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利用RNA干扰技术研究PARP-1在低剂量氢醌对骨髓间充质干细胞毒性中的作用

中文摘要第1-10页
Abstract第10-17页
引言第17-19页
第1章 文献综述第19-33页
 1. 造血干细胞第19页
 2. 间充质干细胞第19-22页
   ·MSCs 的基本生物学特性第19-20页
   ·MSCs 的分离方法第20-21页
   ·MSCs 的造血调控作用第21页
   ·MSCs 易于外源基因转染和表达第21-22页
 3. 氢醌第22-23页
   ·HQ 可引起染色体畸变和 DNA 损伤第22-23页
   ·HQ 引起氧化损伤第23页
   ·HQ 引起细胞凋亡第23页
 4. PARP-1第23-28页
   ·PARP-1 的结构和代谢第23-25页
   ·PARP-1 与 DNA 修复第25-26页
   ·PARP-1 与凋亡第26-27页
   ·PARP-1 与细胞坏死第27页
   ·PARP-1 与肿瘤的发生与治疗第27-28页
   ·PARP-1 的抑制方法第28页
 5. RNAi 技术第28-30页
   ·RNAi 的作用机制第28-29页
   ·RNAi 的作用特点第29页
   ·RNAi 的应用第29-30页
 6. DNA 甲基化第30-33页
   ·DNA 甲基转移酶第30-31页
   ·DNA 甲基化与肿瘤发生第31-32页
   ·DNA 甲基化的研究方法第32-33页
第2章 大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定第33-41页
 1 材料第33-34页
   ·动物与分组第33页
   ·主要仪器第33页
   ·主要试剂第33-34页
   ·主要试剂配制第34页
 2 实验方法第34-37页
   ·大鼠 BMSCs 的分离培养第34-36页
   ·传代培养大鼠 BMSCs 分化潜能检测第36-37页
 3 结果第37-39页
   ·大鼠 BMSCs 的纯化与扩增第37页
   ·流式细胞仪细胞周期的测定第37-38页
   ·传代培养大鼠 BMSCs 分化潜能检测第38-39页
 4 讨论第39-41页
   ·大鼠 BMSCs 的分离、纯化与扩增第39页
   ·BMSCs 的检测第39-41页
第3章 大鼠聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 基因 RNA 干扰表达质粒构建与鉴定第41-57页
 1 材料第41-43页
   ·主要仪器第41页
   ·菌株和质粒载体第41页
   ·主要试剂第41-42页
   ·主要溶液配制第42-43页
 2 方法第43-48页
   ·PARP-l 基因 shRNA 表达载体构建第43-46页
   ·重组质粒转染大鼠 BMSCs 及 PARP-1 RNAi 表达质粒筛选第46-48页
 3 结果第48-54页
   ·PARP-l 基因 shRNA 表达载体构建第48-53页
   ·重组质粒转染大鼠 BMSCs 及 PARP-1 RNAi 表达质粒鉴定第53-54页
 4 讨论第54-57页
第4章 低剂量氢醌对正常和 PARP-1 缺陷 BMSCs 的毒作用第57-79页
 1 材料第57-58页
   ·主要仪器第57-58页
   ·主要试剂第58页
   ·主要溶液配制第58页
 2 方法第58-62页
   ·细胞形态学观察第58页
   ·细胞生长曲线绘制(MTT 法)第58-59页
   ·HQ 染毒剂量的选择及细胞活力测定(MTT 法)第59页
   ·细胞凋亡检测第59页
   ·微核试验第59-60页
   ·PARP-1 基因和 DNMTs 基因 mRNA 表达水平检测(Q-PCR)第60-61页
   ·统计学分析第61-62页
 3 结果第62-72页
   ·细胞形态学观察第62页
   ·生长曲线的绘制第62页
   ·HQ 染毒剂量的选择及细胞活力测定第62-63页
   ·细胞凋亡检测第63-64页
   ·微核试验第64-66页
   ·PARP-1 基因和 DNMTs 基因 mRNA 表达水平检测第66-72页
 4 讨论第72-79页
结论第79-81页
创新点第81-83页
参考文献第83-99页
攻博期间发表的学术论文第99-100页
致谢第100页

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