
| 2．2．9．2 叶绿体中的总蛋白的提取和定量 | 第48页 |
| 2．2．9．3 叶绿体蛋白的斑点酶联法检测 | 第48-49页 |
| 2．2．9．4 叶绿体蛋白的Western-blot检测 | 第49页 |
| 2．2．9．5 RSV粒体的叶绿体体外跨膜运输 | 第49-51页 |
| 3 结果和分析 | 第51-71页 |
| 3．1 病毒的提纯和鉴定 | 第51-52页 |
| 3．2 CP、SP抗血清效价测定 | 第52-53页 |
| 3．3 愈伤组织的诱导 | 第53-54页 |
| 3．4 细胞悬浮培养物的建立 | 第54-55页 |
| 3．5 原生质体的分离和纯化 | 第55-57页 |
| 3．6 荧光抗体染色统计病毒感染原生质体的百分比 | 第57-58页 |
| 3．7 接种后原生质体总蛋白的SDS-PAGE电泳图谱 | 第58页 |
| 3．8 SP在水稻原生质体内的表达周期 | 第58-60页 |
| 3．9 RSV在水稻原生质体内的表达周期 | 第60-61页 |
| 3．10 PCR扩增结果 | 第61-62页 |
| 3．11 探针标记结果 | 第62-63页 |
| 3．12 转录CP、SP的mRNA在水稻细胞内的积累周期 | 第63-65页 |
| 3．13 症状不同的叶绿体总蛋白SDS-PAGE电泳图谱 | 第65-66页 |
| 3．14 症状严重度与水稻叶绿体中CP含量的关系 | 第66-67页 |
| 3．15 症状严重度与水稻叶绿体中SP含量的关系 | 第67-69页 |
| 3．16 RSV粒体离体叶绿体的跨膜运输 | 第69-71页 |
| 4． 讨论 | 第71-77页 |
| 4．1 水稻原生质体侵染体系的建立 | 第71-73页 |
| 4．1．1 影响制备高质量原生质体的因素 | 第71-72页 |
| 4．1．2 影响PEG介导接种病毒的因素 | 第72-73页 |
| 4．2 RSV在原生质体内的复制和表达 | 第73-75页 |
| 4．3 CP、SP在叶绿体内的含量同水稻褪绿症状的关系 | 第75-77页 |
| 5． 小结和展望 | 第77-81页 |
| 5．1 小结 | 第77-78页 |
| 5．2 关于RSV的致病机制 | 第78页 |
| 5．3 关于病毒编码的蛋白 | 第78-79页 |
| 5．4 关于RSV的抗性的研究 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 附录一 | 第89-97页 |
| 附录二 | 第97-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
