中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-17页 |
引言 | 第17-19页 |
第1章 文献综述 | 第19-33页 |
1. 造血干细胞 | 第19页 |
2. 间充质干细胞 | 第19-22页 |
·MSCs 的基本生物学特性 | 第19-20页 |
·MSCs 的分离方法 | 第20-21页 |
·MSCs 的造血调控作用 | 第21页 |
·MSCs 易于外源基因转染和表达 | 第21-22页 |
3. 氢醌 | 第22-23页 |
·HQ 可引起染色体畸变和 DNA 损伤 | 第22-23页 |
·HQ 引起氧化损伤 | 第23页 |
·HQ 引起细胞凋亡 | 第23页 |
4. PARP-1 | 第23-28页 |
·PARP-1 的结构和代谢 | 第23-25页 |
·PARP-1 与 DNA 修复 | 第25-26页 |
·PARP-1 与凋亡 | 第26-27页 |
·PARP-1 与细胞坏死 | 第27页 |
·PARP-1 与肿瘤的发生与治疗 | 第27-28页 |
·PARP-1 的抑制方法 | 第28页 |
5. RNAi 技术 | 第28-30页 |
·RNAi 的作用机制 | 第28-29页 |
·RNAi 的作用特点 | 第29页 |
·RNAi 的应用 | 第29-30页 |
6. DNA 甲基化 | 第30-33页 |
·DNA 甲基转移酶 | 第30-31页 |
·DNA 甲基化与肿瘤发生 | 第31-32页 |
·DNA 甲基化的研究方法 | 第32-33页 |
第2章 大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定 | 第33-41页 |
1 材料 | 第33-34页 |
·动物与分组 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要试剂配制 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-37页 |
·大鼠 BMSCs 的分离培养 | 第34-36页 |
·传代培养大鼠 BMSCs 分化潜能检测 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-39页 |
·大鼠 BMSCs 的纯化与扩增 | 第37页 |
·流式细胞仪细胞周期的测定 | 第37-38页 |
·传代培养大鼠 BMSCs 分化潜能检测 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
·大鼠 BMSCs 的分离、纯化与扩增 | 第39页 |
·BMSCs 的检测 | 第39-41页 |
第3章 大鼠聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 基因 RNA 干扰表达质粒构建与鉴定 | 第41-57页 |
1 材料 | 第41-43页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·菌株和质粒载体 | 第41页 |
·主要试剂 | 第41-42页 |
·主要溶液配制 | 第42-43页 |
2 方法 | 第43-48页 |
·PARP-l 基因 shRNA 表达载体构建 | 第43-46页 |
·重组质粒转染大鼠 BMSCs 及 PARP-1 RNAi 表达质粒筛选 | 第46-48页 |
3 结果 | 第48-54页 |
·PARP-l 基因 shRNA 表达载体构建 | 第48-53页 |
·重组质粒转染大鼠 BMSCs 及 PARP-1 RNAi 表达质粒鉴定 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
第4章 低剂量氢醌对正常和 PARP-1 缺陷 BMSCs 的毒作用 | 第57-79页 |
1 材料 | 第57-58页 |
·主要仪器 | 第57-58页 |
·主要试剂 | 第58页 |
·主要溶液配制 | 第58页 |
2 方法 | 第58-62页 |
·细胞形态学观察 | 第58页 |
·细胞生长曲线绘制(MTT 法) | 第58-59页 |
·HQ 染毒剂量的选择及细胞活力测定(MTT 法) | 第59页 |
·细胞凋亡检测 | 第59页 |
·微核试验 | 第59-60页 |
·PARP-1 基因和 DNMTs 基因 mRNA 表达水平检测(Q-PCR) | 第60-61页 |
·统计学分析 | 第61-62页 |
3 结果 | 第62-72页 |
·细胞形态学观察 | 第62页 |
·生长曲线的绘制 | 第62页 |
·HQ 染毒剂量的选择及细胞活力测定 | 第62-63页 |
·细胞凋亡检测 | 第63-64页 |
·微核试验 | 第64-66页 |
·PARP-1 基因和 DNMTs 基因 mRNA 表达水平检测 | 第66-72页 |
4 讨论 | 第72-79页 |
结论 | 第79-81页 |
创新点 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-99页 |
攻博期间发表的学术论文 | 第99-100页 |
致谢 | 第100页 |